Biomarcatori in campioni di sangue e tessuto da pazienti con neuroblastoma di nuova diagnosi

OBIETTIVI:

• Determinare l'espressione del neuropeptide Y (NPY) e dei suoi recettori (Rs) nei tessuti del neuroblastoma umano (NB).
• Determinare se BDNF/TrkB e TrkAIII stimolano l'espressione di NPY e dei suoi Rs.
• Determinare se NPY media la proliferazione e la sopravvivenza di NB indotte da BDNF e TrkAIII.
• Determinare le azioni angiogeniche delle neurotrofine.
• Identificare i fattori rilasciati dalle cellule NB su stimolazione NPY (proteomica).
• Determinare se NPY sovraregola l'espressione delle proteine ​​identificate in NB e il loro Rs nelle cellule endoteliali (EC).
• Verificare se l'inibizione dei percorsi identificati riduce l'attività angiogenica dei media condizionati da NB.
• Determinare i meccanismi delle azioni NYP e dei percorsi di segnalazione.
• Verifica se il blocco della via NPY-Y2/Y5 riduce la crescita e la vascolarizzazione di NB in ​​vivo.

SCHEMA: Il tessuto tumorale archiviato e i campioni di siero vengono analizzati per l'espressione del neuropeptide Y e dei suoi recettori (Y1, Y2 e Y5), dei fattori prognostici del neuroblastoma (MYCN, TrkA, TrkAIII, TrkB, BDNF e NGF) e dei marcatori angiogenici mediante analisi reali. time PCR, IHC, ELISA, test radioimmunologico (RIA), test mitogenico, test di attività della caspasi 3/7, western blot, cromatografia liquida, spettrometria di massa tandem, test proteomici e altri test. I risultati vengono quindi analizzati e confrontati con i dati clinici dei pazienti, tra cui lo stadio della malattia, il suo fenotipo, i marcatori prognostici, l'età e il sesso e la risposta al trattamento.