Curcumina na expressão do gene NFE2L2, capacidade antioxidante e função renal de acordo com rs35652124 na nefropatia diabética (CURCUNRF2)

Objetivo: Avaliar a interação entre o polimorfismo rs35652124 e a suplementação de curcumina nos níveis de expressão do gene NFE2L2, capacidade antioxidante e função renal em pacientes com nefropatia diabética precoce (EDN).

Assuntos e métodos. Ensaio clínico paralelo com randomizado e triplo cego. A partir de um banco de dados de pacientes diabéticos recém-diagnosticados com DRC, aqueles com EDN serão identificados e localizados por telefone para completar um total de 275 indivíduos com mais de 18 anos de idade. Posteriormente, serão citados na secretaria da Unidade Biomédica 02, verificarão se atendem aos critérios de seleção, serão informados sobre os objetivos do estudo e convidados a participar. Aqueles que concordarem em participar receberão uma carta de consentimento informado, serão solicitados a lê-la com atenção e caso tenham dúvidas, as mesmas serão esclarecidas no momento. Uma vez assinado o consentimento por escrito, eles serão citados para a primeira coleta de amostra de sangue (5 mL) a ser usada para extração de DNA genômico e genotipagem para o polimorfismo rs35652124. Todos os pacientes que entrarem no estudo serão submetidos a um exame físico e dietético e registrarão os dados em um cartão de registro clínico. Eles receberão um plano de refeições de acordo com as recomendações da ADA e as diretrizes do K/DOQI duas semanas antes (semana <2) no início do ensaio clínico, que será mantido durante todo o acompanhamento. Em seguida, serão agendados mensalmente para avaliação médica e nutricional. Nas visitas das semanas 2, 0 (início da suplementação), 12 e 24 serão colhidos três tubos de sangue periférico (5 mL cada). A primeira, para extrair mRNA total e análise da expressão do gene NFE2L2, a segunda, para determinar os níveis de NRF2, SOD, GPx e HO1 e a terceira, para realizar testes de função renal e controle de possíveis variáveis ​​de confusão (creatinina, glicose, hemoglobina glicosilada, perfil lipídico e ácido úrico). Além disso, eles serão solicitados a coletar uma amostra da primeira urina da manhã para quantificar a albuminúria/creatinúria no mesmo dia em que as amostras de sangue foram coletadas. O tempo de estudo desde a primeira avaliação é de 26 semanas e o total de consultas médicas e nutricionais será de seis, uma mensal. A genotipagem será realizada pela reação em cadeia da polimerase (PCR) acoplada a quatro pares de oligonucleotídeos primers específicos para os alelos de interesse. O ensaio de expressão gênica será realizado por PCR em tempo real, enquanto a determinação das concentrações de NRF2, SOD, GPx e HO1 será realizada pelo método ELISA com kits desenvolvidos para este fim. A análise dos dados inclui estatísticas descritivas expressas em médias e desvios padrão ou medianas de acordo com a distribuição paramétrica ou não paramétrica, as variáveis ​​nominais serão apresentadas como números ou porcentagens e a comparação entre estas será por qui quadrado ou exato de Fisher. A estatística inferencial incluiu testes U-Mann Whitney ou t de Student para amostras independentes e pareadas conforme apropriado para avaliar as concentrações de NRF2, SOD, GPx e HO1 com as diferentes intervenções e os indivíduos do grupo controle. Uma análise de covariância será realizada levando em consideração o fator suplementação, fator genético e a interação de ambos com as concentrações de NRF2. Um valor de p<0,05 e IC 95% será considerado significativo.

Recursos e infraestrutura. O CIBO e a Unidade de Investigação Médica em Doenças Renais dispõem dos recursos humanos para coordenar e desenvolver a presente investigação. Além disso, contam com a infraestrutura e equipamentos necessários para realizar os procedimentos contemplados neste projeto. O projeto será submetido a editais de financiamento para obtenção dos recursos necessários ao seu desenvolvimento.