Rilevazione MRD da NGS in B-ALL pediatrica

Disegno dello studio, pazienti e procedure Si trattava di uno studio osservazionale prospettico, monocentrico, condotto su bambini con LLA tra novembre 2018 e giugno 2022. In questo studio sono stati inclusi bambini con B-ALL di nuova diagnosi sottoposti a NGS dei recettori delle cellule B presso l'ospedale pediatrico della Zhejiang University School of Medicine.

I criteri del gruppo europeo per la caratterizzazione immunologica delle leucemie (EGIL) sono stati applicati per diagnosticare e classificare la LAL in questo studio. Tutti i pazienti arruolati sono stati trattati secondo il protocollo ZJCH-ALL-2019 dettagliato nel file supplementare. Questo protocollo è stato implementato nel nostro centro a settembre 2018 e successivamente esteso a tutta la provincia di Zhejiang nel 2019. In questo protocollo, NGS-MRD non è stato utilizzato per la stratificazione del rischio del paziente o l'allocazione del trattamento. Per il rilevamento di MRD, l'aspirazione del midollo osseo (BM) per Ig NGS è stata raccolta alla diagnosi, alla fine dell'induzione (EOI) alla 5a settimana dalla prefase iniziale del prednisone e alla fine del consolidamento (EOC) alla 13a settimana che era prima dell'inizio dell'intensificazione precoce per i pazienti a rischio basso e intermedio ed era prima dell'inizio del secondo ciclo di consolidamento per i pazienti ad alto rischio. NGS-MRD è stato monitorato in sequenza ogni 2 o 3 mesi dopo il consolidamento fino a quando non è stato rilevabile. In questo studio, NGS-MRD si riferisce al valore quantitativo di MRD rilevato attraverso il test NGS che era la somma dei livelli di IGH e di catene leggere (IGK/IGL). Il rilevamento di NGS durante altri punti temporali, come l'intervallo di induzione e i punti temporali dopo che NGS-MRD era negativo, non era obbligatorio ma monitorato secondo le preferenze dei genitori. I pazienti sono stati seguiti fino al 30 agosto 2022 e il tempo medio di follow-up è stato di 20,7 mesi.

Analisi statistica L'associazione tra variabili categoriche è stata testata utilizzando il test χ2, la correlazione tra variabili quantitative è stata misurata utilizzando la correlazione di Pearson e testata utilizzando la distribuzione t di Student e ANOVA è stata utilizzata per confrontare le variabili quantitative. Le curve di sopravvivenza libera da eventi (EFS) e di sopravvivenza globale (OS) sono state stimate utilizzando il metodo Kaplan-Meier e confrontate secondo il log rank test. La morte durante l'induzione, l'abbandono prima della remissione completa, la morte in remissione completa continua, la recidiva e le neoplasie secondarie sono state considerate come eventi nel calcolo della probabilità di EFS. Il tempo EFS è stato calcolato dalla data della diagnosi all'ultima data del follow-up o al primo evento. L'OS è stato calcolato dalla data di diagnosi alla morte per qualsiasi causa con la censura dei pazienti vivi al momento dell'analisi dei dati. La data finale per il follow-up era il 30 agosto 2022. La visualizzazione dei dati è stata eseguita utilizzando il pacchetto R ggplot2 (versione 4.0.3) e GraphPad Prism 9.0.0. L'analisi statistica è stata eseguita su R (versione 4.0.3). Un valore P <0,05 (2 code) è stato considerato statisticamente significativo.