Hladiny multimerů von Willebrandova faktoru a VWF štěpící proteázy (ADAMTS-13) u předčasně narozených a novorozenců

Von Willebramdův faktor (VWF) je adhezivní glykoprotein syntetizovaný megakaryocyty a endoteliálními buňkami. VWF má ústřední roli v primární hemostáze a je kritickým ligandem pro adhezi a agregaci krevních destiček (1, 2). VWF je nosičem cirkulujícího faktoru 8 jako studna. VWF je uložen ve Wiebel-Paladeho tělíscích v endoteliálních buňkách a v alfa granulích krevních destiček ve formě ultravelkých (UL) multimerů.

Multimery VWF se skládají z podjednotek, které jsou spojeny disulfidovými vazbami, které se střídají mezi 2 C-koncovými konci a 2 N-koncovými konci způsobem hlava-hlava a konec-konec (3, 4). Ukázalo se, že biologická aktivita VWF souvisí s velikostí multimerů.

VWF se uvolňuje z endoteliálních buněk do plazmy jako multimery v rozmezí 500-20 000 kD. UL multimery jsou hemostaticky účinnější než menší formy. Spontánně se vážou na krevní destičky, což vede k tvorbě mikrotrombů v oběhu. Tento mechanismus je downregulován plazmatickou proteázou ADAMTS-13 (A dezintegrin a metaloproteáza s motivem ThromboSpondin). Pokud dojde k defektu proteolýzy, ULVWF se naváže na krevní destičky, což vede k systémovým trombotickým mikroangiopatiím (TMA), jako je trombotická trombocytopenická purpura (TTP)(5) ,6).

ADAMTS-13 patří do rodiny metaloproteáz ADAMTS. Struktura ADAMTS-13 je u obratlovců zachována, což ukazuje na její důležitou funkci (7). Funkce metaloproteázy byla poprvé popsána před 11 lety a byla klonována a charakterizována (8-13). Rodina metaloploproteáz ADAMTS je vyžadována v jiných systémech, jako je genitourinární systém (ADAMTS1), kolagenový systém (ADAMTS2) a jako štěpící proteáza VWF (VWFCP) - ADAMTS13. Když je multimer VWF vystaven dostatečnému smykovému napětí tekutiny, ADAMTS-13 štěpí VWF na unikátní vazbě 842Tyr-843Met v doméně A2 (14,15). Toto štěpení produkuje fragmenty podjednotky VWF o velikosti 176 kDa a 140 kDa.

Aktivita ADAMTS-13 závisí na iontech Zn+2 i Ca+2 (16). Nízké hladiny nebo nedostatek ADAMTS-13 je pozorován u pacientů s TTP(17,18). Mannuccio et al (19) ukázali, že nízké hladiny ADAMTS-13 jsou pozorovány u jiných stavů, jako jsou zdraví dospělí starší 65 let, pacienti s cirhózou, urémií, akutním zánětem, pooperačním obdobím. U novorozenců a předčasně narozených dětí jsou údaje omezené. Několik studií ukázalo, že hladiny ADAMTS-13 jsou nízké u novorozenců (19-21). Tsai et al (22) pozorovali, že aktivita ADAMTS-13 je v pupečníkové krvi normální ve srovnání s dospělými. U předčasně narozených dětí pilotní studie ukázala, že předčasně narozené děti mají nízké hladiny ADAMTS-13(23).

Cílem naší studie je ověřit ADAMTS-13, multimery VWF, antigen VWF a vazebnou aktivitu kolagenu VWF u zdravých a nemocných novorozenců a u předčasně narozených dětí.