未就学児の口腔健康に対するプロバイオティクス錠剤の予防効果

背景 う蝕の全体的な減少にもかかわらず、幼児期のう蝕（ECC）は依然として社会的および行動的勾配を伴う深刻な世界的問題である[1、2]。 この疾患は多因子ですが、重要な事象は口腔環境における pH 誘発ストレスであり、その結果口腔バイオフィルムの多様性が減少します [3]。 バイオフィルムは単にこの状況に適応し、有益な健康増進細菌に代わって虫歯に関連する酸性菌株が異常増殖するだけです。 したがって、プロバイオティクス細菌の追加は、既存の科学的根拠に基づいた方法への補助として、口腔の健康を維持するための新しいアプローチとして提案されています[4、5]。 これまでの臨床試験では、乳酸菌由来の乳製品を毎日摂取すると、虫歯の発生率が減少し、一般的な健康状態が改善され、未就学児の抗生物質の使用が減少する可能性があることが示されています[6、7、8]。 ただし、プロバイオティクスの概念についてはさらなる研究が必要です。すべての子供は牛乳を飲みませんし、これまで非乳製品や連鎖球菌株を使った小児う蝕に関する研究は行われていません。

目的 本プロジェクトの目的は、プロバイオティクス細菌（Probiora3）を含む咀嚼錠剤の毎日の投与が、未就学児の歯垢量、歯肉の健康および虫歯の発生率に及ぼす影響を評価することです。 さらに、一般的な健康に関する情報も収集されます。 帰無仮説は、口腔の健康は、同様のプラセボ錠剤を摂取した未就学児と変わらないということです。 追加の目的は、ベースライン時および介入中に唾液サンプル中の微生物組成を監視することです。

研究デザイン 研究デザインは、2 つの並行群による前向き無作為化二重盲検プラセボ対照試験です。 期間は12か月です。 介入グループと対照グループへの割り当ては、コンピュータベースのランダム化によってグループ A または B に行われます。

材料 研究グループは、スウェーデン、マルメのローゼンゴールにある公立歯科医院に定期的に通う 2 歳児の中から募集されます。 この診療所は、社会経済性が低い多文化の郊外地域に位置しています。 この地域では移民の割合が高く、大多数がアラビア語を話します。 参加基準は、i) 一般的な健康状態が損なわれていないこと、ii) 虫歯や重度の歯科疾患がないこと、および iii) 精神的または身体的障害がないことです。 歯科検査に協力的でない子供や歯科検査を全く拒否する子供は除外されます。 小児は、両親によるインフォームドコンセント（口頭および書面）に署名した後、連続して登録され、コンピュータープログラムによって生成された事前に番号が付けられた封筒によってテストグループまたは対照グループのいずれかに割り当てられます。 新しい患者が研究に参加する場合、臨床医は患者をグループ A またはグループ B に割り当てる次の番号の封筒を受け取ります。プロトコールは地域の倫理委員会に提出され、承認されています。

検出力計算 アルファを 0.05 に設定し、ベータ = 0.2 に設定した臨床スコアの検出力計算では、臨床スコアに関する治療グループ間の 30% の差を明らかにするには、各群 85 人の被験者が必要であると推定されます (率とベータについてはフライス統計法)。プロポーション、第 2 版、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・ニューヨーク、1981 年）。 予想される転勤とプロトコルの遵守不履行のため、目標は最低220人、最大250人の子供たちを採用することになる。

介入と期間 すべての家族は、ベースラインの前に歯科衛生士による口腔健康メッセージの包括的な強化を受けます。 フッ素入り歯磨き粉を使用した監視下での毎日のブラッシングに重点が置かれます。 ベースライン検査では、プラーク指数、歯磨き後の出血、う蝕が光学読み取り用の特別な用紙に記録されます。 継続中の投薬などのデータは歯科記録から抽出されます。 さらに、Stecksén-Blicks et al. によると、虫歯リスク評価はコンピューター化されたプログラム (Cariogram) を利用して実行されます。 2007年 [8]。 試験グループ（グループ A）の子供たちの親は、子供たちに 1 日 1 回、理想的には歯磨き後に 1 錠の EvoraKids® タブレットを 12 か月間与えるよう指示されます。 対照群（グループB）の子供の親には、生きたプロバイオティクス細菌を含まない錠剤の摂取について同じ指示が与えられます。 グループの割り当ては保護者と研究者の両方にとって不明であり、統計計算後にのみ開示されます。 割り当ての隠蔽は製造元によって保持されます。 すべての親は、研究期間中、すべての習慣的な口腔衛生ルーチンを維持し、フッ化物歯磨き粉を使用することが奨励されます。

試験錠剤には、3 つのプロバイオティック連鎖球菌株 (S. uberis KJ2、S. oralis KJ3 および S. Rattus JH145) の商標である Probiora3 が 3x108 CFU の濃度で含まれています。 錠剤には、歯に優しいポリオールであるエリスリトロールによって甘味が付けられています (栄養成分表については、付録 B を参照してください)。 味と外観が同一の咀嚼錠剤 (テストおよびプラセボ) は、文字「A」または「B」で区切られたパッケージで製造業者 (Oragenics、米国) から供給されます。 参加家族にはその時点で 3 か月間使用できるタブレットが提供され、フォローアップのたびにコンプライアンスの確認と登録が行われます。 保護者は、副作用や副作用を感じた場合には直ちに歯科スタッフに報告し、摂取を中止するよう指導されます。

臨床検査

臨床検査はベースライン時と、6 か月後、12 か月後に行われます。 家族には 3 か月ごとに面接と研究成果物の送付について連絡が行われます。 検査と採点は、歯科医院で十分な訓練を受け校正された歯科衛生士 2 名によって視覚的および触覚的に行われます。 ベースラインでは、家庭内での口腔衛生習慣、哺乳瓶の使用、習慣的な甘い食事摂取に関する情報が 10 問のアンケートによって収集されます。 次のエンドポイントがスコアリングされます。

主な結果の尺度:

• 可視プラーク指数 (VPI)
• 歯肉の炎症の有病率（歯磨き後の出血、BAB）
• う蝕の有病率（空洞化病変および白点病変）

副次的結果の測定:

• 上気道または下気道感染症の数
• 中耳炎の数
• 下痢の日数
• 医師の診察
• 抗生物質の処方
• アレルギー、喘息、湿疹の発生率

詳細な方法論 可視プラークインデックス (VPI): 上切歯および犬歯の歯肉縁に沿った歯垢の有無 ブラッシング後の出血 (BAB): 柔らかい歯ブラシで優しくブラッシングした後の出血の有無 虫歯の有無: 空洞化および非空洞病変は、公的歯科サービスの基準に従ってすべての歯に登録され、dmft および dmfs として表されます。

副次評価項目は、保護者への電話通話を通じて、また保護者の日誌に基づいて 6 か月ごとにスコア付けされます。

臨床サンプリング 研究期間中に 2 つの研究グループの口腔微生物叢をモニタリングするために、Barfod らの研究者らによると、ベースライン (介入前) と 6 か月および 12 か月の追跡調査時に唾液サンプルが収集されます。 9]。 医療スタッフの監督の下、親が子供の口に綿棒を入れます。 浸したら、つぼみを小さなプラスチックのチューブに移し、患者の研究番号をマークし、すぐに冷凍して保存します。 治験が完全に完了した後、すべてのサンプルは製造業者の費用負担で米国フロリダ州オラジェニクスに輸送され、さらなる取り扱いと処理が行われます。 臨床サンプリングのランニングコストは、別の契約によってカバーされます。

統計的方法 すべてのデータは、IBM-SPSS ソフトウェア (バージョン 19.0、米国イリノイ州シカゴ) で処理されます。 カテゴリデータはカイ二乗検定の対象となります。 連続測定はノンパラメトリック テストを利用して計算されます。 う蝕の発生率は、フォローアップとベースラインの間の dmfs/dmft の差として計算されます。 比較はベースライン時とフォローアップ時に研究グループ間で行われます。 集団隠蔽は統計計算が終わるまで明らかにされない。 0.05 未満の p 値は、統計的に有意であると見なされます。

結果のレポート 帰無仮説は拒否されるか受け入れられます。 発見は不必要な遅滞なく国際会議で報告され、適切な査読付き科学雑誌に掲載される予定です。 サプライヤーは、提出前に原稿を読んでコメントすることができます。

倫理的考慮事項 この介入に関連して予見される副作用や悪影響はありません。 すべての患者は、プロジェクト中およびプロジェクト後に「最良の臨床実践」に従って歯科医または特別な訓練を受けた歯科衛生士によって管理されます。 う蝕の急速な進行は、グループに関係なく、非手術的治療および手術的治療によって管理されます。 すべての治療はご家族の負担なく行われます。 タブレットは無料で配布されています。 提供された治療に関連するすべての有害事象は、有害事象フォームに記録されます。 調査は、人体実験に関するヘルシンキ宣言の原則に従って実施される。