Curcumina su espressione genica NFE2L2, capacità antiossidante e funzione renale secondo rs35652124 nella nefropatia diabetica (CURCUNRF2)

Obiettivo: Valutare l'interazione tra polimorfismo rs35652124 e supplementazione di curcumina sui livelli di espressione del gene NFE2L2, capacità antiossidante e funzione renale in pazienti con nefropatia diabetica precoce (EDN).

Materie e metodi. Studio clinico parallelo con randomizzato e triplo cieco. Da un database di pazienti diabetici con nuova diagnosi di CKD, quelli con EDN saranno identificati e localizzati telefonicamente per un totale di 275 soggetti di età superiore ai 18 anni. Successivamente, saranno citati nell'ufficio dell'Unità Biomedica 02, verificheranno che soddisfino i criteri di selezione, saranno informati sugli obiettivi dello studio e invitati a partecipare. Coloro che acconsentiranno a partecipare riceveranno una lettera di consenso informato, saranno invitati a leggerla attentamente e se avranno dei dubbi verranno chiariti al momento. Una volta firmato il consenso scritto saranno citati per il primo prelievo di sangue (5 mL) da utilizzare per l'estrazione del DNA genomico e la genotipizzazione per il polimorfismo rs35652124. Tutti i pazienti che accedono allo studio saranno sottoposti ad un esame fisico e dietetico e registreranno i dati su una scheda clinica. A loro verrà prescritto un piano alimentare secondo le raccomandazioni ADA e le linee guida K/DOQI due settimane prima (settimana <2) all'inizio della sperimentazione clinica, che verrà mantenuto per tutto il follow-up. Saranno quindi programmati mensilmente per la valutazione medica e nutrizionale. Alle visite delle settimane 2, 0 (inizio della supplementazione), 12 e 24, verranno prelevate tre provette di sangue periferico (5 ml ciascuna). Il primo, per estrarre l'mRNA totale e l'analisi dell'espressione del gene NFE2L2, il secondo, per determinare i livelli di NRF2, SOD, GPx e HO1 e il terzo, per eseguire test di funzionalità renale e controllo di eventuali variabili confondenti (creatinina, glucosio, emoglobina glicosilata, profilo lipidico e acido urico). Inoltre, verrà chiesto loro di raccogliere un campione delle prime urine del mattino per quantificare l'albuminuria/creatinuria nello stesso giorno in cui sono stati prelevati i campioni di sangue. Il tempo dello studio dalla prima valutazione è di 26 settimane e il numero totale di visite mediche e nutrizionali sarà di sei, una al mese. La genotipizzazione sarà effettuata mediante reazione a catena della polimerasi (PCR) accoppiata a quattro coppie di primer oligonucleotidici specifici per gli alleli di interesse. Il saggio di espressione genica sarà effettuato mediante real-time PCR, mentre la determinazione delle concentrazioni di NRF2, SOD, GPx e HO1 sarà effettuata mediante il metodo ELISA con kit appositamente progettati. L'analisi dei dati include statistiche descrittive espresse in medie e deviazioni standard o mediane secondo la distribuzione parametrica o non parametrica, le variabili nominali saranno presentate come numeri o percentuali e il confronto tra queste sarà per Chi quadrato o Fisher esatto. Le statistiche inferenziali includevano test U-Mann Whitney o Student t per campioni indipendenti e accoppiati, a seconda dei casi, per valutare le concentrazioni di NRF2, SOD, GPx e HO1 con i diversi interventi e gli individui nel gruppo di controllo. Verrà eseguita un'analisi di covarianza prendendo in considerazione la supplementazione fattoriale, il fattore genetico e l'interazione di entrambi con le concentrazioni di NRF2. Un valore di p<0,05 e 95% CI sarà considerato significativo.

Risorse e infrastrutture. Il CIBO e l'Unità di Ricerca Medica sulle Malattie Renali dispongono delle risorse umane per coordinare e sviluppare la presente ricerca. Inoltre, dispongono delle infrastrutture e delle attrezzature necessarie per eseguire le procedure contemplate in questo progetto. Il progetto sarà sottoposto a bandi di finanziamento per ottenere le risorse necessarie al suo sviluppo.