Biomarcadores preditivos, incluindo assinaturas tumorais baseadas em miRNA em linfoma difuso de grandes células B (R/R DLBCL) (MIMOSA) (MIMOSA)

As atividades de pesquisa serão conduzidas dentro de um estudo retrospectivo/prospectivo, multicêntrico e não intervencional específico do projeto. O estudo não é intervencional, pois todos os pacientes serão tratados de acordo com as diretrizes institucionais para a prática clínica padrão em cada centro.

Duração do estudo: este é um projeto de dois anos, nos primeiros 4 meses será realizada a parte retrospectiva do estudo, o recrutamento de pacientes para a parte prospectiva começará a partir do quarto mês e a análise das amostras prospectivas será durar até o final do projeto. O modelo in vitro será estabelecido durante o primeiro ano e os experimentos in vitro serão realizados até o final do projeto. Os últimos meses do estudo serão dedicados à análise estatística dos dados e à sua interpretação.

Este projeto será desenvolvido através das seguintes Tarefas específicas:

Tarefa 1: Explorar associações entre a expressão de antígenos-alvo na superfície de células neoplásicas de pacientes DLBCL e a resposta a terapias-alvo Um algoritmo de citometria de fluxo foi desenvolvido para identificar populações de células B CD19+ aberrantes sugestivas de linfoma de células B agressivo que consiste na identificação de uma população de células definida pela presença de clonalidade de cadeia leve de imunoglobulina de superfície ou pela ausência de expressão de cadeias leves em combinação com parâmetros físicos FSC e SSC aumentados. Essas populações serão analisadas quanto à expressão de antígenos alvo.

Tarefa 2: Identificar assinaturas específicas de miRNA como preditores de resposta a imunoterapias iniciais e de resgate em pacientes DLBCL.

Para este fim, o perfil de expressão de miRNA será realizado pela tecnologia Nanostring em amostras de tecido tumoral fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) coletadas no momento do diagnóstico. Os acertos resultantes serão posteriormente analisados ​​em amostras de plasma/soro correspondentes para avaliar o uso potencial de miRNAs como biomarcadores não invasivos.

Tarefa 3: Para refinar o diagnóstico e perfil molecular de DLBCL, e fornecer informações biológicas de relevância prognóstica no cenário de tratamentos inovadores de pacientes com DLBCL O principal objetivo é fornecer a caracterização multinível (nanostring, NGS) de casos de DLBCL que são utilizado simultaneamente para desenvolver uma assinatura de miRNA preditiva de resposta a tratamentos iniciais e de resgate. Os casos também serão caracterizados por alterações estruturais dos genes MYC, BCL2 e BCL-6 (FISH) e pela expressão dupla da proteína MYC/BCL2 (imuno-histoquímica). Além disso, serão geradas informações sobre vias de imunovigilância e funções microambientais.