Wykrywanie MRD za pomocą NGS w pediatrycznej B-ALL

Projekt badania, pacjenci i procedury Było to prospektywne, jednoośrodkowe badanie obserwacyjne przeprowadzone u dzieci z ALL w okresie od listopada 2018 r. do czerwca 2022 r. Do badania włączono dzieci z nowo zdiagnozowaną B-ALL, które przeszły NGS receptorów komórek B w Szpitalu Dziecięcym Szkoły Medycznej Uniwersytetu Zhejiang.

Kryteria Europejskiej Grupy ds. Immunologicznej Charakterystyki Białaczek (EGIL) zostały zastosowane do zdiagnozowania i sklasyfikowania ALL w tym badaniu. Wszyscy włączeni pacjenci byli leczeni zgodnie z protokołem ZJCH-ALL-2019 wyszczególnionym w pliku uzupełniającym. Protokół ten został wdrożony w naszym ośrodku we wrześniu 2018 r., a następnie rozszerzony na całą prowincję Zhejiang w 2019 r. W tym protokole NGS-MRD nie był używany do stratyfikacji ryzyka pacjenta ani przydziału leczenia. W celu wykrycia MRD aspirację szpiku kostnego (BM) pod kątem Ig NGS zebrano w chwili rozpoznania, na końcu indukcji (EOI) w 5. tygodniu od początkowej fazy prednizonu i na końcu konsolidacji (EOC) w 13. miało miejsce przed rozpoczęciem wczesnej intensyfikacji u pacjentów z grupy niskiego i średniego ryzyka oraz przed rozpoczęciem drugiego kursu konsolidacji u pacjentów z grup wysokiego ryzyka. NGS-MRD monitorowano sekwencyjnie co 2 do 3 miesięcy po konsolidacji, aż stało się niewykrywalne. W tym badaniu NGS-MRD odnosi się do ilościowej wartości MRD wykrytej w badaniu NGS, która była sumą poziomów IGH i łańcucha lekkiego (IGK/IGL). Wykrywanie NGS w innych punktach czasowych, takich jak okres indukcji i punkty czasowe po tym, jak wynik NGS-MRD był ujemny, nie było obowiązkowe, ale monitorowano je zgodnie z preferencjami rodziców. Pacjentów obserwowano do 30 sierpnia 2022 r., a mediana czasu obserwacji wyniosła 20,7 miesiąca.

Analiza statystyczna Związek między zmiennymi kategorialnymi testowano za pomocą testu χ2, korelację między zmiennymi ilościowymi mierzono za pomocą korelacji Pearsona i testowano za pomocą rozkładu t-Studenta, a do porównywania zmiennych ilościowych zastosowano ANOVA. Krzywe przeżycia wolnego od zdarzeń (EFS) i przeżycia całkowitego (OS) oszacowano metodą Kaplana-Meiera i porównano zgodnie z testem log-rank. Śmierć podczas indukcji, porzucenie przed całkowitą remisją, śmierć w ciągłej całkowitej remisji, nawrót i wtórne nowotwory złośliwe zostały uwzględnione jako zdarzenia w obliczaniu prawdopodobieństwa EFS. Czas EFS liczono od daty rozpoznania do ostatniej daty obserwacji lub pierwszego zdarzenia. OS obliczono od daty rozpoznania do zgonu z dowolnej przyczyny z cenzurowaniem pacjentów żyjących w momencie analizy danych. Ostatecznym terminem obserwacji był 30 sierpnia 2022 r. Wizualizacja danych została wykonana przy użyciu pakietu R ggplot2 (wersja 4.0.3) oraz GraphPad Prism 9.0.0. Analizę statystyczną przeprowadzono na R (wersja 4.0.3). Wartość P <0,05 (dwustronna) uznano za istotną statystycznie.