Kurkumiini NFE2L2-geenin ilmentymisestä, antioksidanttikapasiteetista ja munuaisten toiminnasta rs35652124:n mukaan diabeettisessa nefropatiassa (CURCUNRF2)

Tavoite: Arvioida rs35652124-polymorfismin ja kurkumiinin lisäyksen vuorovaikutusta NFE2L2-geenin ilmentymisen, antioksidanttikapasiteetin ja munuaisten toiminnan suhteen potilailla, joilla on varhainen diabeettinen nefropatia (EDN).

Aiheet ja menetelmät. Rinnakkais kliininen tutkimus satunnaistetulla ja kolmoissokkoutetulla. Äskettäin CKD-diagnoosin sairastavien diabeetikkojen tietokannasta tunnistetaan ja paikannetaan puhelimitse 275 yli 18-vuotiasta tutkittavaa. Myöhemmin heidät mainitaan biolääketieteen yksikön 02 toimistossa, he varmistavat, että he täyttävät valintakriteerit, heille tiedotetaan tutkimuksen tavoitteista ja heidät kutsutaan osallistumaan. Osallistumiseen suostuville lähetetään tietoinen suostumuskirje, jota pyydetään lukemaan se huolellisesti ja mikäli heillä on epäilyksiä, asia selvitetään tällä hetkellä. Kun he ovat allekirjoittaneet kirjallisen suostumuksen, heidät mainitaan ensimmäisellä verinäytteellä (5 ml), jota käytetään genomisen DNA:n erottamiseen ja rs35652124-polymorfismin genotyypitykseen. Kaikille tutkimukseen tuleville potilaille tehdään fyysinen ja ruokavaliotutkimus, ja tiedot kirjataan kliiniselle muistikortille. Heille määrätään ateriasuunnitelma ADA-suositusten ja K/DOQI-ohjeiden mukaisesti kaksi viikkoa ennen (viikko <2) kliinisen tutkimuksen alkaessa, ja sitä säilytetään koko seurannan ajan. Heille määrätään sitten kuukausittain lääketieteellinen ja ravitsemusarviointi. Viikoilla 2, 0 (lisähoidon aloitus), 12 ja 24 käynneillä otetaan kolme perifeeristä veriletkua (kukin 5 ml). Ensimmäinen, kokonais-mRNA:n erottaminen ja NFE2L2-geenin ilmentymisanalyysi, toinen NRF2-, SOD-, GPx- ja HO1-tasojen määrittäminen ja kolmas munuaisten toimintatestien suorittaminen ja mahdollisten hämmentäviä muuttujia (kreatiniini, glukoosi, glykosyloitu hemoglobiini, lipidiprofiili ja virtsahappo). Lisäksi heitä pyydetään ottamaan näyte ensimmäisestä aamuvirtsasta albuminuria/kreatinuria kvantifioimiseksi samana päivänä, kun verinäytteet otettiin. Tutkimuksen kesto ensimmäisestä arvioinnista on 26 viikkoa ja lääkäri- ja ravitsemuskäyntien kokonaismäärä on kuusi, yksi kuukausi. Genotyypitys suoritetaan polymeraasiketjureaktiolla (PCR), joka on kytketty neljään pariin kiinnostaville alleeleille spesifisiä oligonukleotidialukkeita. Geeniekspressiomääritys suoritetaan reaaliaikaisella PCR:llä, kun taas NRF2:n, SOD:n, GPx:n ja HO1:n pitoisuudet määritetään ELISA-menetelmällä tähän tarkoitukseen suunnitelluilla sarjoilla. Aineiston analyysi sisältää kuvaavia tilastoja, jotka ilmaistaan ​​keskiarvoina ja keski- tai mediaanipoikkeamina parametrisen tai ei-parametrisen jakauman mukaan, nimellismuuttujat esitetään numeroina tai prosentteina ja vertailu tapahtuu Chi-neliöllä tai Fisher-tarkkuudella. Päätelmätilastot sisälsivät U-Mann Whitneyn tai Studentin t-testit riippumattomille ja parillisille näytteille tarpeen mukaan NRF2-, SOD-, GPx- ja HO1-pitoisuuksien arvioimiseksi eri interventioiden ja kontrolliryhmän yksilöiden kanssa. Kovarianssianalyysissä otetaan huomioon tekijälisäys, geneettinen tekijä ja molempien vuorovaikutus NRF2-pitoisuuksien kanssa. Arvoa p<0,05 ja 95 % CI:tä pidetään merkitsevänä.

Resurssit ja infrastruktuuri. CIBO:lla ja munuaistautien lääketieteellisellä tutkimusyksiköllä on henkilöstöresurssit koordinoida ja kehittää tätä tutkimusta. Heillä on myös tarvittava infrastruktuuri ja laitteet tässä hankkeessa suunniteltujen menettelyjen suorittamiseen. Hankkeelle haetaan rahoitusta sen kehittämiseen tarvittavien resurssien saamiseksi.