Dermální regenerační fotosyntetická matrice (HULK)

Bezpečnost dermální regenerační fotosyntetické matrice (DRPM) bude prováděna na: 1) Oddělení plastické chirurgie Hospital del Salvador, 2) Red UC Christus a/nebo 3) Instituto de Neurocirugía (INCA). Toto hodnocení bezpečnosti představuje první cíl této studie a bude provedeno u 20 lidských pacientů (ve věku 18-65 let) s neinfikovanými akutními ranami (potvrzenými negativní kvantitativní kultivací vzorku tkáně) a homogenním granulačním lůžkem. Všichni pacienti zapojení do této studie se budou účastnit pouze předchozího schválení informovaného souhlasu s protokolem studie, který již byl přijat Etickou komisí pro výzkum Metropolitní zdravotnické služby (číslo schválení: CECSSMO080820018) a každou z přidružených nemocnic.

Kritéria pro zařazení pacientů zahrnují kožní rány v plné tloušťce, homogenní granulační tkáň a negativní počet bakterií podle kvantitativní tkáňové kultury. Kritéria vyloučení budou založena na věku do 18 let nebo nad 65 let. Ze studie budou také vyloučeni pacienti s autoimunitními chorobami nebo imunosupresí. Z léčby budou vyloučeni i pacienti s psychiatrickými poruchami, které brání v rozhodování a pokračování v léčbě, a také pacienti s poraněním v obličeji.

Léčba bude probíhat ve dvou chirurgických zákrocích. V prvním z nich bude DRPM implantován a osvětlen polem LED. Jakmile je fotosyntetické lešení správně přilepeno ke spodině rány (přibližně 21 dní), bude proveden druhý chirurgický zákrok, kdy bude na horní část lešení proveden autologní částečný kožní štěp. V případě větší komplikace (nekontrolovatelná bolest, sepse, šok) nebo na žádost pacienta bude DRPM okamžitě odstraněn a pro daný typ rány provedena standardní léčba. U všech pacientů zařazených do studie bude hodnocena lokální a systémová imunitní odpověď proti DRPM.

Systémová odpověď bude studována pomocí hematologických, koagulačních a biochemických profilů a také pomocí kvantifikace plazmatických cytokinů a imunitních buněk v periferní krvi. Hematologické profily budou zahrnovat hematokrit, erytrocyty, hemoglobin, počet krevních destiček a leukocytů, provedené certifikovanými klinickými laboratorními metodami. Koagulační testy budou zahrnovat mezinárodní normalizovaný poměr (INR), protrombinový čas (PT) a parciální tromboplastinový čas (PTT). Biochemické profily budou zahrnovat kvantifikaci krevní glukózy, kreatininu, přímé a celkové hladiny bilirubinu, sérovou glutamát-oxalooctovou transaminázu (SGOT), sérovou glutamát-pyruvtransaminázu (SGPT), alkalickou fosfatázu a C-reaktivní protein, stejně jako klinicky relevantní enzymatické aktivity a plazmatické elektrolyty (sodík, draslík a chlorid). Koncentrace zánětlivých plazmatických cytokinů (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-12p70 a IL-10), jakož i následujících cirkulujících imunitních buněk: T-buňky (CD3+), T-helper budou kvantifikovány buňky (CD3+CD4+), cytotoxické T-buňky (CD3+CD8+) a jejich poměr (CD4+/CD8+), B-buňky (CD19+) a NK buňky (CD16+CD56+). Všechny parametry budou kvantifikovány před implantací DRPM (den 0), krátkodobě po implantaci (1-3 dny), 1 týden po implantaci a těsně před autoštěpem. Parametry budou také kvantifikovány krátkodobě po autoštěpu (1-3 dny), 1 týden po autoštěpu a 2 měsíce po autoštěpu.

Kromě toho, aby bylo možné studovat lokální odezvu na implantaci DRPM, bude získán bioptický úder před (den 0) a 1 týden po implantaci lešení, stejně jako před a 1 týden po autoštěpu, a regenerace rány bude hodnocena kvantifikací celularizace (jaderné barvení), přítomnost makrofágů (CD68) a mikroorganismů (Giemsa) a neovaskularizace (CD31).

Nakonec bude u všech pacientů dokončen závěrečný autoevaluační průzkum, kde budou hodnoceny parametry jako bolest, svědění, pálení, lehké obtěžování, zápach a celkový vzhled rány.