Srovnání krátkých a standardních zubních implantátů

ÚVOD

Zubní implantáty jsou obvykle považovány za alternativní možnost léčby k náhradě ztracených zubů u bezzubých pacientů. S rostoucí úspěšností osseointegrace a přežití se zvýšila četnost zavádění implantátů v oblastech, které je obtížnější rehabilitovat. Kromě umístění implantátu v místech s nedostatečnou šířkou a výškou hřebene se však doba léčby a náklady také zvýšily s použitím postupů štěpování.1 Byly vyvinuty různé chirurgické techniky, jako je vertikální augmentace kosti, elevace dna sinusu a transpozice nervů. pro léčbu těchto nedostatků kostního objemu. Tyto metody jsou však technicky citlivé a mohou způsobit značné pooperační komplikace. Krátké zubní implantáty byly navrženy jako jednodušší, levnější a rychlejší alternativa k prevenci nevýhod chirurgických technik a pro rehabilitaci bezzubých oblastí.2,3 Velký počet randomizovaných kontrolovaných klinických studií prokázal, že dlouhodobá úspěšnost a míra přežití u krátkých implantátů byla podobná jako u standardních dlouhých implantátů.4-6 Hromadění mikrobiálního zubního plaku kolem implantátu je nejdůležitější příčinou ztráty implantátu. Pokud se mikrobiální úpon neodstraní, může dojít k onemocněním, jako je periimplantátová mukozitida a periimplantitida, což může vést ke ztrátě implantátu v dlouhodobém horizontu. Periimplantátová mukozitida je reverzibilní zánětlivá reakce v měkké tkáni obklopující funkční implantát. Peri-implantitida je mikrobiální zánětlivé onemocnění charakterizované resorpcí podpůrné kosti obklopující implantát. Kolem míst implantátů postižených onemocněním převládají gramnegativní anaerobní bakterie. Připomínají sice chronické parodontální infekce, ale mají složitější mikrobiologický charakter.8 Převládající druhy kolem implantátu periimplantitidy jsou červený komplex (P. gingivalis, T. denticola a T. forsythia) a bakterie pomerančového komplexu (F. nucleatum a P. intermedia) popsané Socranskym.9 V roce 1989 Apse a kol. popsali tekutinu kolem periimplantátového sulku s vlastnostmi podobnými vlastnostem gingivální štěrbinové tekutiny a tuto tekutinu nazvali periimplantační křevikulární tekutina (PICF).10 PICF je zánětlivý exsudát tvořený osmotickým tlakem. Biochemické mediátory v PICF jsou velmi důležité pro určení zdraví tkání kolem implantátu.11 Prostaglandiny, zejména prostaglandin E2 (PGE2), jsou považovány za silný mediátor destrukce alveolární kosti u parodontitidy. Velký počet studií uvádí zvýšení hladin PGE2 ze zdravého stavu na parodontitidu.12 Tumor necrosis factor α (TNF-α) je prozánětlivý cytokin regulující gramnegativní bakteriální odpověď. Koncentrace TNF-α je indikátorem bakteriální zátěže a stupně zánětu.13 V oblastech, kde je periimplantitida aktivní, je přítomnost a aktivita osteoklastů nezbytná k destrukci kosti. Tvorba a aktivace osteoklastů jsou regulovány aktivací tří členů rodiny TNF: receptorový aktivátor ligandu jaderného faktoru kappa B (RANKL), aktivátor receptoru jaderného faktoru kappa B (RANK) a osteoprotegerin (OPG). K diferenciaci a aktivaci osteoklastů dochází při vazbě RANKL na RANK přes povrch osteoklastů a prekurzorů. OPG, což je rozpustný protein TNF receptorů, antagonizuje interakci RANK-RANKL a zvyšuje tvorbu kosti inhibicí osteoklastogeneze. Hladiny prozánětlivých cytokinů, jako je IL-1, IL-6, TNF-α a PGE2, a rychlosti RANKL/OPG, které umožňují stanovení osteoklastické aktivity, se v případě periimplantitidy mění.14 Cílem této studie bylo zhodnotit hladiny TNF-α, PGE2, RANKL, RANK a OPG v extra krátkých a standardních zubních implantátech fungujících v zadní dolní čelisti. Dalším cílem bylo prozkoumat hladiny domnělých orálních patogenů F. nucleatum, P. gingivalis, T. denticola, T. forsythia, P. intermedia a S. oralis ve vzorcích submukózního biofilmu ze studovaných míst.

MATERIÁLY A METODY Tato studie byla provedena s odvoláním na osoby, jejichž bilaterální částečné ztráty zubů byly léčeny fixními náhradami s implantáty a jejichž implantáty fungovaly alespoň 3 roky po protetické rehabilitaci. Studie byla provedena v souladu s etickými pokyny Helsinské deklarace Světové lékařské asociace (verze 2013) (Etická rada pro klinické výzkumy s 28. 09. 2016 a 2016/009 rozhodnutí číslo schválení).

Kritéria pro zařazení splnilo celkem 31 pacientů. Jeden pacient ve studii nepokračoval. Dále bylo zkoumáno 60 implantátů u 30 pacientů (16 žen a 14 mužů). Bilaterální oblasti pacientů se standardním implantátem a extra krátkým implantátem byly seskupeny do dvou.16 Kontrolní skupina: Standardní implantát, nitrokostní délka ≥8 mm (30 implantátů) Testovací skupina: Extra krátký implantát, nitrokostní délka ≤6 mm (30 implantátů)

Sběr klinických dat Jediný kalibrovaný vyšetřující provedl všechna (plnoústa a místně specifická) klinická měření (B.K.), včetně hloubky sondování (PD), úrovně klinického připojení (CAL), přítomnosti krvácení při sondování (BOP), 3- roční míra přežití (CSR) a ztráta kostní hmoty (BL).

Hodnoty PD a BOP byly měřeny ze čtyř míst každého implantátu (meziální, distální, bukální a lingvální) plastickou parodontální sondou Williamsova typu (Hue Friedy, Švýcarsko). PD byla zaznamenána jako vzdálenost od základny periimplantátu ke straně dásně v milimetrech. BOP byla hodnocena podle přítomnosti (+) nebo nepřítomnosti (-) krvácení během prvních 30 s po měření PD.17 Byly pořízeny kontrolní panoramatické filmy všech pacientů a byly vyhodnoceny rozdíly v úrovni marginální kosti mezi rentgenovými snímky po zavedení implantátu a o 3 roky později. Původní filmy a snímky pořízené později byly pořízeny se stejným úhlem pro standardizaci.

Odběr vzorků PICF a subgingiválního plaku Poté, co byly odstraněny plaky a měkké nástavce kolem implantátů, byly implantáty izolovány pomocí bavlněných smotků a vysušeny vzduchovým sprejem. PICF byl odebrán z meziobukální oblasti implantátu pomocí periopaperových proužků (Oraflow Inc, NY, USA). Papírové proužky byly umístěny 1-2 mm dovnitř periimplantátového sulku a ponechány po dobu 30 sekund. Papírové proužky byly umístěny do sterilních Eppendorfových zkumavek obsahujících 200 ul fosfátem pufrovaného fyziologického roztoku (PBS). Zkumavky byly udržovány při -80 °C až do dne analýzy. Papírové proužky kontaminované slinami nebo krví byly z odběru vyloučeny.

Po shromáždění PICF,. supragingivální plak byl opatrně odstraněn pomocí sterilního scaleru. Implantáty byly izolovány pomocí bavlněných smotků a vysušeny vzduchovým sprejem. Vzorky subgingiválního plaku byly odebrány z mezio-bukální oblasti implantátu pomocí sterilní plastické Gracey kyrety (Hu-Friedy, Švýcarsko) po dobu 30 sekund. Odebrané vzorky byly přeneseny do sterilních Eppendorfových zkumavek obsahujících 200 ul PBS. Zkumavky byly udržovány při -80 °C až do dne analýzy.

Analýza PICF Pro měření hladin TNF-a, PGE2, RANKL, RANK a OPG byly v souladu s doporučeními výrobce (Elabscience Biotechnology Co., Ltd, Wuhan, Čína) použity komerční soupravy pro imunoanalýzu s enzymem vázaným na imunosorbent. Rozsahy měření byly následující: TNF-a, 7,81-500 pg/ml; PGE2, 31.25-2000 pg/ml; RANKL, 0,16-10 pg/ml; RANK, 0,16-10 pg/ml; a OPG, 0,16-10 pg/ml. Optická hustota byla měřena při 450 nm a vzorky byly porovnány se standardy. Biochemická data byla měřena jako celkové množství (pg/30 s).

Příprava genomové DNA Pro purifikaci DNA v odebraných vzorcích plaků byla použita extrakční souprava v souladu s doporučeními výrobce (souprava pro extrakci bakteriální DNA GF-1, Vivantis, Malajsie). Standardy byly použity pro celkovou DNA v cílových bakteriích. Genomová DNA byla získána a skladována při 4 °C.

Polymerázová řetězová reakce v reálném čase Primární sondy byly určeny k definování každé bakterie a pozorování proliferačních křivek pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (PCR) (tabulka 1). Pro amplifikační reakci DNA byly postupy prováděny pomocí systému PCR v reálném čase (Roche Light Cycler 480 Instrument II, Švýcarsko) s použitím hlavní směsi (SYBR Green Master Mix; Life Technologies, CA, USA). Cykly PCR byly následující: 10 minut při 95 °C, 40 cyklů při 95 °C po dobu 30 s a 2 minuty při 60 °C. Obsah DNA byl vypočten pomocí standardních křivek.

Statistická analýza Statistické analýzy byly provedeny pomocí SPSS 19.0 (IBM Inc., IL, USA). Testy Kolmogorov-Smirnov a Shapiro-Wilk byly použity ke zkoumání, zda jsou proměnné normálně rozloženy. Při komentování výsledků byla použita hladina významnosti 0,05.

Při zkoumání rozdílů mezi skupinami byl použit t test nezávislých vzorků, když byly proměnné normálně rozděleny.

Neparametrický Mann-Whitney U test byl použit, když proměnné nebyly normálně rozděleny. Při zkoumání vztahů mezi skupinami nominálních proměnných byla použita chí-kvadrát analýza. Míra přežití (CSR) byla vypočtena podle počtu umístěných krátkých a standardních implantátů.