경미한 인지 장애의 위험 인자인 당뇨병과 마이크로RNA: 생활 방식 수정의 영향

현재 연구는 2016년 2월부터 2019년 6월까지 두 단계로 진행되었다.

1. 첫 번째 단계(기준선 평가): NRC의 외래 진료소에 다니는 163명의 제2형 당뇨병(T2DM) 환자를 대상으로 수행된 단면 연구였습니다. 환자는 남자 65명, 여자 98명이었다. 40세부터 65세까지. 모든 환자는 글을 읽을 수 있었고 인지 기능 테스트를 완료할 수 있었습니다. 제외 기준은 두부 외상, 뇌졸중, 일과성 허혈 발작, 뇌종양, 간질, 정신 질환, 심부전 또는 간부전 및 시각 또는 청각 장애의 병력이 있는 T2DM 환자였습니다. NRC 윤리위원회의 승인은 등록 번호 15131로 획득되었습니다. 참가자는 연구에 포함되기 전에 서면 동의서에 서명했습니다.

1.1 인구 통계, 병력 및인지 기능에 대한 데이터를 수집하기 위해 모든 참가자와 대면 인터뷰를 수행했습니다. 데이터에는 연령, 성별, 교육 수준 및 흡연이 포함되었습니다. 당뇨병 진단 연령, 저혈당 발작 빈도, 치료 유형(인슐린 또는 경구용 혈당 강하제), 고혈압, 이상지질혈증 또는 기타 질병 및 복용 약물을 포함하여 환자로부터 당뇨병의 자세한 병력을 수집했습니다. 따끔 거림, 작열통 또는 손과 발의 무감각과 같은 감각 말초 신경 병증의 존재를 암시하는 모든 불만이 기록되었습니다. 모든 연구 참가자는 철저한 임상 검사, 수축기 및 이완기 혈압 및 인체 측정 평가(체중 및 신장 측정)를 받았습니다.

1.2 영역별 인지 기능 평가는 주의력, 기억력, 언어 유창성, 언어 및 시공간 능력의 5가지 인지 영역을 평가하는 Adenbrooke의 인지 검사 III(ACE III) 테스트를 사용하여 수행되었습니다. 가장 신뢰할 수 있고 검증된 아랍어 양식인지 척도이며 자유롭게 적용할 수 있습니다. ACE III 점수가 88 미만인 경우 객관적 경도 인지 장애(MCI)로 간주되었습니다. 트레일 메이킹 테스트(TMT)도 사용되었습니다. TMT는 인지 처리 및 집행 기능의 속도 지표로서 신경심리학적 평가에서 가장 널리 사용되는 도구 중 하나입니다. 연속적으로 번호가 매겨지고 문자가 있는 일련의 원을 연결하는 데 필요한 시간을 측정하여 주의력, 집중력, 정신 운동 속도, 인지 전환 및 복잡한 순서 지정 기능을 평가합니다. 테스트는 두 부분(A와 B)으로 구성됩니다. 각 부분의 직접 점수는 작업 완료 시간으로 표시됩니다. 짧은 시간은 더 나은인지 기능을 나타냅니다.

1.3 HRSD(Hamilton Rating Scale for Depression)를 사용하였으며, 우울증의 중증도를 객관적으로 평가하는 가장 널리 사용되는 척도 중 하나이다. 이 척도는 17개 항목으로 구성되어 있으며 각 항목은 3점 또는 5점 척도로 점수가 매겨지며 최종 점수는 환자의 우울증 정도를 나타냅니다. 우울 정도의 분류는 영국 국립보건임상연구소(National Institute for Health & Clinical Excellence of the United Kingdom, UK)에 따라 분류하였다(0-7 = 정상, 8-13 = 경도 우울증, 14-18 = 중등도 우울증, 19-22 = 심한 우울증 및 ≥ 23 = 매우 심한 우울증).

1.4 건강 관련 삶의 질(HRQOL) 평가는 Short Form-36(SF-36) 설문지를 사용하여 수행되었습니다. 건강상태는 신체기능(PF), 역할신체기능(RP), 신체통증(BP), 전반적인 건강인식(GH), 활력(VT), 사회기능(SF), 역할정서 (RE) 및 정신 건강 (MH). 각 영역의 점수는 0에서 100까지이며 '100'이 건강의 최고 등급입니다. 설문지의 아랍어 버전이 사용되었습니다.

1.5 T2DM 환자의 라이프 스타일 평가. 환자들은 영양 습관, 신체적, 사회적 및 정신적 활동에 관한 라이프 스타일을 평가하고 라이프 스타일을 바꾸도록 동기를 부여하는 가장 좋은 방법에 대한 의견을 평가하기 위해 설계된 설문지를 받았습니다.

1.6 기본 실험실 분석. 연구 시작 시 최소 10시간 동안 금식한 후 각 참가자로부터 완전한 무균 기술로 5ml의 혈액 샘플을 채취했습니다. 건조 일반 및 라벤더 에틸렌 디아민 테트라 아세트산(EDTA) 진공 테이너 튜브로 구분되었습니다. Olympus-au-400 화학 자동 분석기를 사용하여 당화혈색소(HbA1c) 및 총 혈중 콜레스테롤 수치를 평가했습니다. 혈청 내 Malondialdehyde(MDA) 농도는 경쟁적 결합 효소 면역분석 기술에 기반한 ELISA 키트를 사용하여 결정되었습니다. 적혈구는 catalase, glutathione peroxidase (GPx) 및 glutathione reductase (GR)의 효소적 항산화 활성에 대해 조사되었습니다.

1.7 miRNA 발현 분석: 혈액을 특수 RNA 보존 튜브에 넣었습니다. 8~10회 뒤집은 후 추가 RNA 추출을 위해 -80°C에서 냉동 보관했습니다. RNA 분리 및 RNA 품질 평가는 miRNA 발현의 특성화를 시작하기 전에 사용되었습니다. 1-10 나노그램의 정제된 전체 RNA 또는 이와 동등한 것만으로도 관심 있는 miRNA를 안정적으로 정량화하기에 충분했습니다. 이 연구에서 선택된 miRNA의 농도는 제조업체의 지침에 따라 혈장 샘플에서 단일 표적 TaqMan miRNA 정량적 실시간(qRT) 중합효소 연쇄 반응(PCR) 분석(Applied Biosystems)에 의해 결정되었습니다. miRNA 특이적 프라이머를 사용한 역전사만 필요로 하는 2단계 프로토콜을 적용한 다음 TaqMan 프로브를 사용한 실시간 PCR을 수행했습니다. TaqMan MicroRNA 어세이는 표적 특이적 스템 루프 구조 역전사 프라이머입니다. 스템-루프는 1) 성숙한 miRNA 표적에 대한 특이성 및 2) 역전사효소(RT) 프라이머/성숙한 miRNA-키메라의 형성, miRNA의 5' 말단을 확장하는 두 가지 목표를 달성합니다. RNA 샘플, 루프 프라이머, 1 X 버퍼, 역전사효소 및 RNase 억제제를 포함하는 RT 반응은 16°C 및 42°C에서 각각 30분 동안 배양됩니다. 결과적으로 더 긴 RT amplicon은 TaqMan 분석을 사용하여 표준 실시간 PCR에 적합한 템플릿을 제공합니다. 그런 다음 Quant Studio 12 K Flex Real-Time PCR Instrument에서 Real-time PCR을 수행했습니다.

두 번째 단계(중재 연구): 이 단계는 건강 교육 및 생활 방식 수정을 위한 중재 연구였습니다. T2DM 환자의 생활습관 교정 프로그램 시행을 위해 진행되었습니다.

2.1 건강 교육 소책자 2권 디자인 T2DM 참가자의 요구 사항을 파악한 후 연구팀은 건강 교육 소책자 2권을 디자인했습니다. "Diabetes mellitus and how to control its 합병증"이라는 제목의 첫 번째 소책자. 소책자에는 T2DM 질병에 대한 정보와 이것이 진성 당뇨병(DM) 합병증을 유발하는 다양한 신체 시스템에 미치는 영향이 포함되어 있습니다. 또한 공복 혈당 및 당화혈색소(HbA1c)의 정상 및 비정상 수준에 대한 정보도 포함합니다. DM 합병증을 통제하고 예방하는 방법, 건강한 영양 및 탄수화물 계산, 신체 활동, 엄격한 의료 요법 준수 및 스트레스 방지를 강조합니다. "경증 인지 장애 및 예방 방법"이라는 제목의 두 번째 소책자에는 인지 기능, MCI 및 알츠하이머의 정의, T2DM과 인지 장애의 위험 요인 및 인지 기능을 제어하고 개선하는 방법에 대한 정보가 포함되어 있습니다.

2.2 환자 교육 프로그램 시행: 144명의 참가자만이 건강 교육(HE) 세션에 참석하라는 초대를 수락했습니다. 실제 참석한 인원은 121명에 불과했다. 참여하지 않는 이유는 다음과 같습니다. 관심 부족 및 라이프 스타일 프로그램에 대한 헌신을 거부했습니다.

2.2.1 라이프 스타일 수정을 장려하기 위한 대면 및 그룹 토론 HE 세션: 모든 연구 대상 환자를 HE 세션에 초대했습니다. 2개의 디자인된 소책자를 설명하는 거의 2개월 동안 NRC에서 7번의 세션이 열렸습니다. HE 강의는 공중보건팀과 당뇨병 전문가가 그룹 토론에 참여하여 T2DM 관리와 관련된 질문에 대해 설명하고 답변했습니다. HE 프로그램은 DM 제어, 뇌 건강에 중요한 음식에 대한 정보 및 인지력 향상을 위한 다양한 지적 게임을 제공했습니다.

2.2.2 교육 자료 배포 준비된 소책자는 모든 참석자에게 배포되었습니다. 참가자들은 T2DM 및 MCI에 대한 과학적 정보를 개선하는 데 이 두 소책자의 중요성에 대해 알렸습니다.

2.2.3 실험실 분석의 재평가. 보건 교육 시 최소 10시간 동안 금식한 후 각 참여자로부터 완전한 무균 기술로 3ml의 혈액 샘플을 채취했습니다. 중재 직전에 FBG, HbA1c 및 총 혈중 콜레스테롤을 평가하는 것을 목표로 했으며, 중재 기간 동안 3개월 동안 재평가하여 생활 방식 수정으로 인해 달성한 진행 상황을 모니터링함으로써 환자에게 인센티브를 제공했습니다. 각 참가자는 연구 팀으로부터 개인적으로 자신의 실험실 결과를 받도록 요청받았습니다. 이를 통해 그의 결과 해석에 대해 논의할 수 있었고 따라서 라이프 스타일 수정 프로그램에 대한 그의 준수를 유지하기 위해 필요한 조언을 다시 격려하거나 제공할 수 있었습니다.

2.2.4 임상적 추적 및 관리는 실험실 결과 및 환자 순응도에 따라 내분비내과 및 신경과 전문의에 의해 수행되었다.

2.2.5 개별 의료 영양 프로그램: 각 참가자는 3일 음식 일기를 작성하도록 요청받았습니다. 식습관을 바꾸도록 조언하고 설득하기 위해 대면 인터뷰를 통해 각 참가자와 개별적으로 논의했습니다. 모든 환자는 실험실 분석 결과와 탄수화물 수치에 따라 식단을 조절하는 방법을 배웠습니다.

2.2.6 개별화된 격주 후속 조치 계획은 또한 달성된 진행 상황을 자가 모니터링할 수 있도록 변경해야 하는 목표로 하는 건강한 행동에 대한 지침으로 배포되었습니다. 6개월 동안 참가자들은 디자인된 시트를 사용하여 휴대폰을 통해 생활 습관 수정 프로그램에 대한 환자의 순응도 및 순응도를 평가했습니다.

2.2.7 WhatsApp 전화 신청 그룹: 참가자는 라이프 스타일이나 치료 수정에 관한 질문이 있을 때마다 연구팀에 연락할 수 있었습니다. 이 그룹을 통해 12개의 오디오 메시지가 녹음 및 배포되었습니다. 이 메시지는 소책자의 내용을 요약하여 환자가 보건 교육을 따를 수 있도록 쉽게 접근할 수 있는 방법입니다. 건강한 습관을 위한 팁과 정신 활동을 위한 운동도 이 그룹에 업로드되었습니다.

2.3.8 임상 상태 및 실험실 프로파일의 최종 재평가. 모집 6개월 후, 연구가 끝날 때까지 계속된 98명의 참가자들과 대면 인터뷰가 진행되었습니다. 그들은 프로그램 준수 여부를 평가하기 위한 최종 시트를 작성했습니다. ACE III 테스트와 TMT(두 파트 A 및 B 테스트)는 생활 습관 수정 프로그램이 인지 기능에 미치는 영향을 평가하기 위해 임상, 체중 및 혈압 재평가로 재평가되었습니다. SF-36 및 HRDS 설문지를 사용하여 삶의 질과 우울증을 재평가했습니다. HbA1c 수준, 지질 프로파일, 산화제 및 항산화제에 대한 실험실 분석은 개입 후 재평가되었습니다.