Biomarker in Blut- und Gewebeproben von Patienten mit neu diagnostiziertem Neuroblastom

ZIELE:

• Bestimmen Sie die Expression von Neuropeptid Y (NPY) und seinen Rezeptoren (Rs) in menschlichen Neuroblastom (NB)-Geweben.
• Bestimmen Sie, ob BDNF/TrkB und TrkAIII die Expression von NPY und seinen Rs stimulieren.
• Bestimmen Sie, ob NPY die BDNF- und TrkAIII-induzierte NB-Proliferation und das Überleben vermittelt.
• Bestimmen Sie die angiogenen Wirkungen von Neurotrophinen.
• Identifizieren Sie Faktoren, die von NB-Zellen bei NPY-Stimulation freigesetzt werden (Proteomik).
• Bestimmen Sie, ob NPY die Expression der identifizierten Proteine ​​​​in NB und ihrer Rs in Endothelzellen (ECs) hochreguliert.
• Testen Sie, ob die Hemmung der identifizierten Signalwege die angiogene Aktivität von NB-konditionierten Medien reduziert.
• Bestimmen Sie die Mechanismen von NYP-Aktionen und Signalwegen.
• Testen Sie, ob die Blockierung des NPY-Y2/Y5-Wegs das NB-Wachstum und die Vaskularisierung in vivo reduziert.

ÜBERBLICK: Archivierte Tumorgewebe- und Serumproben werden auf die Expression von Neuropeptid Y und seinen Rezeptoren (Y1, Y2 und Y5), Neuroblastom-Prognosefaktoren (MYCN, TrkA, TrkAIII, TrkB, BDNF und NGF) und angiogenen Markern durch real- Zeit-PCR, IHC, ELISA, Radioimmunoassay (RIA), mitogener Assay, Caspase 3/7-Aktivitätsassay, Western Blots, Flüssigkeitschromatographie, Tandem-Massenspektrometrie, Proteomikassays und andere Assays. Die Ergebnisse werden dann analysiert und mit den klinischen Daten der Patienten verglichen, darunter Krankheitsstadium, Phänotyp, prognostische Marker, Alter und Geschlecht sowie Ansprechen auf die Behandlung.