Zmiany w poziomach asprozyny, IL-39, IL-40 i IL-1β w ślinie u pacjentów z cukrzycą i zapaleniem przyzębia

Planowane jest przeprowadzenie badania wśród 176 osób z chorobami przyzębia i bez chorób przyzębia w wieku od 18 do 80 lat, które zgłaszają się na leczenie do Katedry Periodontologii Wydziału Stomatologii Uniwersytetu Necmettin Erbakan. Osoby, które podpiszą „formularz świadomej zgody”, zostaną uwzględnione w badaniu.

Podczas badania periodontologicznego każdego pacjenta zgłaszającego się do poradni periodontologicznej przeprowadza się rutynową ocenę radiologiczną i kliniczną oraz rutynową dokumentację stanu przyzębia (głębokość kieszonek przyzębnych zębów, ubytki przyczepu, stopień ruchomości, stopień ubytku furkacji, wskaźnik krwawienia przy sondowaniu, wskaźnik dziąseł, wskaźnik płytki nazębnej, ilość dziąseł zrogowaciałych, recesje dziąseł, wskaźnik ciała/masy) są pobierane i archiwizowane przed rozpoczęciem leczenia pacjentów oraz po każdym planowanym leczeniu. Ponadto rejestrowane są dane socjodemograficzne i nawyki dotyczące szczotkowania każdego pacjenta, który weźmie udział w badaniu. Przed leczeniem od pacjentów będą także pobierane próbki śliny. Osoby zostaną podzielone na grupy w zależności od ich stanu chorobowego przyzębia:

• 44 osoby zdrowe przyzębia i zdrowe układowo
• 44 osoby zdrowe przyzębie i chore na cukrzycę typu 2
• 44 zapalenie przyzębia, osoby ogólnie zdrowe
• 44 zapalenie przyzębia, osoby z cukrzycą typu 2

Kalibrowany specjalista klinicysta określi stan przyzębia zgodnie z kryteriami Światowych warsztatów dotyczących klasyfikacji chorób i schorzeń przyzębia i okolic implantów w 2017 r., w oparciu o badanie radiograficzne i kliniczne. Aby zostać zakwalifikowani do grup chorób przyzębia, pacjenci będą musieli spełniać kryteria uogólnionego zapalenia przyzębia w stadium II i III.

Próbki śliny zostaną pobrane przed wykonaniem pomiarów przyzębia, aby zapobiec krwawieniu śliny podczas sondowania. Uczestnicy zostaną poproszeni o niemycie zębów co najmniej na godzinę przed pobraniem próbki oraz o unikanie jedzenia, słodzonej gumy, produktów kosmetycznych takich jak szminka i wszelkich leków, które nie będą miały wpływu na pomiary hormonów śliny. Od każdego pacjenta zostanie pobranych łącznie 5 próbek o pojemności 2 ml, po jednej na każdy marker, w godzinach od 9:00 do 10:00 rano. Próbki zostaną pobrane do plastikowych probówek ze szklanym lejkiem w ciągu pięciu minut po przepłukaniu ust wodą przez każdego uczestnika. Następnie probówki zamyka się korkami, a próbki odwirowuje się przy 1000 obr/min przez 10 minut w celu usunięcia elementów komórkowych i płytki nazębnej. Ciecz supernatantu zostanie odpipetowana bez dotykania osadu utworzonego na dnie probówek, umieszczona w polipropylenowych probówkach Eppendorfa i przechowywana w temperaturze -20°C do czasu analizy.

Analiza próbek śliny Próbki zostaną umieszczone w temperaturze +4°C w celu rozmrożenia w dniu analizy. Zestawy ELISA zostaną użyte do określenia poziomów asprozyny, IL-39, IL-40, IL-38 i IL-1B zgodnie z instrukcjami producenta (Elabscience Biotechnology Co. Ltd).

Analiza statystyczna Analiza statystyczna zostanie przeprowadzona przy użyciu pakietu statystycznego dla nauk społecznych (SPSS) wersja 23 (IBM Corp., Armonk, NY).

Dane zostaną wyrażone jako średnia i odchylenie standardowe. Normalność danych zostanie oceniona za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Różnice między średnimi parametrów w porównaniach wewnątrzgrupowych grup zdrowych przyzębia i grup z zapaleniem przyzębia zostaną ocenione za pomocą jednoczynnikowego testu ANOVA (post-hoc Bonferroniego). Różnice pomiędzy średnimi parametrami pomiędzy grupami osób zdrowych przyzębia i grupami z zapaleniem przyzębia zostaną ocenione za pomocą niezależnego testu t. Do oceny korelacji pomiędzy parametrami klinicznymi i biochemicznymi zostaną wykorzystane współczynniki korelacji Pearsona. Obszary pod krzywą (AUC) i krzywe charakterystyki operacyjnej odbiornika (ROC) zostaną wykorzystane do zbadania czułości i swoistości biomarkerów śliny w odróżnianiu zapalenia przyzębia od zdrowia przyzębia. p<0,05 będzie uważane za istotne statystycznie.