AOA při opakovaném selhání hnojení (AOA)

Tato studie je randomizovaná kontrolovaná studie zahrnující 150 pacientek s ICSI s anamnézou opakovaného selhání oplodnění. Pacienti podstoupili studie ICSI v jednotce ART, Al-Azhar University, Káhira, Egypt, od července 2017 do listopadu 2018. Studie byla schválena univerzitní lékařskou etickou komisí (pod registračním číslem 202010454) a všechny páry podepsaly písemný souhlas před zahájením studie a léčebných cyklů. Kandidátské páry AOA byly konzultovány ohledně postupu. Pacienti byli vybíráni podle následujících kritérií:

Kritéria pro zařazení: -

1. Věk mezi 20 a 40 lety.
2. Případy s anamnézou selhání totálního oplodnění v předchozích cyklech ICSI
3. Oocyty s normální morfologií.
4. Mužský faktor neplodnosti. Kritéria vyloučení: - Abnormální morfologie oocytů, degenerované nebo nezralé oocyty.

Náhodně byly vybrány dvě skupiny:

První skupina: Oocyty byly ošetřeny ionoforem vápníku. Tato skupina zahrnovala 75 cyklů ICSI.

Druhá skupina: Oocyty nebyly ošetřeny ionoforem vápníku. Tato skupina zahrnovala 75 cyklů ICSI.

Metody:

1. Stimulace vaječníků:

   Všechny ženy dostávaly léky stimulující vaječníky podle protokolů ART (protokoly dlouhého agonisty, vzplanutí nebo antagonisty). Deca 0,1 byla podávána s.c. denně, pro down-regulaci v krátkém a dlouhém protokolu, zatímco cetrotide 0,25 byl podáván s.c. denně pro down-regulaci v antagonistickém protokolu. Vývoj folikulů byl sledován ultrazvukovým skenováním a sérovým estradiolem. Pacienti dostávali 10 000 IU lidského chronického gonadotropinu (HCG), když většina folikulů měřila více než 17-20 mm v průměru.

2. Příprava spermatu:

   • Manžel byl požádán, aby po 2 až 3 dnech abstinence a asi 2 hodiny před výkonem ICSI předložil vzorek spermatu ve sterilní plastové nádobě. Nádobka na vzorky musí být čistá, sterilní a se širokým hrdlem, aby se minimalizovala chyba při odběru.

3. Odběr oocytů:

   • V celkové anestezii byly oocyty odsáty specializovanou, ultrazvukem naváděnou jehlou (aspirační katetr Labotect, Německo) 34-36 hodin po injekci HCG. Zahřáté HEPES pufrované médium (Irvine Scientific, Irvine, CA, USA) bylo použito pro manipulaci a promývání oocytů.
   • Po ICSI byly celé injikované oocyty promyty Global total Fertilization Medium (Global pharm, Life Global, Brusel, Belgie, Evropa) a pacientky byly náhodně rozděleny do dvou stejných skupin (každá po 75 pacientkách) pomocí počítačově založeného randomizačního programu. Skupina jedna, ve které byly injikované oocyty přeneseny do média, které obsahuje 10 µmol vápníkového ionoforu (GM508 Cult-Active, Gynemed, Německo) a byly inkubovány po dobu 10 minut, poté byly oocyty znovu promyty Global total Fertilization Medium (Global pharm , Life Global, Brusel, Belgie, Evropa) a byly inkubovány při 37 °C v 6% CO2. Ve skupině dvě nebyly injikované oocyty podrobeny aktivaci ionoforem vápníku.
   • 18 hodin po injekci byly celé injikované oocyty v obou skupinách hodnoceny na oplodnění, štěpení a kvalitu v den embryotransferu (ET).

Přenos embryí

• Po ET byla provedena podpora luteální fáze (intramuskulárně injekce progesteronu 100 mg denně) po dobu 14 dnů do těhotenského testu.

Po sběru dat byly obě skupiny porovnány z hlediska počtu oocytů, míry oplodnění oocytů, počtu a kvality embryí, míry implantace a míry klinického těhotenství.