O diagnóstico genético pré-implantação para seleção do sexo afeta as taxas de gravidez e aborto espontâneo em mulheres com uma boa resposta ovariana esperada submetidas a ciclos de fertilização in vitro/ICSI?

Os registros de mulheres que tiveram PGD nos últimos 3 anos serão revisados ​​e seus resultados serão comparados com outros registros de mulheres que tiveram FIV/ICSI sem PGD Antes de iniciar o processo de PGD, os casais foram vistos por um geneticista para avaliar a viabilidade do procedimento para cada casal. Os casais foram então aconselhados por um ginecologista especializado em fertilização in vitro para avaliar seu estado de fertilidade e explicar todo o procedimento, incluindo as taxas de sucesso esperadas e os riscos da fertilização in vitro.

As mulheres tiveram regulação negativa padrão da hipófise com GnRHa (triptorelina 0,1 mg, Decapeptyl® Ferring, Alemanha) dia 7 após a ovulação do ciclo anterior ou no dia 21 dos ciclos de contraceptivos orais. GnRHa foi continuado por 2 semanas. Gonadotrofina menopáusica humana (HMG) (Merional ®IBSA) 150-300 UI/dia foi administrada até o dia da administração de HCG. A coleta transvaginal de oócitos será realizada 34-36 h após a administração de HCG.

Após a fertilização, a biópsia foi obtida a partir de embriões em estágio de clivagem. A análise de FISH foi usada para distinguir embriões com anormalidades cromossômicas balanceadas e desbalanceadas de portadores de aberrações cromossômicas estruturais. Na análise de translocações, sondas FISH únicas que flanqueiam os pontos de quebra de cada translocação ou que requerem o uso de sondas subteloméricas (específicas para as extremidades cromossômicas dos segmentos translocados) para cada indivíduo afetado devem ser projetadas e validadas para detectar produtos normais e balanceados em tecido embrionário.

O princípio do PGD por FISH é que as sondas de DNA específicas do alvo marcadas com diferentes fluorocromos ou haptenos podem ser usadas para detectar o número de cópias de loci específicos e, assim, detectar o desequilíbrio cromossômico associado à segregação meiótica de rearranjos cromossômicos que incluem as translocações Robertsonianas, translocações recíprocas, inversões e rearranjos complexos. FISH também pode ser usado para selecionar embriões femininos em famílias com doença ligada ao cromossomo X. A reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido usada para diagnosticar doenças monogênicas. A PCR é usada para amplificar DNA suficiente de células embrionárias. Um blastômero é colocado em uma solução que lisa a célula e libera o DNA e a mistura de reação de PCR é então adicionada para iniciar a PCR. Devido à sua alta sensibilidade, a contaminação da amostra do estudo com DNA estranho é um perigo e levou à adoção de procedimentos e padrões laboratoriais rigorosos, como o uso de injeção intracitoplasmática de espermatozoides.

Os resultados da análise PGD estavam disponíveis no dia 5 após a recuperação do oócito. Se possível, 2 embriões não afetados foram transferidos e os demais embriões não afetados foram criopreservados.

As mulheres foram acompanhadas e foi feito um teste de gravidez para detectar a gravidez, as mulheres grávidas foram acompanhadas e todas as complicações da gravidez foram registradas