Un estudio para evaluar los efectos de los factores genéticos en la farmacocinética de los medicamentos antirretrovirales durante el embarazo y la lactancia

Diseño del estudio: Este es un estudio observacional que se llevará a cabo en dos fases. En la fase preliminar, se explorarán las asociaciones entre los SNP seleccionados en los genes de disposición del fármaco y las concentraciones de nevirapina y efavirenz en plasma y leche materna a dosis media en una cohorte no seleccionada de mujeres embarazadas y madres lactantes con VIH positivo y sus hijos lactantes que toman cualquiera de los fármacos como parte del tratamiento. tratamiento antirretroviral combinado para la PTMI. En la segunda fase, se utilizará el SNP asociado de forma independiente con el mayor poder predictivo para estratificar a las mujeres embarazadas y a los pares madre-hijo en tres grupos: no portadoras, heterocigotas y homocigotas. Mujeres embarazadas seleccionadas al azar o parejas de madre e hijo de cada grupo fueron reclutadas nuevamente e invitadas a la fase farmacocinética intensiva.

Recolección de muestras: en la fase preliminar, se recolectarán muestras de gotas de sangre seca (DBS) pareadas de dosis media (y manchas de leche materna seca en madres lactantes) en un único punto de tiempo registrado después de la dosis. En la fase farmacocinética intensiva, las muestras de DBS (y manchas secas de leche materna en madres lactantes) se recolectarán en múltiples momentos después de una dosis observada de efavirenz o nevirapina. Las muestras se enviarán a temperatura ambiente al Departamento de Farmacología Clínica y Molecular de la Universidad de Liverpool, Reino Unido, para su análisis.

Extracción de ADN y genotipado de SNP: el ADN genómico se extraerá utilizando kits comerciales disponibles de acuerdo con el protocolo del fabricante y el genotipado se realizará mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real de discriminación alélica utilizando ensayos basados ​​en química TaqMan®.

Cuantificación de fármacos y análisis farmacocinético: se desarrollarán métodos de cromatografía líquida-espectrometría de masas para la cuantificación de efavirenz y nevirapina en DBS y manchas de leche materna seca. Los parámetros farmacocinéticos se determinarán utilizando procedimientos estándar.