Denne side blev automatisk oversat, og nøjagtigheden af ​​oversættelsen er ikke garanteret. Der henvises til engelsk version for en kildetekst.

Identifikation af værtsfaktorer for Norovirus-infektioner i Mini-Gut Model

19. september 2018 opdateret af: CHAN CHI WAI, Chinese University of Hong Kong

Genomomfattende CRISPR-skærm for værtsfaktorer associeret med Norovirus-infektioner i stamcelle-afledt human intestinal enteroidmodel

Det primære formål med denne undersøgelse er at etablere en liste over værtscellulære proteiner, der medierer norovirusinfektion.

Norovirus er en af ​​de mest almindelige patogener, der tilskrives diarrésygdomme fra usikker mad. Det er også den primære årsag til dødelighed blandt små børn og voksne i fødevarebårne infektioner. Norovirus er ikke kun en fødevarebåren byrde. I en nylig meta-analyse tegner norovirus sig for næsten en femtedel af alle årsager til (inklusive person-til-person transmission) akut gastroenteritis i både sporadiske og udbrudssammenhænge og påvirker alle aldersgrupper. Norovirus er uden tvivl af største betydning for folkesundheden i både udviklede lande og udviklingslande. Forskningsindsats for bedre at forstå norovirus patobiologi vil være nødvendig for målrettet intervention.

Fra Mellemøstens respiratoriske syndrom coronavirus til Zika-virus har bestræbelser på at identificere værtsfaktorer, der er vigtige for at mediere virusinfektion, altid været en forskningsprioritet. Sådan information vil kaste lys over potentielle terapeutiske mål i antiviral intervention. Norovirus-virus-vært-interaktionsundersøgelser er blevet hæmmet af manglen på en robust cellekulturmodel i de sidste 20 år. I 2016 er norovirus endelig blevet dyrket med succes i en stamcelle-afledt tredimensionel human tarm-lignende struktur kaldet enteroid eller mini-gut.

I denne undersøgelse vil intestinale stamceller blive isoleret fra duodenale biopsier indsamlet fra deltagere, efterfulgt af differentiering til mini-tarm. Genom-dækkende genetisk screening for værtens essentielle og restriktive faktorer vil blive udført på inficerede mini-tarme ved henholdsvis knockout CRISPR og gain-of-function CRISPR SAM. Shortlistede kandidater vil gennemgå en foreløbig funktionel validering i cellelinjer. Disse data vil give indsigt i potentielle terapeutiske mål mod norovirusinfektion.

Studieoversigt

Status

Ukendt

Betingelser

Intervention / Behandling

Detaljeret beskrivelse

Undersøgelsesdesign og oversigt - Dette er en laboratoriebaseret undersøgelse. Efterforskerne planlægger at etablere en liste over værtscellulære proteiner, der regulerer norovirusinfektion. Metoder vil omfatte etablering af patientspecifikke stamcelle-afledte humane intestinale enteroider som en infektionsmodel og genom-dækkende CRISPR og CRISPR SAM genetiske screeninger efter infektioner af to norovirus genotyper.

***Etablering af human intestinal enteroidmodel***

  1. Duodenale biopsier og spytindsamling - Efter indhentning af IRB-godkendt informeret samtykke, vil der blive indhentet to duodenale biopsiprøver fra hver deltager, der gennemgår øvre gastrointestinal endoskopi uden kontraindikationer for biopsiprøvetagning, såsom deltagere på anti-koagulation eller med andre årsager til blødningsdiatese. Biopsiprøver nedsænkes i iskold 1xPBS og transporteres straks til laboratoriet inden for 30 minutter for yderligere behandling. Derudover vil spyt (1-2 ml) blive opsamlet fra hver deltager til test af sekretorstatus ved ELISA.
  2. Isolering af kryptstamceller og differentiering - Ved ankomsten vil biopsiprøver først blive skåret i mindre stykker. Intestinale kryptceller vil blive isoleret ved gentagen vask og inkubation med 1x komplet chelateringsopløsning (1xCCS) og EDTA-buffer. Supernatant indeholdende kryptceller vil derefter blive dyrket i Matrigel indeholdende komplet medium med vækstfaktorer (CMGF+) (Wnt 3 og Rspo-1 konditionerede medier, Noggin, A83, B27, EGF, N2, n-acetylcystein, gastrin, nikotinamid og SB202190) . Spirende krypter vil derefter blive inkuberet i differentieringsmedium (CMGF+, ekskl. Wnt 3-konditioneret medium, SB202190 og nikotinamid samt reduceret mængde af Rspo-1-konditioneret medium og Noggin). Dannelse af tredimensionelle tarmlignende enteroider vil blive overvåget dagligt.

Undersøgelsestype

Interventionel

Tilmelding (Forventet)

20

Fase

  • Ikke anvendelig

Kontakter og lokationer

Dette afsnit indeholder kontaktoplysninger for dem, der udfører undersøgelsen, og oplysninger om, hvor denne undersøgelse udføres.

Studiesteder

  • Kina
      • Hong Kong, Kina
        • Rekruttering
        • Endoscopy Centre, Prince of Wales Hospital
        • Kontakt:
        • Ledende efterforsker:
          • Chi-Wai Chan, PhD
        • Underforsker:
          • Kay-Sheung Chan, MD
        • Underforsker:
          • Hei Wong, MBChB; DPhil

Deltagelseskriterier

Forskere leder efter personer, der passer til en bestemt beskrivelse, kaldet berettigelseskriterier. Nogle eksempler på disse kriterier er en persons generelle helbredstilstand eller tidligere behandlinger.

Berettigelseskriterier

Aldre berettiget til at studere

18 år og ældre (VOKSEN, OLDER_ADULT)

Tager imod sunde frivillige

Ja

Køn, der er berettiget til at studere

Alle

Beskrivelse

Inklusionskriterier:

  • Voksne i alderen 18 år eller derover
  • Potentielle ambulante patienter, der gennemgår gastrointestinal endoskopi for symptomer på dyspepsi i endoskopienheden på Prince of Wales Hospital, Shatin, Hong Kong, Kina
  • Kan og er villig til at give informeret skriftligt samtykke

Ekskluderingskriterier:

  • Brug af antikoagulantia og/eller aspirin, der kan have øget risiko for blødning
  • Anamnese med blødende diatese
  • Kontraindikationer for biopsiprøvetagning

Studieplan

Dette afsnit indeholder detaljer om studieplanen, herunder hvordan undersøgelsen er designet, og hvad undersøgelsen måler.

Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?

Design detaljer

  • Primært formål: BASIC_SCIENCE
  • Tildeling: NA
  • Interventionel model: SINGLE_GROUP
  • Maskning: INGEN

Våben og indgreb

Deltagergruppe / Arm
Intervention / Behandling
Eksperimentel: Intestinale stamcelle-afledte enteroider
Duodenale biopsiprøver og spyt vil blive indsamlet fra deltagerne og derefter behandlet i laboratoriet for at generere tarmstamcelle-afledte enteroider.
Procedure: Duodenal biopsi
To duodenale biopsiprøver vil blive indsamlet fra hver deltager
Procedure: Spyt
Spyt (1-2 ml) vil blive indsamlet fra hver deltager til test af sekretorstatus

Hvad måler undersøgelsen?

Primære resultatmål

Resultatmål
Foranstaltningsbeskrivelse
Tidsramme
Etablering af humane intestinale stamceller-afledte enteroider
Tidsramme: I gennemsnit tre måneder
Levedygtighed af enteroider som bestemt ved mikroskopi
I gennemsnit tre måneder

Samarbejdspartnere og efterforskere

Det er her, du vil finde personer og organisationer, der er involveret i denne undersøgelse.

Sponsor

Chinese University of Hong Kong

Efterforskere

  • Ledende efterforsker: Chi-Wai Chan, PhD, Chinese University of Hong Kong

Datoer for undersøgelser

Disse datoer sporer fremskridtene for indsendelser af undersøgelsesrekord og resumeresultater til ClinicalTrials.gov. Studieregistreringer og rapporterede resultater gennemgås af National Library of Medicine (NLM) for at sikre, at de opfylder specifikke kvalitetskontrolstandarder, før de offentliggøres på den offentlige hjemmeside.

Studer store datoer

Studiestart (Faktiske)

18. april 2018

Primær færdiggørelse (Forventet)

31. december 2020

Studieafslutning (Forventet)

31. december 2020

Datoer for studieregistrering

Først indsendt

9. november 2017

Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier

13. november 2017

Først opslået (Faktiske)

17. november 2017

Opdateringer af undersøgelsesjournaler

Sidste opdatering sendt (Faktiske)

20. september 2018

Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier

19. september 2018

Sidst verificeret

1. september 2018

Mere information

Begreber relateret til denne undersøgelse

Nøgleord

Yderligere relevante MeSH-vilkår

Andre undersøgelses-id-numre

  • MIC_CHAN_GRF_17_18_v1_20160930

Plan for individuelle deltagerdata (IPD)

Planlægger du at dele individuelle deltagerdata (IPD)?

UBESLUTET

Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter

Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt

Ingen

Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt

Ingen

Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .

Kliniske forsøg med Gastrointestinal infektion

Kliniske forsøg med Duodenal biopsi

Søg i lignende forsøg

Sponsorer og samarbejdspartnere

Medicinske tilstande

Narkotikainterventioner

CROs by country

CROs in Nigeria

Betingelser

Sjældne sygdomme

Narkotikainterventioner

Kosttilskud

Sponsor / samarbejdspartnere

Placeringer

Abonner