Účinnost INERSANu u pacientů s chronickou parodontitidou jako doplněk k úplné dezinfekci úst

Tato studie bude provedena jako dvojitě zaslepená, randomizovaná, paralelní skupina, placebem kontrolovaná klinická studie, zahrnující subjekty ve věku 21 let nebo starší, aby se vyhodnotily příznivé účinky tablet INERSAN® jako primární léčby u pacientů s chronickou parodontitidou.

Pacienti splňující "kritéria pro zařazení" budou zařazeni do studie poté, co jim vysvětlí cíl studie a po obdržení jejich písemného souhlasu.

Probiotické tablety použité v této studii obsahují jeden kmen Lactobacilli, Lactobacillus brevis CD2, jako aktivní složku. Placebo bude směs cukrů a solí používaných jako pomocné látky v aktivní formulaci. Aktivní studované léčivo a placebo budou mít identický vzhled a organoleptické vlastnosti. Studijní léčba bude zahájena ode dne zařazení a bude pokračovat po dobu 6 týdnů. Denní dávka zkušebního přípravku bude 5 tablet denně, jedna tableta se užívá každé 2-3 hodiny. Tablety se budou uchovávat v ústech, aby se samy rozpustily. Horký nápoj (např.: čaj, káva, mléko atd.) se nesmí pít alespoň půl hodiny před a po podání léku, protože zvýšená teplota by mohla inaktivovat bakterie.

Studované léčivo a placebo budou poskytnuty podle randomizačního schématu, zabaleny v balíčcích specifických pro pacienta s číslem pacienta. Studie je dvojitě maskovaná a pacient i zkoušející budou během celého průběhu studie zaslepeni. Zapečetěná kopie randomizačních kódů bude předána hlavnímu zkoušejícímu a bude nařízena otevřít a prolomit kódy pouze v případě nežádoucích událostí po projednání se sponzorem a monitorem.

Pacienti budou informováni, že mohou ze studie kdykoli z jakýchkoli důvodů odstoupit. Zkoušející má také právo vyřadit pacienty ze studie, pokud je to v nejlepším zájmu pacienta. Důvod a datum vysazení budou jasně zdokumentovány ve formuláři kazuistiky u všech pacientů, kteří předčasně vysadili studijní přípravek.

Periodontální vyšetření hloubky periodontální sondy (PPD), úroveň klinického připojení (CAL), index krvácení při sondování (BOP), index plaku (PI) a pohyblivost zubů budou prováděny v období screeningu a plánovaných návštěvách studie. Na začátku a na konci studijní léčby byly pořízeny fotografie zubní dutiny.

Rentgenové snímky byly porovnány na začátku a na konci studie, aby se porovnala hladina kosti a zaznamenaly se další relevantní nálezy.

Na začátku každého dobrovolníka bude provedena dezinfekce plných úst (FMD) a aby bylo zajištěno, že byly odstraněny všechny usazeniny, bude provedena epizoda odhalení, po které bude odstraněn veškerý zbývající plak.

Vzorky slin (alespoň 3 ml) se odeberou do zkumavek Eppendorf a okamžitě zmrazí na -20 °C.

Aktivita arginindeiminázy bude hodnocena vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií fluorescenčně derivatizovaných aminokyselin, sledováním tvorby citrulinu z argininu.

Pro metabonomickou analýzu budou vzorky slin odebírány ráno do sterilní zkumavky obsahující fluorid sodný jako antimikrobiální činidlo. Pacienti se před odběrem musí zdržet jídla, pití, kouření a mytí zubů.

Vzorky budou uchovávány na ledu a budou skladovány při -80°C co nejdříve.

Vzorky plaků budou odebírány sterilní kyretou a dispergovány ve sterilizovaném fyziologickém roztoku a skladovány při -20 °C.

Mikrobiota bude analyzována na DNA extrahované ze vzorků pomocí soupravy Qiagen. Kmen L.brevis CD2 bude detekován pomocí TaqMan Real Time PCR s použitím specificky navržených primerů. Mikrobiální flóra potenciálně zapojená do parodontitidy bude identifikována a kvantifikována technikami molekulární biologie.

Vzorky dechu budou odebírány do 1 ml jednorázové injekční stříkačky (bez latexu) a okamžitě analyzovány pomocí přenosného plynového chromatografu (Oral Chroma, Abimedical corporation, Osaka, Japonsko).

Vzorky krve (20-25 ml) budou odebírány pouze 20 % populace na začátku studie a na konci období léčby (6 týdnů).