Curcumin auf NFE2L2-Genexpression, antioxidative Kapazität und Nierenfunktion gemäß rs35652124 bei diabetischer Nephropathie (CURCUNRF2)

Ziel: Bewertung der Wechselwirkung zwischen rs35652124-Polymorphismus und Curcumin-Supplementierung auf den Ebenen der NFE2L2-Genexpression, der antioxidativen Kapazität und der Nierenfunktion bei Patienten mit früher diabetischer Nephropathie (EDN).

Fächer und Methoden. Parallele klinische Studie mit randomisierter und dreifach verblindeter Studie. Aus einer Datenbank von neu diagnostizierten Diabetikern mit CKD werden diejenigen mit EDN identifiziert und telefonisch lokalisiert, um insgesamt 275 Probanden über 18 Jahre zu vervollständigen. Anschließend werden sie in der Geschäftsstelle der Biomedizinischen Abteilung 02 zitiert, prüfen, ob sie die Auswahlkriterien erfüllen, werden über die Ziele der Studie informiert und zur Teilnahme eingeladen. Diejenigen, die der Teilnahme zustimmen, erhalten eine Einverständniserklärung, sie werden gebeten, diese sorgfältig zu lesen, und wenn sie irgendwelche Zweifel haben, werden sie im Moment geklärt. Sobald sie die schriftliche Zustimmung unterzeichnet haben, werden sie für die erste Blutprobenentnahme (5 ml) zitiert, die für die genomische DNA-Extraktion und Genotypisierung für den rs35652124-Polymorphismus verwendet wird. Alle Patienten, die an der Studie teilnehmen, werden einer körperlichen und diätetischen Untersuchung unterzogen und die Daten auf einer Krankenakte aufgezeichnet. Ihnen wird zwei Wochen vor Beginn der klinischen Studie (Woche <2) ein Ernährungsplan gemäß den ADA-Empfehlungen und den K/DOQI-Richtlinien verschrieben, der während der gesamten Nachbeobachtung beibehalten wird. Sie werden dann monatlich für eine medizinische und ernährungsphysiologische Untersuchung eingeplant. Bei den Besuchen in den Wochen 2, 0 (Beginn der Supplementierung), 12 und 24 werden drei periphere Blutröhrchen (je 5 ml) entnommen. Die erste, um die Gesamt-mRNA und die Expressionsanalyse des NFE2L2-Gens zu extrahieren, die zweite, um die Spiegel von NRF2, SOD, GPx und HO1 zu bestimmen, und die dritte, um Nierenfunktionstests durchzuführen und mögliche Störvariablen (Kreatinin, Glukose, glykosyliertes Hämoglobin, Lipidprofil und Harnsäure). Darüber hinaus werden sie gebeten, am selben Tag, an dem die Blutproben entnommen wurden, eine Probe des ersten Morgenurins zu entnehmen, um Albuminurie/Kreatinurie zu quantifizieren. Die Zeit der Studie seit der ersten Bewertung beträgt 26 Wochen und die Gesamtzahl der Arzt- und Ernährungsbesuche beträgt sechs, einen monatlich. Die Genotypisierung wird durch Polymerase-Kettenreaktion (PCR) durchgeführt, die an vier Paare von Oligonukleotid-Primern gekoppelt ist, die für die interessierenden Allele spezifisch sind. Der Genexpressionsassay wird durch real-time PCR durchgeführt, während die Bestimmung der Konzentrationen von NRF2, SOD, GPx und HO1 durch das ELISA-Verfahren mit dafür entwickelten Kits durchgeführt wird. Die Analyse der Daten umfasst deskriptive Statistiken, ausgedrückt in Durchschnitten und Standard- oder Medianabweichungen gemäß der parametrischen oder nichtparametrischen Verteilung, die nominalen Variablen werden als Zahlen oder Prozentsätze dargestellt und der Vergleich zwischen diesen erfolgt nach Chi-Quadrat oder exakt nach Fisher. Inferenzstatistiken umfassten U-Mann-Whitney- oder Student-t-Tests für unabhängige und gepaarte Proben, um die NRF2-, SOD-, GPx- und HO1-Konzentrationen bei den verschiedenen Interventionen und den Personen in der Kontrollgruppe zu bewerten. Eine Kovarianzanalyse wird unter Berücksichtigung der Faktorergänzung, des genetischen Faktors und der Wechselwirkung beider mit den Konzentrationen von NRF2 durchgeführt. Ein Wert von p < 0,05 und 95 % KI werden als signifikant angesehen.

Ressourcen und Infrastruktur. Das CIBO und die Medical Research Unit in Renal Diseases verfügen über die personellen Ressourcen, um die vorliegende Forschung zu koordinieren und weiterzuentwickeln. Außerdem verfügen sie über die notwendige Infrastruktur und Ausrüstung, um die in diesem Projekt vorgesehenen Verfahren durchzuführen. Das Projekt wird bei Aufrufen zur Finanzierung eingereicht, um die notwendigen Ressourcen für seine Entwicklung zu erhalten.