Biomarqueurs dans des échantillons de sang et de tissus de patients atteints d'un neuroblastome nouvellement diagnostiqué

OBJECTIFS:

• Déterminer l'expression du neuropeptide Y (NPY) et de ses récepteurs (Rs) dans les tissus de neuroblastome humain (NB).
• Déterminer si BDNF/TrkB et TrkAIII stimulent l'expression de NPY et de ses Rs.
• Déterminer si le NPY intervient dans la prolifération et la survie des NB induites par le BDNF et le TrkAIII.
• Déterminer les actions angiogéniques des neurotrophines.
• Identifier les facteurs libérés par les cellules NB lors de la stimulation NPY (protéomique).
• Déterminer si NPY régule à la hausse l'expression des protéines identifiées dans NB et leurs Rs dans les cellules endothéliales (CE).
• Tester si l'inhibition des voies identifiées réduit l'activité angiogénique des milieux conditionnés NB.
• Déterminer les mécanismes d'actions NYP et les voies de signalisation.
• Tester si le blocage de la voie NPY-Y2/Y5 réduit la croissance et la vascularisation NB in ​​vivo.

APERÇU : Des échantillons de tissu tumoral et de sérum archivés sont analysés pour l'expression du neuropeptide Y et de ses récepteurs (Y1, Y2 et Y5), les facteurs pronostiques du neuroblastome (MYCN, TrkA, TrkAIII, TrkB, BDNF et NGF) et les marqueurs angiogéniques par des temps PCR, IHC, ELISA, radioimmunodosage (RIA), dosage mitogène, dosage de l'activité de la caspase 3/7, western blots, chromatographie liquide, spectrométrie de masse en tandem, dosages protéomiques et autres dosages. Les résultats sont ensuite analysés et comparés aux données cliniques des patients, y compris le stade de la maladie, son phénotype, les marqueurs pronostiques, l'âge et le sexe, et la réponse au traitement.