Von Willebrand -tekijämultimeerien ja VWF-pilkkovan proteaasin (ADAMTS-13) tasot keskosilla ja vastasyntyneillä

Von Willebramd Factor (VWF) on megakaryosyyttien ja endoteelisolujen syntetisoima tarttuva glykoproteiini. VWF:llä on keskeinen rooli primaarisessa hemostaasissa ja se on kriittinen ligandi verihiutaleiden adheesiolle ja aggregaatiolle (1, 2). VWF on verenkierron tekijän 8 kantaja. hyvin. VWF varastoidaan Wiebel-Palade-kappaleisiin endoteelisoluissa ja verihiutale alfa-rakeissa Ultra-large (UL) -multimeerien muodossa.

VWF-multimeerit koostuvat alayksiköistä, jotka on liitetty toisiinsa disulfidisidoksilla, jotka vuorottelevat 2 C-terminaalisen pään ja 2 N-terminaalisen pään välillä head-to-head ja tail-to-tail tavalla (3, 4). VWF:n biologisen aktiivisuuden on osoitettu liittyvän multimeerien kokoon.

VWF vapautuu endoteelisoluista kohti plasmaa multimeereinä, joiden koko vaihtelee 500-20 000 kD. UL-multimeerit ovat hemostaattisesti tehokkaampia kuin pienemmät muodot. Ne sitoutuvat spontaanisti verihiutaleisiin, mikä johtaa mikrotrombien muodostumiseen verenkierrossa. Plasmaproteaasi ADAMTS-13 (A disintegriini ja metalloproteaasi, jossa on tromboSpondiini-motiivi) säätelee tätä mekanismia. Jos proteolyysistä tulee viallinen, ULVWF sitoutuu verihiutaleisiin, mikä johtaa systeemisiin tromboottisiin mikroangiofaatteihin (TMA), kuten tromboottiseen trombosytopeeniseen puraan (TTP) ,6).

ADAMTS-13 kuuluu ADAMTS-perheeseen metalloproteaasit.ADAMTS-13:n rakenne on säilynyt kaikkialla selkärankaisissa, mikä osoittaa sen tärkeän tehtävän (7). Metalloproteaasitoiminto kuvattiin ensimmäisen kerran 11 vuotta sitten ja se on kloonattu ja karakterisoitu (8-13) .Metaloploproteaasien ADAMTS-perhettä tarvitaan muissa järjestelmissä, kuten virtsatiejärjestelmässä (ADAMTS1), kollageenijärjestelmässä (ADAMTS2) ja VWF:n pilkkovana proteaasina (VWFCP) - ADAMTS13. Kun VWF-multimeeri altistetaan riittävälle nesteleikkausjännitykselle, ADAMTS-13 katkaisee VWF:n ainutlaatuisella 842Tyr-843Met-sidoksella domeenissa A2 (14,15). Tämä pilkkominen tuottaa 176 kDa:n ja 140 kDa:n VWF-alayksikköfragmentteja.

ADAMTS-13:n aktiivisuus riippuu sekä Zn+2- että Ca+2-ioneista (16). ADAMTS-13:n alhainen taso tai puutos havaitaan potilaalla, jolla on TTP(17,18). Mannuccio et al (19) osoittivat, että ADAMTS-13:n alhainen taso on havaittavissa muissa olosuhteissa, kuten terveillä yli 65-vuotiailla aikuisilla, potilailla, joilla on kirroosi, uremia, akuutti tulehdus, leikkauksen jälkeinen ajanjakso. Vastasyntyneistä ja keskosista tiedot ovat rajalliset. Harvat tutkimukset ovat osoittaneet, että ADAMTS-13:n tasot ovat alhaiset vastasyntyneillä (19-21). Tsai et al (22) havaitsivat, että ADAMTS-13:n aktiivisuus on normaalia napanuoraveressä aikuisiin verrattuna. Ennenaikaisilla vauvoilla tehty pilottitutkimus osoitti, että keskosilla on alhainen ADAMTS-13:n taso(23).

Tutkimuksemme tavoitteena on tarkistaa ADAMTS-13:n, VWF-multimeerien, VWF-antigeenin ja VWF-kollageenin sitoutumisaktiivisuus terveillä ja sairailla vastasyntyneillä sekä keskosilla.