Simvastatiinin ja simvastatiinin/esetimibin vertailu pieneen tiheään matalatiheyksiseen lipoproteiiniin (LDL)

Hyperkolesterolemia on ateroskleroosin ja sepelvaltimotaudin (CHD) tärkeä riskitekijä.[1] Epidemiologiset ja kliiniset tutkimukset ovat osoittaneet, että matalatiheyksisten lipoproteiinikolesterolin (LDL-C) aggressiivinen alentaminen vähentää sairastuvuutta ja kuolleisuutta potilailla, joilla on sepelvaltimotauti tai ei ole sitä.[1-3] LDL koostuu koon, tiheyden ja kemiallisen koostumuksen suhteen heterogeenisestä hiukkaspopulaatiosta. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että pienet, tiheät LDL- (sdLDL) -hiukkaset ovat aterogeenisempiä kuin suuret, kelluvat[4, 5] ja siten liittyvät lisääntyneeseen sepelvaltimotaudin[6] tai aivohalvauksen riskiin[7]. Statiinit, lipidejä alentavan hoidon tukipilari, vähentävät merkittävästi LDL-kolesterolitasoja ja niiden ehdotetaan alentavan kaikkia LDL-alafraktioita, mahdollisesti johtuen statiinien aiheuttamasta LDL-reseptorivälitteisen katabolian stimulaatiosta.[8] Lisäksi useat tutkimukset ovat osoittaneet, että poikkeavuuksia LDL-alafraktioprofiilissa voidaan korjata statiineilla.[9] Etsetimibimonoterapian on myös havaittu vähentävän merkittävästi kaikkien LDL-alafraktioiden pitoisuuksia.[10] Etsetimibin yhdistelmä pienen statiiniannoksen kanssa johtaa samanlaiseen LDL-kolesterolitason laskuun verrattuna saman statiinin suureen annokseen. Äskettäinen tutkimus osoitti, että etsetimibi/simvastatiini-yhdistelmä oli tehokkaampi kuin etsetimibi ja simvastatiinin monoterapia aterogeenisten lipoproteiinien alafraktioiden vähentämisessä potilailla, joilla oli primaarinen hyperkolesterolemia.[11] Tässä tutkimuksessa etsetimibi/simvastatiini-yhdistelmä alensi kuitenkin tehokkaammin LDL-kolesterolitasoja kuin kummallakaan monoterapialla.[11] Eräässä toisessa tutkimuksessa etsetimibin lisääminen potilaille, jotka jo saivat atorvastatiinia, alensi LDL-kolesteroliarvoja yksinomaan vähentämällä suurten, elävien LDL-alafraktioiden pitoisuuksia.[12] Toistaiseksi ei ole tiedossa, alentaisiko suuri statiiniannos sdLDL-kolesterolitasoa enemmän kuin pieniannoksinen statiini ja etsetimibihoito samassa LDL-kolesterolitason laskussa.

Sekä simvastatiini 40 mg että simvastatiini/etsetimibi 10/10 mg johtavat suunnilleen samansuuruiseen LDL-kolesterolitason laskuun.[13,14] Näiden kahden hoitovaihtoehdon erilaisia ​​vaikutuksia sdLDL-kolesterolipitoisuuteen ei kuitenkaan ole arvioitu.

Tutkimussuunnittelu Satunnaistettu, avoin tutkimus.

Tutkimuksen tarkoitus Tämän tutkimuksen tavoitteena on verrata simvastatiinin 40 mg ja simvastatiini/etsetimibi 10/10 mg vaikutuksia sdLDL-kolesterolipitoisuuteen.

Materiaalit ja menetelmät Tutkimuspopulaatio Peräkkäiset primaarista hyperkolesterolemiaa sairastavat potilaat (n=100), jotka käyvät Ioanninan yliopistollisen sairaalan avohoito- ja liikalihavuusklinikalla, Ioannina, Kreikka, osallistuvat tähän tutkimukseen.

Kaikki koehenkilöt saavat kliiniseltä ravitsemusterapeutilta kansallisen kolesterolikasvatusohjelman aikuisten hoitopaneelin III (NCEP-ATP III) mukaiset ruokavalio-ohjeet. Jos LDL-kolesteroli on edelleen suositeltua tasoa korkeampi 3 kuukauden asianmukaisten elämäntapamuutosten jälkeen, potilaat jaetaan satunnaisesti avoimeen simvastatiiniin 40 mg (n=50) tai simvastatiini/etsetimibiin 10/10 mg (n=50) päivässä.

Ilmoittautuminen suoritetaan 1 vuoden sisällä. Seurantakäynti ajoitetaan 3 kuukauden kuluttua hoidon aloittamisesta.

Ioanninan yliopistollisen sairaalan eettinen komitea hyväksyy tutkimusprotokollan, ja kaikkia osallistujia pyydetään antamaan kirjallinen tietoinen suostumuksensa.

Laboratoriomittaukset

Verianalyysit tehdään yön yli paaston (12 tuntia) jälkeen, ja ne sisältävät:

• Glukoosi, insuliini, kreatiniini, virtsahappo, aspartaattiaminotransferaasi (AST), alaniiniaminotransferaasi (ALT), gammaglutamyylitranspeptidaasi (γ-GT), alkalinen fosfataasi (ALP)
• Kokonaiskolesteroli (TC), korkean tiheyden lipoproteiinikolesteroli (HDL-C) ja triglyseriditasot, kun taas LDL-C-tasot arvioidaan Friedewaldin yhtälön avulla (LDL-C = TC-HDL-C-triglyseridit/5)
• korkean herkkyyden C-reaktioproteiinin (hs-CRP) tasot
• Apolipoproteiinit A-I, A-II, A-V, B, E, C-II, C-III, lipoproteiini (a) [Lp(a)]
• Lipoproteiiniin liittyvä fosfolipaasi A2 (Lp-PLA2) -aktiivisuus plasmassa

Menetelmät LDL-alaluokka-analyysi Elektroforeesi suoritetaan käyttämällä korkearesoluutioista 3 % polyakryyliamidiputkigeeliä ja Lipoprint LDL System -järjestelmää (Quantimetrix, Redondo Beach, CA) valmistajan ohjeiden mukaisesti.[16, 17, 18] Lyhyesti sanottuna 25 µl näytettä sekoitetaan 200 µl:aan Lipoprint Loading Gel -geeliä ja asetetaan 3 % polyakryyliamidigeelin yläosaan. 30 minuutin fotopolymeroinnin jälkeen huoneenlämpötilassa suoritetaan elektroforeesi 60 minuutin ajan 3 mA:lla kullekin geeliputkelle. Jokainen elektroforeesikammio sisältää 2 laadunvalvontaa (valmistajan toimittama näyte). Kvantifiointia varten skannaus suoritetaan ScanMaker 8700 -digitaaliskannerilla (Mikrotek Co, USA) ja iMac-tietokoneella (Apple Computer Inc, USA). Skannauksen jälkeen elektroforeettinen liikkuvuus (Rf) ja käyrän alla oleva pinta-ala (AUC) lasketaan kvalitatiivisesti ja kvantitatiivisesti Lipoprint LDL -järjestelmämallilla ja Lipoware-ohjelmistolla (Quantimetrix Co, Redondo Beach, CA). LDL-alafraktio lasketaan käyttämällä Rf-arvoa erittäin matalatiheyksisen lipoproteiinifraktion (VLDL) (Rf 0,0) ja HDL-fraktion (Rf 1,0) välillä. LDL jakautuu Rf 0,32 - Rf 0,64 7 vyöhykkeenä, joiden Rfs ovat 0,32, 0,38, 0,45, 0,51, 0,56, 0,6 ja 0,64 (vastaavasti LDL1 - LDL7). LDL1 ja LDL2 määritellään suureksi, kelluvaksi LDL:ksi ja LDL3-LDL7 määritellään sd-LDL:ksi. Kunkin LDL-alafraktion kolesterolipitoisuus (mg/dl) määritetään kertomalla kunkin alafraktion suhteellinen AUC näytteen TC-pitoisuudella (näytteen TC-pitoisuus mitataan itsenäisesti). Sd-LDL-kolesterolin osuus (sd-LDL%) määritellään sd-LDL:n sisältämän LDL-kolesterolin prosenttiosuutena (ts. kaistat 3-7). LDL-piikin hiukkashalkaisija (LDL-PPD) (nm) määritetään käyttämällä LDL-vyöhykkeiden korkeimman piikin Rf-arvoa seuraavan ehdotetun yhtälön mukaisesti: LDL-PPD = (1,429-Rf)*25. Lisäksi Lipoprint LDL System tarjoaa keskimääräisen LDL-partikkelikoon (nm) ja käyttää 26,8 nm:n kokoa raja-arvona yksilöiden luokittelemiseksi fenotyyppeihin A (sd-LDL-hiukkasten puuttuminen) ja non-A (sd:n läsnäolo). -LDL-hiukkaset).

Plasman Lp-PLA2-aktiivisuuden mittaus Lp-PLA2-aktiivisuuden mittaus kokonaisplasmassa, plasmassa, josta on poistettu apo B, sen jälkeen, kun kaikki apo B:tä sisältävät lipoproteiinit on sedimentoitu dekstraanisulfaatti-magnesiumkloridilla (HDL-Lp-PLA2-aktiivisuus) sekä lipoproteiinien alafraktiot määritetään trikloorietikkahapposaostusmenetelmällä käyttämällä [3H]-verihiutaleaktivoivaa tekijää (PAF) (lopullinen pitoisuus 100 μM) substraattina.[16] Reaktio suoritetaan 10 minuutin ajan 37 °C:ssa ja Lp-PLA2-aktiivisuus ilmaistaan ​​nmol:na hajotettua PAF:a min per ml plasmaa tai mg LDL-alafraktioproteiinia. Ei-HDL-Lp-PLA2-aktiivisuus lasketaan vähentämällä HDL-Lp-PLA2-aktiivisuus plasman kokonaisentsyymiaktiivisuudesta. Lp-PLA2-spesifinen aktiivisuus ilmaistaan ​​entsyymiaktiivisuuden suhteessa entsyymimassaan (nmol/ng/min).

Seerumin apolipoproteiinien mittaus Seerumin apolipoproteiinit A-I, A-II, AV, B, E, C-II, C-III ja Lp(a) mitataan immunonefelometrialla Behring Nephelometer BN ProSpec -laitteella (Dade-Behring, Lieberbach, Saksa).

Plasman hs-CRP-tasojen määrittäminen Plasman CRP-pitoisuudet mitataan erittäin herkällä immunonefelometrisella määrityksellä (Beckman Instruments, Fullerton, CA). Tämän määrityksen vertailualue on 1,0 - 80 mg/l. Havaitsemisraja on 1,0 mg/l.

Rutiinilaboratoriomääritykset Rutiinilaboratoriomääritykset tehdään automaattisella kemiallisella analyysillä Ioanninan yliopistollisen sairaalan laboratoriossa Olympus AU 600 -analysaattorilla (Olympus Diagnostica GmbH, Hampuri, Saksa). Glukoosi mitataan heksokinaasimenetelmällä ja seerumin insuliinitasot AxSYM Insulin -määrityksellä, joka perustuu Micropartticle Enzyme Immunoassay -tekniikkaan (Abbott Laboratories, Diagnostic Division, Abbott Park, IL, USA).

Tilastollinen analyysi Kaikki parametrit tarkistetaan normaalin suhteen Kolmogorov-Smirnov-testillä ja ei-normaalijakautuneet muuttujat logaritmi-muunnetaan. Tutkimusmuuttujien välisten suhteiden arvioimiseen käytetään lineaarista regressioanalyysiä, kun taas monimuuttujaanalyysiä käytetään tutkimusparametrien muutoksen riippumattomien ennustajien määrittämiseen. Parinäytteiden t-testiä käytetään hoidon vaikutuksen arvioimiseen kussakin ryhmässä. Kovarianssianalyysiä (ANOVA), joka on säädetty perusarvoihin, käytetään vertailuja hoitoryhmien välillä. Merkitsevyys määritellään p<0,05:ksi ja Bonferroni-korjausta käytetään useiden vertailujen tapauksessa. Kaikki analyysit suoritetaan SPSS 13.0:lla (SPSS Inc., 1989-2004, Chicago, IL). Arvioitiin, että 90:n näytekoko antaisi 94 %:n tehon havaita 15 %:n ero sdLDL-C-konsentraation vähenemisessä kahden ryhmän välillä 2-puoleisella alfalla 0,05. Mukaan otetaan 100 potilasta, mikä mahdollistaa ~10 %:n keskeytysasteen.