Nem reszekálható hepatocelluláris rák kezelése opioid növekedési faktorral

A VIZSGÁLAT CÉLKITŰZÉSEI A hepatocelluláris rák (HCC) az egyik legelterjedtebb rák a világon. 2007-ben körülbelül 19 160 új eset várható az Egyesült Államokban. A krónikus májkárosodás és cirrhosis bármely formája hajlamosít ennek a rosszindulatú daganatnak a kialakulására. Világszerte a leggyakoribb kockázati tényező a vírusos hepatitis; az Egyesült Államokban a krónikus májkárosodás egyéb forrásai, például az alkoholfogyasztással összefüggő cirrhosis fontosak, de a vírusos hepatitis előfordulása továbbra is növekszik. Az etiológiától függetlenül a HCC egyetlen ismert gyógymódja a műtéti reszekció. Sajnos a kapcsolódó májbetegség és a daganat progressziójának stádiuma miatt a diagnózis idején nagyon kevés beteg jelölt sebészeti kezelésre. A kemoterápia nagyon csekély hatékonyságot mutatott ebben a betegségben, és a sugárkezelés csekély értékű a kapcsolódó májtoxicitás miatt. Nagy szükség van új terápiákra.

Az emberi rák növekedésében szerepet játszó mechanizmusokat vizsgáló kutatások kimutatták, hogy a [Met5]-enkefalin peptid, az opioid növekedési faktor (OGF), gátolja számos rákvonal növekedését in vitro. A hasnyálmirigyrákban ezt a jelenséget nem csak in vitro, hanem in vivo is jól definiálták, miután humán daganatokat csupasz egerekbe vittek át. Ennek a peptidnek a növekedésre gyakorolt ​​elnyomó hatása egy receptor által közvetített mechanizmuson keresztül valósul meg. Ezen eredmények alapján egy I. fázisú vizsgálatot végeztek az OGF hatásainak tanulmányozására hasnyálmirigyrákos betegeknél. Feltételezzük, hogy az OGF beadása gátolja a karcinogén események lefolyását nem reszekálható hepatocelluláris rákban és cirrhosisban szenvedő emberekben. Ennek a hipotézisnek a tesztelésére egy I. fázisú vizsgálatot javasolunk e terápia toxicitásának tanulmányozására májbetegségben és cirrhosisban szenvedő betegeknél, a következő konkrét célokkal:

1. specifikus cél: Az OGF maximálisan tolerálható dózisának (MTD) meghatározása intravénás infúzió után HCC-ben szenvedő betegeknél. Míg az MTD-t hasnyálmirigyrákban szenvedő betegekre határozták meg, nem világos, hogy ezek az eredmények igazak lesznek-e azokra a HCC-s betegekre, akik májelégtelenségben és cirrhosisban szenvednek. Emiatt dózismegállapító vizsgálatot fogunk végezni, amely az OGF dózis-eszkalációját tartalmazza. A dóziskorlátozó toxicitást a májfunkció, a pupillaméret és válaszreakció, a légzés, az életjelek (ortosztatikus vérnyomás és pulzus), a gyomor-bélrendszeri szorongás, a bőr kipirulása, valamint a vérképre, a glükózra és az elektrolitokra gyakorolt ​​hatások monitorozásával határozzák meg.

2. specifikus cél: Az OGF farmakokinetikájának és metabolizmusának tanulmányozása HCC-ben és cirrhosisban szenvedő betegeknél a plazma OGF-szintjének monitorozásával. Vérmintákat vesznek az OGF MTD infúziója előtt és meghatározott időközönként rákos betegekben. Az OGF plazmaszintjét radioimmunoassay segítségével elemzik.

Kutatócsoportunk hosszú távú célja, hogy megértse a peptid növekedési faktorok hatását HCC-ben és cirrhosisban szenvedő betegeknél. Ez az I. fázisú vizsgálat hasznos lesz az OGF megfelelő dózisának és várható toxicitásának meghatározásában ezeknél a betegeknél. Vizsgálatunk egy természetben előforduló opioid peptidet alkalmaz, amelyről preklinikai vizsgálatokban kimutatták, hogy gátolja a hasnyálmirigyrák növekedését, és biztonságosan adható hasnyálmirigyrákos betegeknek.

HÁTTÉR ÉS JELENTŐSÉG A hepatocelluláris karcinóma (HCC) az ötödik leggyakoribb rosszindulatú daganat a világon; Évente ötszázezer ember hal bele ebbe a rosszindulatú daganatba. Az incidencia és a halálozási arány közel azonos, ami azt mutatja, hogy nagyon kevés beteg gyógyul meg. A krónikus májkárosodás és cirrhosis bármely formája hajlamosít ennek a rosszindulatú daganatnak a kialakulására. A HCC fő kockázati tényezői a krónikus hepatitis B vírus fertőzés, a krónikus hepatitis C vírus (HCV) fertőzés és az alkoholos cirrhosis.

A HCC egyetlen ismert gyógymódja a műtéti reszekció. A beteg májzsugorodási foka és a daganat anatómiai elhelyezkedése határozza meg, hogy elvégezhető-e a részleges hepatectomia. Még a nagy volumenű, az eljárásra szakosodott központokban is kimutatták, hogy a műtéti mortalitás 1%-ról 14%-ra nő cirrhosis jelenlétében (1). Emiatt a reszekciót általában a Child A májfunkciójú betegek számára tartják fenn. A többszörös elváltozás nem zárja ki a reszekciót. Az obstruktív sárgaságot okozó intraduktális daganatok sikeresen eltávolíthatók. Ebben a helyzetben fontos megkülönböztetni az obstrukciót a mögöttes májbetegségtől, amely a beteg sárgaságának oka.

A teljes hepatektómia, majd az ortotróp májátültetés ésszerű stratégia a cirrhosisban és rákos betegek kezelésében, és ezzel a megközelítéssel egyre növekszik a tapasztalat. Ahogy az várható volt, a legjobb eredményeket azoknál a betegeknél érték el, akiknél a májelégtelenség miatt végzett transzplantáció során véletlenül kis HCC-t fedeztek fel. A transzplantációval kezelt 5 cm-nél kisebb elváltozások prognózisa szignifikánsan jobb, és mivel a szervek szűkösek, a HCC transzplantációja általában erre a beállításra korlátozódik. Mazzaferro és munkatársai a májtranszplantációról számoltak be, mint a kisméretű, nem reszekálható HCC hatékony kezeléséről cirrhosisban szenvedő betegeknél, 4 éves kiújulásmentes túlélés mellett 83%.

Sajnos a betegek 90%-a nem alkalmas gyógyító szándékú reszekcióra vagy transzplantációra (2-6), és ezeknél a betegeknél nagyon kevés a bizonyított hatékonyságú terápiás lehetőség. Ebben a helyzetben a prognózis rendkívül rossz, a túlélési átlag 3 hónapig terjed a magas incidenciájú területeken (5-8). Egyetlen szisztémás kemoterápiás kezelés sem mutatott jelentős hatékonyságot. Az egyszeres és több gyógyszeres protokollokra adott válaszarányok, biológiai válaszmódosítókkal vagy anélkül, nem jobbak 20-30%-nál (9-12), és a randomizált vizsgálatok nem mutatnak egyértelmű túlélési előnyt (13, 14). A közelmúltban kimutatták, hogy a szorafenib 7,9 hónapról 10,7 hónapra növelte az általános túlélést a Child's A-ban szenvedő hepatocelluláris rákos betegeknél (15). A HCC külső sugárterápiája még palliációban sem hatékony (9, 16, 17), mert a daganatba juttatható sugárdózist a sugárfertőzés korlátozza (18, 19). Palliatív kezelésként alkalmazták a citotoxikus szerek májon belüli intraarteriális infúzióját, amelynek célja a gyógyszerek lokális koncentrációjának növelése és a szisztémás toxicitás csökkentése (20), valamint az intraarteriális embolizáció, amely a tumor ischaemiás nekrózisát okozza (21). A kemoembolizációt leggyakrabban a tumor méretének csökkenéséről szóló jelentések alapján alkalmazzák nem randomizált vizsgálatokban (22-26); azonban egy többközpontú randomizált vizsgálat eredményei nem mutattak javulást az általános túlélésben, és ezzel a terápiás megközelítéssel jelentős morbiditást mutattak (27). Nyilvánvalóan új terápiás stratégiákra van szükség ennek a halálos betegségnek a kezelésére.

Az endogén opioid rendszerek részt vesznek a fejlődő sejtek és szövetek, mikroorganizmusok, sejtmegújuláson átmenő szövetek, valamint neoplasztikus sejtek és szövetek növekedésében (28, 29). Az opioid peptidek hatásának alapos vizsgálata szövettenyészetben növekvő hasnyálmirigyráksejtekben kimutatta, hogy a [Met5]-enkefalin, egy pentapeptid volt a DNS szintézist és növekedést leginkább befolyásoló peptid; növekedési faktor hatása miatt a [Met5]-enkefalint opioid növekedési faktornak (OGF) nevezték el. Az OGF kölcsönhatásba lép az OGFr receptor zétával (OGFr), hogy befolyásolja a növekedést. Más opioid receptoroktól eltérően a funkció (pl. növekedés), eloszlás (neurális és nem idegi), átmeneti megjelenés az ontogenetikus folyamat során, ligandspecifitás (azaz [Met5]-enkefalin), kompetitív gátlási profil, szubcelluláris elhelyezkedés (azaz sejtmag) és az a tény, hogy más ismert opioid receptorok ligandumai nem befolyásolják a növekedést, olyan egyedi jellemzőket biztosítottak, amelyek megkülönböztetik az OGFr-t más opioid receptoroktól. Kimutatták, hogy az opioidok gátló növekedési faktorként működnek humán hasnyálmirigyrákban, mind in vitro, mind in vivo (28, 30).

A [Met5]-enkefalint számos kísérleti vizsgálatban biztonságosan alkalmazták rákos betegek kezelésére. Wybran és Schandene (31) intravénásan [Met5]-enkefalint adott be hét korábban nem kezelt tüdőrákos betegnek, és jelentős növekedést tapasztaltak a T-sejtes immunitásban (azaz OK1 0 sejtek). Leu11 sejtek és természetes gyilkos sejtek). Plotnikoff és munkatársai (32) a [Met5]-enkefalint több hónapon keresztül intravénás infúziók formájában, hetente háromszor 10-60 pg/ttkg dózisban adagolták előrehaladott melanómában szenvedő humán alanyoknak. Plotnikoff és munkatársai (33), valamint Wybran és munkatársai (31) arról számoltak be, hogy AIDS-betegeknél javult a Kaposi-szarkóma csomóinak mérete és színe. Ezenkívül a [Met5]-enkefalin növelte a citotoxikus T-sejtek és NK-sejtek számát, amelyek részt vesznek a tumor megfigyelésében. Ezekben a humán vizsgálatokban a tumorválasz a [Met5]-enkefalin immunrendszerre gyakorolt ​​hatásának tulajdonítható (31, 34). A közelmúltban egy I. fázisú vizsgálat kimutatta, hogy az OGF biztonságosan beadható előrehaladott hasnyálmirigyrákban szenvedő betegeknek (30), és most egy II. fázisú vizsgálatban adják.

Kutatócsoportunk kimutatta az opioid növekedési faktor (OGF)-OGF receptor (OGFr) rendszer jelenlétét és működését humán hepatocelluláris karcinómában. Először is, az SK-Hep-1 és HepG2 humán hepatocelluláris sejtvonalak immunhisztokémiai festése az OGF és az OGFr specifikus eloszlását tárta fel. Másodszor, az OGFr-t receptorkötési vizsgálatokban mutatták ki, és azt találták, hogy egyetlen kötőhelyhez kötődik specifikusan és telíthetően, 12,1 ± 2,7 fmol/mg fehérje és 9,4 ± 1,9 fmol/mg kötési kapacitás (Bmax) értékkel. fehérje és kötési affinitás (Kd) értéke 6,1 ± 1,1 nM és 5,8 ± 1,5 nM az SK-Hep-1 és HepG2 esetében. Harmadszor, az OGF humán hepatocelluláris karcinóma sejtek sejtszámára gyakorolt ​​hatását monitorozó funkcionális vizsgálatokban statisztikailag szignifikáns csökkenést találtak a sejtnövekedésben in vitro, amikor SK-Hep-1 sejteket OGF jelenlétében tenyésztettek (10.7. melléklet). A hasnyálmirigyrák, valamint a vastagbélrák, a neuroblasztóma és a fej-nyaki laphámsejtes karcinóma korábbi in vitro és in vivo bizonyítékai, valamint a hasnyálmirigyrákos betegeken végzett sikeres OGF I. fázisú vizsgálat alapján ezek az előzetes A hepatocelluláris karcinóma sejtekkel kapcsolatos adatok konzisztensek, és indokolják az OGF-terápia tesztelését hepatocelluláris karcinómában és cirrhosisban szenvedő betegeknél.