Impalcatura in chitosano per la riparazione del pavimento sellare nella chirurgia transfenoidale endoscopica endonasale

Introduzione Questo caso descrive l'uso di un nuovo scaffold bilaminare di chitosano nella riparazione del pavimento sellare dopo un intervento di chirurgia transfenoidale endoscopica endonasale per un sospetto macroadenoma ipofisario, l'uso del chitosano come scaffold è stato descritto in diversi studi preclinici e testato in bioingegneria tissutale di osso, tessuto neurale e tessuto molle, nel caso del tessuto osseo, diversi studi ne hanno dimostrato le potenzialità per le sue caratteristiche di biocompatibilità, osteinduttive e osteoconduttive, ma mancano studi clinici che dimostrino queste caratteristiche in ambito clinico. Una delle complicanze più comuni per i neurochirurghi dopo un intervento endoscopico transfenoidale endonasale è la fuoriuscita di CSF, a seconda della tecnica e della ricostruzione utilizzata per il pavimento sellare questa complicanza potrebbe presentarsi dal 5% al ​​75% dei casi, portando a complicanze tali infezioni e pneumoencefalo, che rappresentano un grande rischio di comorbilità, tempi di recupero più lunghi e costi ospedalieri, a causa di queste sfide nella riparazione del pavimento sellare, i ricercatori intendono affrontare la problematica con un'impalcatura di chitosano per le sue caratteristiche nella rigenerazione ossea. L'inserimento di una membrana bioattiva nel difetto dell'intervento potrebbe essere utile per una chiusura più forte e adeguata del pavimento sellare.

Descrizione del caso Una partecipante di sesso femminile di 65 anni, destra, si è presentata alla visita neurochirurgica con una progressiva perdita visiva bilaterale nei suoi campi temporali, con predominanza nell'occhio sinistro per oltre 10 mesi, due settimane prima del suo ricovero la partecipante ha riportato un'improvvisa perdita di coscienza , spingendola ad andare in ospedale. Nel suo esame clinico, la partecipante era vigile e orientata x3, normale esame dei nervi cranici ad eccezione della diminuzione dell'acuità visiva di 20/200 nell'occhio sinistro, 20/80 nell'occhio destro, emianopsia bitemporale e lieve atropia primaria del disco ottico in l'occhio sinistro, l'andatura e l'esame motorio e sensitivo erano normali. Gli studi di laboratorio hanno mostrato un LH: 0,22 e prolattina: 53,7. Nella RMN cerebrale preoperatoria con contrasto, è stata riscontrata una lesione sellare, ipointensa in T1 ma iperintensa in T2 segnale con potenziamento della periferia dopo l'infusione di gadolinio, la lesione presentava estensione al seno sfenoidale, spazio paraselare senza coinvolgimento delle carotidi e sopraselare con spostamento del chiasma ottico. Il partecipante è stato sottoposto ad intervento endoscopico endonasale transsfenoidale per resezione della lesione sellare, sotto la visualizzazione diretta, la lesione si presenta rossastra e molle con moderata emorragia, viene prelevato un campione per patologia e il restante viene estratto senza complicanze, quindi viene impiantato lo scaffold nel sito del difetto osseo nel seno sfenoidale, per la sua natura modellabile, è stato facilmente fissato, coprendo l'intera estensione del difetto, è stato inserito un innesto di grasso nel seno sfenoidale che copre la membrana bilaminare di chitosano, quindi è stato utilizzato il sigillante di fibrina per controllo emostatico e un tampone nasale è stato impostato in entrambe le narici per finalizzare la procedura. Nel postoperatorio non si sono verificate complicazioni e dopo pochi giorni la partecipante è stata dimessa con notevole miglioramento clinico, dopo un mese di follow up la partecipante ha recuperato l'acuità visiva e la partecipante non ha riferito alcun sintomo, la partecipante è stata sottoposta a risonanza magnetica cerebrale postoperatoria , dove si osserva una resezione totale grossolana e buona chiusura del pavimento sellare, senza segni di rigetto o flogosi nella zona con l'impalcatura chitosana.

Materiali e metodi per l'impalcatura bilaminare in chitosano L'impianto bilaminare è costituito da due tipi di strutture diverse, una delle membrane presenta una struttura piana-liscia, l'altra membrana ha una struttura tridimensionale-porosa, ciascuna delle caratteristiche fisico-chimiche conferite a le membrane, era in funzione dell'effetto biologico preteso nel tessuto effettore.

I due tipi di membrane, sintetizzati per l'elaborazione dell'impianto bilaminare, sono stati elaborati con chitosano di grado biomedico di medio peso molecolare con 75-85% di deacetilazione in polvere presentazione dal marchio Sigma Aldrich®, U.S.A.

Nel caso della membrana con struttura piatta-liscia, è stata sintetizzata da una soluzione di chitosano al 2%, il mezzo di dissoluzione è stato acido acetico diluito (Sigma Aldrich®, U.S.A); Per acquisire un'opportuna solubilizzazione, la miscela è stata posta su agitatore magnetico per 1 ora, posteriormente la soluzione è stata portata sotto l'azione di un sonicatore a 28°C per 2 ore, fino alla completa eliminazione delle bolle d'aria formate dall'agitatore.

Per la membrana con la struttura tridimensionale-porosa, è stata sintetizzata da una soluzione di chitosano al 4%, il mezzo di dissoluzione è stato acido acetico diluito (Sigma Aldrich®, U.S.A); per una opportuna solubilizzazione, la miscela è stata posta su agitatore magnetico per 4 ore, quindi la soluzione è stata portata sotto l'azione di un sonicatore a 28°C per 2 ore, fino alla completa eliminazione delle bolle d'aria formate dall'agitatore.

Una volta elaborate le soluzioni, per la sintesi delle due membrane (la piana-liscia e la tridimensionale-porosa) entrambe sono state poste in una quantità costante di ml/cm2 in una capsula di Petri, nel caso della membrana piana-liscia, è stato sottoposto ad un procedimento di essiccamento con 98% di perdita di umidità e per il tridimensionale-poroso è stato indotto termicamente un procedimento di separazione di fase.

Quando entrambe le membrane sono già elaborate, si procede alla sintesi dell'impianto bilaminare, le membrane vengono unite utilizzando una soluzione di chitosano acetato al 2%, che è stata distribuita uniformemente tra le due membrane per creare una struttura a sandwich, successivamente l'insieme è stato posto in un La capsula di Petri e il coperchio sono stati posti capovolti nell'aspetto superiore della capsula di Petri. Si pone ad essiccare per 24 ore a temperatura ambiente e quindi si precipita in una soluzione di idrossido di sodio 1N, seguendo le stesse indicazioni utilizzate per ciascuna membrana separatamente.