Scaffold de quitosana para reparo do assoalho selar em cirurgia transesfenoidal endoscópica endonasal

Introdução Este caso descreve o uso de um novo andaime bilaminar de quitosana no reparo do assoalho selar após uma cirurgia transesfenoidal endoscópica endonasal para uma suspeita de macroadenoma hipofisário, o uso de quitosana como andaime foi descrito em vários estudos pré-clínicos e testado em bioengenharia de tecidos de osso, tecido neural e tecido mole, no caso do tecido ósseo, vários estudos demonstraram seu potencial devido à sua biocompatibilidade, características osteindutoras e osteocondutoras, mas faltam ensaios clínicos que demonstrem essas características no cenário clínico. Uma das complicações mais comuns para os neurocirurgiões após uma cirurgia transesfenoidal endoscópica endonasal é a fístula liquórica, dependendo da técnica e da reconstrução utilizada para o assoalho selar esta complicação pode ocorrer de 5% a 75% dos casos, levando a complicações tais infecções e pneumoencéfalos, representando um grande risco para comorbidades, tempos de recuperação mais longos e custos hospitalares, devido a esses desafios no reparo do assoalho selar, os pesquisadores pretendem abordar a problemática com um andaime de quitosana por suas características na regeneração óssea. A colocação de uma membrana bioativa no defeito da cirurgia pode ser útil para um fechamento mais forte e adequado do assoalho selar.

Descrição do caso Participante do sexo feminino, 65 anos, destra, compareceu à consulta de neurocirurgia com perda visual progressiva bilateral nos campos temporais, com predominância no olho esquerdo há mais de 10 meses, duas semanas antes da admissão referiu perda súbita de consciência , levando-a a ir ao hospital. Em seu exame clínico, a participante estava alerta e orientada x3, exame de nervos cranianos normais, exceto para diminuição da acuidade visual em 20/200 no olho esquerdo, 20/80 no olho direito, hemianopia bitemporal e leve atrofia primária do disco óptico em o olho esquerdo, a marcha e o exame motor e sensitivo normais. Os exames laboratoriais mostraram LH: 0,22 e prolactina: 53,7 .Na RM cerebral pré-operatória contrastada, foi encontrada uma lesão selar, hipointensa em T1 mas hiperintensa em T2 com realce da periferia após a infusão de gadolínio, a lesão apresentava extensão ao seio esfenoidal, espaço parasselar sem envolvimento das carótidas e supraselar com deslocamento do quiasma óptico. O participante foi submetido a cirurgia endoscópica endonasal transesfenoidal para ressecção da lesão selar, sob visualização direta, a lesão apresentou-se avermelhada e mole com sangramento moderado, foi retirada uma amostra para anatomopatológico e o restante é extraído sem intercorrências, então o scaffold é implantado no localização do defeito ósseo no seio esfenoidal, devido a sua natureza moldável, foi facilmente fixado, cobrindo toda a extensão do defeito, foi colocado enxerto de gordura no seio esfenoidal cobrindo a membrana bilaminar de quitosana, então selante de fibrina foi usado para controle hemostático e tamponamento nasal foi colocado em ambas as narinas para finalização do procedimento. No pós-operatório não houve complicação e após alguns dias a participante teve alta com notável melhora clínica, após um mês de acompanhamento a participante recuperou sua acuidade visual e a participante não referiu nenhum sintoma, a participante foi submetida a uma ressonância magnética cerebral pós operatória , onde se observa ressecção total grosseira e bom fechamento do assoalho selar, sem sinais de rejeição ou inflamação na zona com scaffold de quitosana.

Materiais e métodos para o scaffold bilaminar de quitosana O implante bilaminar é constituído por dois tipos de estruturas diferentes, uma das membranas apresenta uma estrutura plana-lisa, a outra membrana possui uma estrutura tridimensional-porosa, cada uma das características físico-químicas dadas a nas membranas, foi em função do efeito biológico pretendido no tecido efetor.

Os dois tipos de membranas, sintetizadas para a elaboração do implante bilaminar, foram elaboradas com quitosana de grau biomédico de médio peso molecular com 75-85% de desacetilação em apresentação em pó da marca Sigma Aldrich®, U.S.A.

No caso da membrana com estrutura flat-smooth, ela foi sintetizada a partir de uma solução de quitosana a 2%, o meio de dissolução foi ácido acético diluído (Sigma Aldrich®, EUA); Para adquirir uma solubilização adequada, a mistura foi colocada em um agitador magnético por 1 hora, posteriormente a solução foi levada à ação de um sonicador a 28ºC por 2 horas, até que as bolhas de ar formadas pelo agitador fossem completamente eliminadas.

Para a membrana com estrutura porosa tridimensional, foi sintetizada a partir de uma solução de quitosana a 4%, o meio de dissolução foi ácido acético diluído (Sigma Aldrich®, EUA); para uma solubilização adequada, a mistura foi colocada em agitador magnético por 4 horas, em seguida a solução foi levada à ação de um sonicador a 28ºC por 2 horas, até que as bolhas de ar formadas pelo agitador fossem completamente eliminadas.

Uma vez elaboradas as soluções, para a síntese das duas membranas (a plana-lisa e a tridimensional-porosa) ambas foram fixadas em uma quantidade constante de ml/cm2 em uma placa de Petri, no caso da membrana plana-lisa, foi submetido a um procedimento de secagem com 98% de perda de umidade e para o poroso tridimensional, foi induzido termicamente um procedimento de separação de fases.

Quando ambas as membranas já estão elaboradas, procede-se a sintetizar o implante bilaminar, as membranas são combinadas usando uma solução de acetato de quitosana a 2%, que foi distribuída uniformemente entre ambas as membranas para criar uma estrutura sanduíche, consecutivamente o conjunto foi colocado em um placa de Petri e a tampa foi colocada invertida na face superior da placa de Petri. Deixou-se secar por 24 horas em temperatura ambiente e, em seguida, precipitou-se em solução de hidróxido de sódio 1N, seguindo as mesmas indicações utilizadas para cada membrana separadamente.