Nachweis des Hepatitis-C-Virus beim oralen Plattenepithelkarzinom

Patient/Population: In Paraffin eingebettete Gewebeproben von OSCC. Indikator: OSCC-Patienten Kontrolle: Normale Patienten Formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Proben aus Blöcken aus den Archiven der Abteilung für Mund-, Kiefer- und Gesichtspathologie, Fakultät für Zahnmedizin, Kasr Alini-Krankenhaus von Januar 2014 bis Februar 2018. Alle klinischen und histopathologischen Daten aus medizinischen Berichten werden überprüft und Daten zu Alter, Geschlecht, Tumorlokalisation, Raucher- und Alkoholkonsum in der Vorgeschichte, Knotenstatus, Tumorrezidiven und histologischer Klassifizierung der Patienten gesammelt. Die Proben werden aus 2 Gruppen entnommen:-

1. OSCC-Exemplare. Die histologische Diagnose von H&E-gefärbten Schnitten wird gemäß den Richtlinien der Weltgesundheitsorganisation (WHO) von zwei unabhängigen Pathologen durchgeführt.
2. Normale Mundschleimhautproben (Kontrolle).

Ergebnis: I) Immunhistochemischer Nachweis des Hepatitis-C-Kernantigens (Hep-C-cAg): sc-58144, Santa Cruz Biotechnology, USA. Ein gegen das Hepatitis-C-Virus gezüchteter monoklonaler Maus-Antikörper wird gekauft und für die immunhistochemische Färbung verwendet. Färbeverfahren mit einem automatisierten System Ventana Benchmark. Die vier µm dicken, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitte werden in drei Wechseln Xylol entparaffiniert und anschließend zur Antigengewinnung in der Mikrowelle behandelt. Die Objektträger werden über Nacht in der Feuchtigkeitskammer bei Raumtemperatur mit primärem Antikörper inkubiert. Anschließend werden die Objektträger mit sekundärem Antikörper inkubiert. Die Peroxidaseaktivität wird mit Diaminobenzidin sichtbar gemacht. Abschließend erfolgt eine Gegenfärbung mit Hämatoxylin nach Mayer.

Die immungefärbten Schnitte werden mit einem Analyse-Computersystem (Deutschland) untersucht.