Ocena poklatkowa rozwoju zarodka ludzkiego w pojedynczych i sekwencyjnych pożywkach hodowlanych - badanie oocytów rodzeństwa

Utrzymanie optymalnego rozwoju zarodka podczas hodowli in vitro jest kluczowym elementem zabiegów wspomaganego rozrodu. To, czy koncepcja naśladowania środowiska in vivo jest „koniecznością”, aby nie zagrozić wynikowi, jest przedmiotem debaty, ponieważ w kilku Podejście „pozwól zarodkowi wybrać” wykorzystuje środowisko o względnie stałym stężeniu składników (system pojedynczej kultury) w porównaniu z drugim, w którym wymagania zarodków są wspierane zgodnie z ich przejściem z jajowodów do macicy w sekwencyjne pożywki hodowlane. Podstawowe różnice między tymi składnikami to; obecność (1) glukozy zamiast pirogronianu i (2) niezbędnych aminokwasów we wczesnych stadiach embrionalnych (do dnia 3) w pożywkach jednoetapowych oraz (3) obecność EDTA w pożywkach sekwencyjnych.

Zdecydowaną większość tych wyników uzyskano z badań, w których pacjentów przydzielono losowo do grup zamiast stosowania modelu rodzeństwa (oocyt/zarodek), co umożliwiłoby każdemu pacjentowi służyć jako jego własna kontrola. W rzeczywistości twierdzono, że wprowadzenie projektu badania oocytów rodzeństwa może stwarzać problem metodologiczny w czasie zapłodnienia, ponieważ różne rodzaje pożywek hodowlanych różnią się osmolarnością. Podobnie jedyne badanie, w którym zastosowano model oocytu rodzeństwa, wykorzystywało dwie różne pożywki (domowej roboty kontra G1.2/G1.2), chociaż osmolarność tej pierwszej została dostosowana do 280-285 mOsm). W badaniu tym nie stwierdzono znaczących różnic w rozwoju zarodka w dniu 3/5, a także w wskaźnikach ciąż/implantacji między grupami.

Jednak późniejsze badania faworyzowały pożywki jednoetapowe, ponieważ wykazały wyższy odsetek zagęszczonych zarodków do zygot w dniu 3, morulę w dniu 4, wyższą wydajność blastocyst, ogólnie wyższy wskaźnik wykorzystania po dniu 5 i lepszy wskaźnik implantacji w porównaniu z pożywkami sekwencyjnymi. Jednak oprócz potencjalnej zmienności jakości gamet między pacjentami przydzielonymi do grup (jak opisano powyżej), różnice w statycznych czasach obserwacji zarodków między laboratoriami mogły wpłynąć na wyniki tych badań. Obecne wprowadzenie sprzętu poklatkowego do technologii wspomaganego rozrodu człowieka umożliwiło bardziej wyraźne zdefiniowanie rozwoju zarodka i obecnie możliwe jest ilościowe określenie tempa podziału zarodka w różnych mediach. Taka definicja jest również przydatna do określenia wartości predykcyjnej rozwoju zarodka w określonych punktach czasowych, będzie miała zastosowanie we wszystkich laboratoriach embriologicznych stosujących różne systemy hodowli.