Kurkumina na ekspresję genów NFE2L2, zdolność przeciwutleniającą i czynność nerek zgodnie z rs35652124 w Nefropatii cukrzycowej (CURCUNRF2)

Cel: Ocena interakcji między polimorfizmem rs35652124 a suplementacją kurkuminy na poziom ekspresji genu NFE2L2, zdolności antyoksydacyjne i czynność nerek u pacjentów z wczesną nefropatią cukrzycową (EDN).

Tematy i metody. Równoległe badanie kliniczne z randomizacją i potrójną ślepą próbą. Z bazy danych pacjentów z cukrzycą, u których niedawno zdiagnozowano przewlekłą chorobę nerek, osoby z EDN zostaną zidentyfikowane i zlokalizowane telefonicznie, aby zebrać łącznie 275 pacjentów w wieku powyżej 18 lat. Następnie zostaną powołani w biurze Oddziału Biomedycznego 02, zweryfikują, czy spełniają kryteria selekcji, zostaną poinformowani o celach badania i zaproszeni do udziału. Osoby, które wyrażą zgodę na udział, otrzymają list świadomej zgody, zostaną poproszone o uważne przeczytanie, a jeśli będą miały jakiekolwiek wątpliwości, zostaną one w tej chwili wyjaśnione. Po podpisaniu pisemnej zgody zostaną wezwani do pobrania pierwszej próbki krwi (5 ml) do ekstrakcji genomowego DNA i genotypowania pod kątem polimorfizmu rs35652124. Wszyscy pacjenci biorący udział w badaniu zostaną poddani badaniu fizykalnemu i dietetycznemu oraz zapiszą dane w karcie dokumentacji klinicznej. Zostanie im przepisany plan posiłków zgodnie z zaleceniami ADA i wytycznymi K/DOQI dwa tygodnie przed (tydzień <2) na początku badania klinicznego, który będzie utrzymywany przez cały okres obserwacji. Następnie będą co miesiąc umawiani na ocenę medyczną i żywieniową. Podczas wizyt w tygodniu 2, 0 (początek suplementacji), 12 i 24 zostaną pobrane trzy probówki z krwią obwodową (każda po 5 ml). Pierwsza w celu ekstrakcji całkowitego mRNA i analizy ekspresji genu NFE2L2, druga w celu określenia poziomów NRF2, SOD, GPx i HO1 oraz trzecia w celu wykonania badań czynności nerek i kontroli ewentualnych zmiennych zakłócających (kreatynina, glukoza, glikozylowana hemoglobina, profil lipidowy i kwas moczowy). Ponadto zostaną poproszeni o pobranie próbki pierwszego porannego moczu w celu ilościowego określenia albuminurii/kreatynurii tego samego dnia, w którym pobrano próbki krwi. Czas trwania badania od pierwszej oceny wynosi 26 tygodni, a łączna liczba wizyt lekarskich i żywieniowych wyniesie sześć, jedna miesięczna. Genotypowanie zostanie przeprowadzone za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) sprzężonej z czterema parami starterów oligonukleotydowych specyficznych dla interesujących alleli. Oznaczenie ekspresji genów zostanie przeprowadzone metodą real-time PCR, natomiast oznaczenie stężeń NRF2, SOD, GPx i HO1 metodą ELISA z wykorzystaniem przeznaczonych do tego celu zestawów. Analiza danych obejmuje statystyki opisowe wyrażone w postaci średnich i odchyleń standardowych lub medianowych zgodnie z rozkładem parametrycznym lub nieparametrycznym, zmienne nominalne zostaną przedstawione w postaci liczbowej lub procentowej, a porównanie między nimi zostanie przeprowadzone metodą chi-kwadrat lub z dokładnością Fishera. Statystyki wnioskowania obejmowały testy t U-Manna Whitneya lub Studenta dla niezależnych i sparowanych próbek odpowiednio do oceny stężeń NRF2, SOD, GPx i HO1 z różnymi interwencjami i osobnikami z grupy kontrolnej. Zostanie przeprowadzona analiza kowariancji z uwzględnieniem suplementacji czynnika, czynnika genetycznego oraz interakcji obu ze stężeniami NRF2. Wartość p<0,05 i 95% CI zostanie uznana za istotną.

Zasoby i infrastruktura. CIBO i Medical Research Unit in Renal Diseases dysponują zasobami ludzkimi, aby koordynować i rozwijać obecne badania. Dysponują również niezbędną infrastrukturą i sprzętem do przeprowadzenia procedur przewidzianych w tym projekcie. Projekt zostanie zgłoszony do konkursów o dofinansowanie w celu pozyskania niezbędnych środków na jego rozwój.