Czy preimplantacyjna diagnostyka genetyczna pod kątem wyboru płci wpływa na wskaźniki ciąż i poronień u kobiet z oczekiwaną dobrą odpowiedzią jajników poddawanych cyklom IVF/ICSI?

Rejestry kobiet, które przeszły PGD w ciągu ostatnich 3 lat, zostaną poddane przeglądowi, a ich wyniki zostaną porównane z innymi zapisami kobiet, które przeszły IVF/ICSI bez PGD Przed rozpoczęciem procesu PGD pary były oglądane przez genetyka w celu oceny wykonalności procedury dla każdej pary. Pary były następnie konsultowane przez ginekologa specjalizującego się w zapłodnieniu in vitro, aby ocenić ich stan płodności i wyjaśnić całą procedurę, w tym oczekiwane wskaźniki powodzenia i ryzyko zapłodnienia in vitro.

Kobiety miały standardową regulację w dół przysadki za pomocą GnRHa (Triptorelina 0,1 mg, Decapeptyl® Ferring, Niemcy) 7 dnia po owulacji poprzedniego cyklu lub w 21 dniu cykli doustnych środków antykoncepcyjnych. GnRHa kontynuowano przez 2 tygodnie. Ludzką gonadotropinę menopauzalną (HMG) (Merional ®IBSA) 150-300 IU/dobę podawano do dnia podania HCG, przezpochwowe pobranie oocytów nastąpi 34-36 h po podaniu HCG.

Po zapłodnieniu pobrano biopsję z zarodków w fazie rozszczepiania. Analiza FISH została wykorzystana do rozróżnienia zarodków ze zrównoważonymi i niezrównoważonymi nieprawidłowościami chromosomalnymi dla nosicieli strukturalnych aberracji chromosomowych. W analizie translokacji należy zaprojektować i zwalidować unikalne sondy FISH, które flankują punkty przerwania każdej translokacji lub które wymagają użycia sond subtelomerowych (specyficznych dla końców chromosomów translokowanych segmentów) dla każdej osoby dotkniętej chorobą w celu wykrycia normalnych i zrównoważonych produktów w tkance embrionalnej.

Zasada PGD przez FISH polega na tym, że sondy DNA znakowane różnymi fluorochromami lub haptenami mogą być użyte do wykrywania liczby kopii określonych loci, a tym samym do wykrywania nierównowagi chromosomowej związanej z mejotyczną segregacją rearanżacji chromosomów, która obejmuje translokacje robertsonowskie, wzajemne translokacje, inwersje i złożone rearanżacje. FISH można również wykorzystać do selekcji zarodków żeńskich w rodzinach z chorobą sprzężoną z chromosomem X. Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) została wykorzystana do diagnozowania zaburzeń monogenowych. PCR stosuje się do amplifikacji wystarczającej ilości DNA z komórek embrionalnych. Blastomer umieszcza się w roztworze, który powoduje lizę komórki i uwalnia DNA, a następnie dodaje się mieszaninę reakcyjną PCR, aby rozpocząć reakcję PCR. Ze względu na wysoką czułość zanieczyszczenie badanej próbki obcym DNA jest niebezpieczne i doprowadziło do przyjęcia rygorystycznych procedur i standardów laboratoryjnych, takich jak stosowanie wewnątrzcytoplazmatycznej iniekcji plemnika.

Wyniki analizy PGD były dostępne w 5. dniu po pobraniu oocytów. Jeśli to możliwe, przenoszono 2 nienaruszone zarodki, a pozostałe zarodki nienaruszone poddawano kriokonserwacji.

Kobiety obserwowano i wykonywano test ciążowy w celu wykrycia ciąży, kobiety w ciąży obserwowano i rejestrowano wszelkie komplikacje związane z ciążą