Curcumine op NFE2L2-genexpressie, antioxidantcapaciteit en nierfunctie volgens rs35652124 bij diabetische nefropathie (CURCUNRF2)

Doel: evalueren van de interactie tussen rs35652124-polymorfisme en suppletie met curcumine op de niveaus van NFE2L2-genexpressie, antioxidantcapaciteit en nierfunctie bij patiënten met vroege diabetische nefropathie (EDN).

Onderwerpen en methoden. Parallelle klinische studie met gerandomiseerde en triple blind. Uit een database van diabetespatiënten die onlangs de diagnose CKD hebben gekregen, zullen degenen met EDN telefonisch worden geïdentificeerd en gelokaliseerd om een ​​totaal van 275 proefpersonen ouder dan 18 jaar te voltooien. Vervolgens worden ze geciteerd in het kantoor van Biomedical Unit 02, verifiëren ze dat ze voldoen aan de selectiecriteria, worden ze geïnformeerd over de doelstellingen van de studie en uitgenodigd om deel te nemen. Degenen die ermee instemmen om deel te nemen, krijgen een geïnformeerde toestemmingsbrief, ze zullen worden gevraagd deze aandachtig te lezen en als ze twijfels hebben, zullen ze op dit moment worden opgehelderd. Zodra ze de schriftelijke toestemming hebben ondertekend, worden ze aangehaald voor de eerste bloedafname (5 ml) die wordt gebruikt voor genomische DNA-extractie en genotypering voor het rs35652124-polymorfisme. Alle patiënten die aan de studie deelnemen, ondergaan een lichamelijk en dieetonderzoek en zullen de gegevens op een klinische dossierkaart noteren. Twee weken voorafgaand (week <2) aan de start van de klinische proef krijgen ze een maaltijdplan voorgeschreven volgens de ADA-aanbevelingen en de K/DOQI-richtlijnen, die tijdens de follow-up worden gehandhaafd. Ze worden dan maandelijks ingepland voor medische en voedingsevaluatie. Bij de bezoeken van week 2, 0 (begin suppletie), 12 en 24 worden drie perifere bloedbuisjes (elk 5 ml) afgenomen. De eerste om totaal mRNA en expressieanalyse van het NFE2L2-gen te extraheren, de tweede om de niveaus van NRF2, SOD, GPx en HO1 te bepalen en de derde om nierfunctietesten uit te voeren en mogelijke verstorende variabelen (creatinine, glucose, geglycosyleerd hemoglobine, lipidenprofiel en urinezuur). Bovendien wordt hen gevraagd een monster van de eerste ochtendurine te verzamelen om albuminurie/creatinurie te kwantificeren op dezelfde dag dat bloedmonsters werden genomen. De tijd van de studie sinds de eerste evaluatie is 26 weken en het totale aantal medische en voedingsbezoeken zal zes zijn, één maandelijks. Genotypering zal worden uitgevoerd door middel van een polymerasekettingreactie (PCR) gekoppeld aan vier paren oligonucleotideprimers die specifiek zijn voor de allelen van belang. De genexpressietest zal worden uitgevoerd door middel van real-time PCR, terwijl de bepaling van de concentraties van NRF2, SOD, GPx en HO1 zal worden uitgevoerd door middel van de ELISA-methode met daarvoor ontworpen kits. De analyse van de gegevens omvat beschrijvende statistieken uitgedrukt in gemiddelden en standaard- of mediaanafwijkingen volgens de parametrische of niet-parametrische verdeling, de nominale variabelen worden weergegeven als getallen of percentages en de vergelijking tussen deze gebeurt met Chi-kwadraat of Fisher exact. Inferentiële statistieken omvatten U-Mann Whitney- of Student t-testen voor onafhankelijke en gepaarde monsters, naargelang het geval om de NRF2-, SOD-, GPx- en HO1-concentraties te evalueren met de verschillende interventies en de individuen in de controlegroep. Er zal een covariantieanalyse worden uitgevoerd waarbij rekening wordt gehouden met de factorsuppletie, de genetische factor en de interactie van beide met de concentraties van NRF2. Een waarde van p<0,05 en 95% BI wordt als significant beschouwd.

Middelen en infrastructuur. Het CIBO en de Medische Onderzoekseenheid Nierziekten beschikken over de personele middelen om het huidige onderzoek te coördineren en te ontwikkelen. Ze beschikken ook over de nodige infrastructuur en apparatuur om de procedures uit te voeren die in dit project worden overwogen. Het project zal worden voorgelegd aan financieringsoproepen om de nodige middelen voor de ontwikkeling ervan te verkrijgen.