재발성 다발성 경화증(RMS) 환자에서 ADA SNP의 역할

다발성 경화증(MS)의 치료 환경은 빠르게 발전하고 있습니다. 지난 25년 동안 새로운 면역 조절 약물의 포함이 가속화되었습니다. 다발성 경화증 면역 요법은 또한 지속적으로 제공되는 치료(만성 치료)와 간헐적으로 적용되는 약물(면역 재구성 요법[IRT])으로 다른 방식으로 분류될 수 있습니다. 후자의 이면에 있는 원리는 스스로 재건할 수 있는 면역 체계의 고갈입니다. IRT는 정의에 따라 짧은 간헐적 과정으로 제공되며 지속적으로 제공되지 않습니다. IRT 양식은 경우에 따라 "치료"의 정의에 가까운 MS의 장기 완화를 유도하는 것으로 나타났습니다.

가장 중요한 것은 이러한 양식을 사용하는 IRT가 재구성 단계 후에 림프구 레퍼토리에 상당한 변화를 일으킨다는 것입니다.

이는 말초 림프구를 선택적으로 고갈시키는 고효능 요법인 클라드리빈(2-CdA)의 경우 특히 그렇습니다. 최근 유럽 의학청은 질병 활성도가 높은 RMS 환자를 위해 승인했습니다.

림프구는 다른 세포 유형에 비해 DCK 대 5'-NT의 세포내 비율이 높습니다. 구체적으로, DCK의 수준과 DCK 대 5'-NT의 비율은 T 세포(CD4+ 및 CD8+), B 세포 및 수지상 세포에서 높지만 수많은 비혈액 세포 유형에서는 매우 낮습니다(http://biogps. gnf.org). 이것은 주로 기억 B 세포인 림프구를 2-CdA 뉴클레오티드의 축적에 특히 민감하게 만듭니다. 2-CdATP의 세포내 축적은 2-CdATP의 세포 DNA로의 혼입으로 이어져 이중 나선 구조를 파괴하고 DNA 복구 및 합성 실패로 이어집니다. 생성된 DNA 가닥 절단은 세포 주기 진행을 변경하여 세포 사멸에 의해 매개되는 세포 사멸을 유도합니다. 세포사멸이 2-CdA의 가장 두드러진 작용 기전이지만 추가 기작을 배제할 수는 없습니다. 항원 유도 T 림프구 증식에서 T 헬퍼 1(Th1) 및 Th2 세포 분화에 이르기까지, 호중구 및 대식세포 화학주성에서 세포내 병원체 사멸에 이르기까지, 그리고 NADPH- IL-1β 성숙 및 방출에 대한 옥시다제 활성화. 또한, 클라드리빈의 중추적인 3상 시험에서 수집된 림프구 하위 집합에 대한 분석은 T 세포 감소가 일부 클라드리빈-용량 의존성을 보이는 반면, B 세포는 시험에서 두 투여 일정 모두에서 유사한 감소를 나타냄을 보여주었습니다. 또한, T 및 B 세포의 평균 수는 재발이 없는 환자와 재발이 진행되는 환자 간에 차이가 없었으며, 이는 클라드리빈의 효능이 림프구 수의 감소에 엄격하게 의존하지 않음을 시사합니다. 반면에, 낮은 림프구 수는 대상 포진 감염의 높은 위험과 관련이 있으며, 모든 사건은 제한되고 피부에 발생하며, 대부분은 경증 또는 중등도로 등급이 매겨집니다. 따라서 심각한 림프구 감소증은 또한 안전을 위해 확인된 중요한 위험입니다. 3상 임상 시험(RCT)에서 3.5mg/kg의 경구용 2-CdA로 치료받은 피험자의 20-25%에서 일시적인 3-4등급 림프구 감소증이 발생했습니다. 림프구 감소증 치료를 중단한 환자의 비율은 CLARITY 연구의 연장 단계 말기에 2-CdA(CC 8.75mg/kg)의 최대 누적 용량을 투여받은 그룹에서 가장 높았다(12.4%)(22). . 이 효과는 또한 림프구에서 감소된 수준의 DCK mRNA 및 더 높은 수준의 5'NT mRNA와 다른 질병에서 상관관계가 있습니다. 2-CdA의 생물학적 활성화는 ADA 작용과 독립적으로 DCK 기능을 필요로 하지만, 림프구 활성화 및 기능에서 ADA의 중요한 역할을 고려하여 2-CdA 작용 메커니즘의 다른 측면에 ADA 참여를 배제할 수 없습니다.

이에 최근 MS에서 50개 이상의 SNP를 스크리닝하여 뇌 염증 및 MS 질환 중증도와 관련된 ADA 유전적 변이(rs244072, non-risk/risk allele: T/C)를 규명하였다(준비중). - 514명의 MS 환자의 관련 유전자 및 임상 및 생화학적 매개변수와의 연관성을 찾고 있습니다. 관찰된 가장 현저한 결과는 적어도 하나의 위험 대립형질의 존재와 EDSS 점수 사이의 직접적인 상관관계였습니다. 즉, CT/CC 환자는 TT 환자보다 EDSS의 더 높은 값을 나타냅니다(p=0.016).

따라서, 우리는 MS 질병 중증도와 상관관계가 있는 것으로 밝혀진 ADA 유전자의 유전적 다형성이 림프구 감소증과 같은 부작용뿐만 아니라 약물 감수성/내성 측면에서 2-CdA 반응에도 영향을 미칠 수 있다는 가설을 세웁니다. 그 근거에 따르면, MRS 환자가 이용할 수 있는 현재 치료 옵션의 파노라마에서 클라드리빈은 ADA의 작용 메커니즘을 방해하는 작용 메커니즘을 갖는 유일한 면역 재구성 요법이며 이를 위해 클라드리빈을 다음 치료제로 선택했습니다. 이 연구를 위한 임상 실습의 참조 치료.

임상 실습에 따라 클라드리빈으로 치료를 받고 기준선 전 최대 -3개월(0개월)의 기준선 전 스크리닝 기간 동안 SmPc 요구 사항을 충족하는 피험자는 1주 및 5주(W1 -W5) 임상 실습에 따름.

피험자는 1년차에 클라드리빈을 시작하기 전, 2년차에 클라드리빈을 시작하기 전에, 그리고 각 치료 연도의 치료 시작 후 2개월 및 6개월 후에 필수 모니터링에 따라 혈액 샘플을 위해 방문합니다.

이 연구는 각 대상자에 대해 2년 동안 지속되며 MS 대상자 모니터링을 위한 임상 관행에 따라 0개월, 6개월, 12개월 및 24개월에 5번의 방문을 제공합니다.

이 연구의 1차 목적은 재발성 다발성 경화증(RMS) 환자의 실제 환경에서 Cladribine(2-CdA)에 의해 유도된 림프구 감소증에 대한 ADA SNP rs244072(비위험/위험 대립유전자: T/C)의 영향을 평가하는 것입니다. ).

보조 목표는 다음과 같습니다.

• 치료에 대한 환자의 반응에 영향을 미칠 수 있는 클라드리빈의 작용 방식과 관련된 분자, 대사 및 면역학적 요인을 평가하기 위해, 특히 림프구 감소증에 초점을 맞춥니다.
• 클라드리빈으로 치료받은 RMS 환자에 대한 안전성 및 내약성 데이터 수집;
• 장애 진행 및 재발 발생률에 대한 클라드리빈의 효과를 평가합니다.

이 연구에는 1차 및 2차 종점을 조사하기 위한 혈액 샘플 수집이 포함됩니다. 이러한 분석을 위해 0개월, 6개월, 12개월 및 24개월에 최대 60ml의 혈액을 수집합니다.

양적 변수는 평균 및 표준 편차(SD) 또는 중앙값 및 사분위수 범위(Q1-Q3)로 보고되며, 범주형 변수는 숫자(n) 및 백분율(%)로 보고됩니다. 1차 종점 및 임상 종점은 모든 샘플에서 평가됩니다. . 기타 2차 종료점은 달리 명시되지 않는 한 각 센터의 환자에 대해 평가합니다.

T 스튜던트 테스트 또는 Mann Whitney 테스트는 두 그룹의 기본 특성을 비교하는 데 사용됩니다(ADA의 유전적 다형성과 관련됨). 카이 제곱 테스트 또는 필요한 경우 피셔 정확 테스트는 범주형 변수에 사용됩니다. Shapiro Wilk 테스트 및 그래픽 방법을 사용하여 정규성 가정을 평가합니다.

1차 종료점 분석에서 paired t 테스트는 각 그룹의 림프구 변화를 개별적으로 평가하는 데 사용됩니다. 선형 혼합 모델을 사용하여 각 환자(무작위 효과로서의 환자) 그룹, 시간 및 시간당 그룹에 대한 반복 데이터를 고정 효과로 고려하여 두 그룹의 변화를 비교합니다. 모델 가정은 로그 데이터를 지원하지 않거나 다른 모델이 사용되는 경우 확인됩니다.

시간 동안 모든 샘플에 대한 임상 종점을 평가하기 위해 서로 다른 혼합 모델이 사용됩니다.

p 값 < 0.05는 통계적으로 유의합니다.