La diagnosi genetica preimpianto per la selezione del sesso influisce sui tassi di gravidanza e aborto spontaneo nelle donne con una buona risposta ovarica attesa che si sottopongono a cicli di fecondazione in vitro/ICSI?

I registri delle donne che hanno avuto PGD negli ultimi 3 anni saranno rivisti e il suo risultato sarà confrontato con altri record di donne che hanno avuto IVF/ICSI senza PGD Prima di iniziare il processo PGD le coppie sono state visitate da un genetista per valutare la fattibilità della procedura per ogni coppia. Le coppie sono state quindi consigliate da un ginecologo specializzato in fecondazione in vitro per valutare il loro stato di fertilità e spiegare l'intera procedura, compresi i tassi di successo previsti e i rischi della fecondazione in vitro.

Le donne avevano una down-regolazione ipofisaria standard con GnRHa (Triptorelin 0,1 mg, Decapeptyl® Ferring, Germania) il giorno 7 dopo l'ovulazione del ciclo precedente o il giorno 21 dei cicli contraccettivi orali. GnRHa è stato continuato per 2 settimane. La gonadotropina umana della menopausa (HMG) (Merional ®IBSA) 150-300 UI/giorno è stata somministrata fino al giorno della somministrazione di HCG, il prelievo transvaginale degli ovociti sarà eseguito 34-36 ore dopo la somministrazione di HCG.

Dopo la fecondazione, la biopsia è stata ottenuta dagli embrioni in fase di scissione. L'analisi FISH è stata utilizzata per distinguere gli embrioni con anomalie cromosomiche equilibrate e sbilanciate per i portatori di aberrazioni cromosomiche strutturali. Nell'analisi delle traslocazioni, devono essere progettate e validate sonde FISH univoche che affiancano i breakpoint di ogni traslocazione o che richiedono l'uso di sonde subtelomeriche (specifiche per le estremità cromosomiche dei segmenti traslocati) per ogni individuo affetto per rilevare prodotti normali e bilanciati nel tessuto embrionale.

Il principio della PGD di FISH è che le sonde di DNA specifiche del bersaglio etichettate con diversi fluorocromi o apteni possono essere utilizzate per rilevare il numero di copie di loci specifici e quindi per rilevare lo squilibrio cromosomico associato alla segregazione meiotica dei riarrangiamenti cromosomici che include le traslocazioni Robertsoniane, traslocazioni reciproche, inversioni e riarrangiamenti complessi. La FISH può anche essere utilizzata per selezionare embrioni femminili in famiglie con malattia legata all'X La reazione a catena della polimerasi (PCR) è stata utilizzata per diagnosticare malattie monogeniche. La PCR viene utilizzata per amplificare una quantità sufficiente di DNA dalle cellule embrionali. Un blastomero viene posto in una soluzione che lisa la cellula e rilascia il DNA e viene quindi aggiunta la miscela di reazione PCR per iniziare la PCR. A causa della sua elevata sensibilità, la contaminazione del campione in studio con DNA estraneo è un pericolo e ha portato all'adozione di rigorose procedure e standard di laboratorio, come l'uso dell'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi.

I risultati dell'analisi PGD erano disponibili il giorno 5 dopo il prelievo degli ovociti. Se possibile, sono stati trasferiti 2 embrioni sani e il resto degli embrioni sani è stato criopreservato.

Le donne sono state seguite ed è stato eseguito un test di gravidanza per rilevare la gravidanza, le donne in gravidanza sono state seguite e sono state registrate eventuali complicanze della gravidanza