Az ADA SNP-k szerepe a kiújuló szklerózis multiplexben (RMS) szenvedő alanyokban

A sclerosis multiplex (MS) terápiás területe gyorsan fejlődik. Az elmúlt 25 évben felgyorsult az új immunmoduláló gyógyszerek bevezetése. Az SM immunterápiákat eltérő módon is be lehet sorolni: folyamatosan adott kezelésekre (krónikus kezelések) és szakaszosan alkalmazott gyógyszerekre (immun helyreállító terápiák [IRT]). Az utóbbi mögött meghúzódó elv az immunrendszer kimerülése, amely lehetővé teszi, hogy újjáépüljön. Az IRT-t definíció szerint rövid időszakos kurzusokon adják, és nem folyamatosan. Kimutatták, hogy az IRT-módszerek hosszú távú remissziót váltanak ki az SM-ben, ami bizonyos esetekben közel áll a „gyógyulás” definíciójához.

A legfontosabb, hogy az IRT ezeket a módszereket alkalmazva lényeges változásokat okoz a limfocita repertoárban a helyreállítási fázis után.

Ez különösen igaz a kladribinre (2-CdA), egy nagy hatékonyságú terápiára, amely szelektíven csökkenti a perifériás limfocitákat, és amelyet az Európai Gyógyszerügynökségek nemrégiben jóváhagytak a magas betegségaktivitású RMS-betegek számára.

A limfocitákban magas a DCK és az 5'-NT intracelluláris aránya más sejttípusokhoz képest. Pontosabban, a DCK szintje és a DCK 5'-NT-hez viszonyított aránya magas a T-sejtekben (CD4+ és CD8+), B-sejtekben és dendritikus sejtekben, de nagyon alacsony számos nem hematológiai sejttípusban (http://biogps. gnf.org). Emiatt a limfociták, főleg a memória B-sejtek, különösen érzékenyek a 2-CdA nukleotidok felhalmozódására. A 2-CdATP intracelluláris felhalmozódása a 2-CdATP sejt DNS-be való beépüléséhez vezet, ami megzavarja a kettős hélix szerkezetét, és a DNS javítás és szintézis kudarcához vezet. Az így létrejövő DNS-szál szakadások megváltoztatják a sejtciklus előrehaladását, és az apoptózis által közvetített sejthalált indukálják. Bár az apoptózis a 2-CdA legjelentősebb hatásmechanizmusa, további mechanizmusok nem zárhatók ki. Számos bizonyíték bizonyítja, hogy a nukleotid jelátvitel szabályozza az immunitás leglényegesebb válaszait, kezdve az antigénvezérelt T-limfocita proliferációtól a T helper 1 (Th1) és Th2 sejtek differenciálódásáig, a neutrofil és makrofág kemotaxistól az intracelluláris kórokozók elpusztításáig és a NADPH-ig. oxidáz aktiválása az IL-1β éréséhez és felszabadulásához. Ezenkívül a Cladribine III. fázisú pivotális vizsgálata során összegyűjtött limfocita-alcsoportok elemzése azt mutatta, hogy míg a T-sejtek csökkenése némi kladribin-dózis-függőséget mutat, a B-sejtek hasonló csökkenést mutatnak a vizsgálat mindkét adagolási rendje mellett. Ezenkívül a T- és B-sejtek átlagos száma nem különbözik a relapszusoktól mentes és a relapszusban szenvedő betegek között, ami arra utal, hogy a kladribin hatékonysága nem függ szigorúan a limfocitaszám csökkenésétől. Másrészt, az alacsonyabb limfocitaszám összefüggésbe hozható a Herpes Zoster fertőzés kialakulásának nagyobb kockázatával, mivel az összes esemény korlátozott és dermatomális, és legtöbbjük enyhe vagy közepes fokozatú. Így a súlyos limfopenia szintén fontos azonosított biztonsági kockázat. A III. fázisú klinikai vizsgálatokban (RCT) a 3,5 mg/kg orális 2-CdA-val kezelt alanyok 20-25%-ánál alakult ki átmeneti 3-4. fokozatú lymphopenia. A limfopenia miatti kezelést abbahagyó betegek aránya a CLARITY vizsgálat kiterjesztett szakaszának végén a legnagyobb kumulatív 2-CdA-dózist (CC 8,75 mg/kg) kapó csoportban volt a legmagasabb (12,4%) (22). . Ezt a hatást más betegségekben is korrelálták a limfocitákban a DCK mRNS csökkenésével és az 5'NT mRNS magasabb szintjével. Bár a 2-CdA biológiai aktiválásához az ADA hatásától függetlenül DCK funkcióra van szükség, nem zárható ki az ADA részvétele a 2-CdA hatásmechanizmusának egyéb vonatkozásaiban, figyelembe véve az ADA döntő szerepét a limfociták aktiválásában és működésében.

Ezzel összhangban a közelmúltban azonosítottak egy ADA genetikai variánst (rs244072, nem kockázati/kockázati allél: T/C), amely összefüggésben áll az agygyulladással és az SM-betegség súlyosságával (cikk készül), több mint 50 SNP szűrésével SM-ben. 514 SM-beteg génjeihez kapcsolódó géneket, és összefüggést keresnek a klinikai és biokémiai paraméterekkel. A legszembetűnőbb eredmény a legalább egy kockázati allél jelenléte és az EDSS pontszám közötti közvetlen összefüggés volt, nevezetesen a CT/CC betegek magasabb EDSS értéket mutatnak, mint a TT betegek (p=0,016).

Ezért azt feltételezzük, hogy az ADA gén genetikai polimorfizmusa, amely összefüggésben van az SM betegség súlyosságával, szintén befolyásolhatja a 2-CdA választ a gyógyszerérzékenység/rezisztencia, valamint a mellékhatások, például a limfocitopénia tekintetében. Az indoklás szerint az MRS beteg számára elérhető jelenlegi terápiás lehetőségek körképében a Cladribine az egyetlen olyan immunrekonstitúciós terápia, amelynek olyan hatásmechanizmusa van, amely interferál az ADA hatásmechanizmusával, és ehhez a kladribint választották. referencia kezelés a klinikai gyakorlatban ehhez a tanulmányhoz.

Azok az alanyok, akiket a klinikai gyakorlat szerint kladribinnel kezelni kívánnak, és teljesítik az SmPc-követelményeket a kiindulási állapot előtti szűrési időszakban, legfeljebb -3 hónappal a kiindulási állapot előtt (0. hónap), az 1. héten és az 5. héten (1. hét) egy kezdeti kezelési kúrát kapnak. -W5) a klinikai gyakorlat szerint.

Az alanyok a kötelező monitorozásnak megfelelően vérmintát vesznek az 1. évben a kladribin-kezelés megkezdése előtt, a 2. évben a kladribin-kezelés megkezdése előtt, valamint a kezelés megkezdése után 2 és 6 hónappal minden kezelési évben.

A vizsgálat alanyonként 2 évig fog tartani, öt vizittel: szűrés, a 0. hónapban, a 6. hónapban, a 12. hónapban és a 24. hónapban, az SM alanyok megfigyelésére vonatkozó klinikai gyakorlat szerint.

A vizsgálat elsődleges célja, hogy értékelje az ADA SNP rs244072 (nem kockázat/kockázat allél: T/C) hatását a kladribin (2-CdA) által kiváltott limfopeniára valós környezetben relapszusos sclerosis multiplexben (RMS) szenvedő betegeknél. ).

A másodlagos célok a következők:

• A Cladribine hatásmechanizmusában szerepet játszó molekuláris, metabolikus és immunológiai tényezők értékelése, amelyek befolyásolhatják a betegek kezelésre adott válaszát, különös tekintettel a limfopéniára;
• Biztonsági és tolerálhatósági adatok gyűjtése a kladribinnel kezelt RMS-betegekről;
• A Cladribine hatásának felmérése a rokkantság progressziójára és a relapszusok előfordulására.

A vizsgálat magában foglalja a vérminták gyűjtését az elsődleges és másodlagos végpontok vizsgálata céljából. Ezekhez az elemzésekhez legfeljebb 60 ml vért vesznek a 0., 6., 12. és 24. hónapban.

A mennyiségi változókat átlag és szórás (SD) vagy medián és interkvartilis tartomány (Q1-Q3), kategorikus változók szám (n) és százalék (%) formájában jelentik. Az elsődleges végpontokat és a klinikai végpontokat minden mintán értékelni kell. . Más másodlagos végpontokat az egyes centrumok betegeinél értékelnek, hacsak másképp nem jelezzük.

T Student tesztet vagy Mann Whitney tesztet használunk két csoport kiindulási jellemzőinek összehasonlítására (az ADA genetikai polimorfizmusával összefüggésben), Chi-négyzet tesztet o Ha szükséges, Fisher-tesztet használunk a kategorikus változókhoz. Shapiro Wilk teszt és grafikus módszereket fognak használni a normalitási feltételezések értékelésére.

Az elsődleges végpont-analízis során páros t-tesztet használnak a limfociták változásának értékelésére az egyes csoportokban külön-külön. Lineáris vegyes modellt használunk a változások összehasonlítására két csoportban, figyelembe véve az ismétlődő adatokat minden betegcsoport (a páciens mint véletlenszerű hatás) csoportra, az időre és az időnkénti csoportra mint rögzített hatásokra. A modell feltevések ellenőrzésre kerülnek, ha nem támogatják a logaritmus adatokat, vagy más modelleket alkalmazunk.

Különböző vegyes modelleket használnak a klinikai végpont értékelésére az összes mintán az idő folyamán.

A 0,05-nél kisebb p érték statisztikailag szignifikáns.