Applicazione clinica della tecnica di attivazione degli ovociti artificiali (AOA) nell'ART

La procedura ICSI migliora i tassi di fecondazione nei casi di infertilità da fattore maschile. Tuttavia, il fallimento della fecondazione si verifica ancora nell'1-5% nei cicli ICSI. La causa principale della mancata fecondazione è il mancato completamento dell'attivazione degli ovociti. L'attivazione degli ovociti comporta una moltitudine di cambiamenti molecolari. Gli investigatori usano una varietà di metodi meccanici, elettrici e chimici per innescare le oscillazioni del calcio necessarie per attivare gli ovociti. Durante l'attivazione meccanica degli ovociti, gli oolemmi vengono perforati utilizzando un microago per innescare un afflusso di calcio. Un altro metodo per l'attivazione meccanica degli ovociti è la microiniezione diretta di calcio nell'ovocita per aumentare il calcio intracellulare. È stato descritto con l'uso dello ionoforo di calcio A23187, che può imitare il modello naturale di aumento del calcio. L'attivazione meccanica e chimica sono i metodi più comunemente usati per l'attivazione artificiale degli ovociti, possono imitare le oscillazioni del calcio con conseguente successo della fecondazione. AOA, una tecnica di fecondazione altamente specializzata che può essere aggiunta all'ICSI convenzionale per superare il fallimento della fecondazione in pazienti che avevano fallito la fecondazione o avevano una storia di embrioni di scarsa qualità.

Quando il numero di ovociti recuperati era >10, gli ovociti di pari livello sono stati divisi in 3 gruppi per eseguire la procedura ICSI standard (gruppo di controllo), l'AOA chimica (gruppo sperimentale A1) o l'AOA meccanica (gruppo sperimentale A2). Quando il numero di ovociti recuperati era 6-10, gli ovociti di pari livello sono stati randomizzati 1:1 per eseguire l'AOA chimica (gruppo sperimentale A1) o l'AOA meccanica (gruppo sperimentale A2). Il numero di ovociti recuperati era 1-5, a tutti gli ovociti veniva eseguito l'AOA chimico. Gruppo di controllo, un singolo spermatozoo è stato iniettato nell'ooplasma, procedura ICSI standard. Gruppo sperimentale A1, sono stati trattati iniettando CaCl2 in concomitanza con ICSI seguita da esposizione sequenziale della soluzione di attivazione dello ionoforo di calcio A23187 per due volte di AOA post-ICSI. Gruppo sperimentale A2, la stimolazione meccanica è stata eseguita prima della procedura ICSI standard, quindi gli ovociti sono stati trasferiti nella soluzione di attivazione dello ionoforo di calcio A23187 per due volte l'AOA post-ICSI. Gli investigatori vogliono stabilire l'efficacia e la sicurezza dei diversi metodi AOA, per migliorare l'esito della fecondazione e la qualità dell'embrione e infine ottenere una prole sana.