Caractérisation des réservoirs du VIH-1 chez les adolescents infectés par le VIH-1 non-B sous TAR au Cameroun (AVIR)

Titre : Caractérisation des réservoirs viraux chez les adolescents infectés verticalement par le VIH-1 non-B recevant une thérapie antirétrovirale au Cameroun.

Acronyme : Étude AVIR, Réservoir viral adolescent

Importance et pertinence L'Afrique subsaharienne (ASS) est touchée de manière disproportionnée par le VIH/SIDA, avec près de 70 % des épidémies mondiales. C'est dans la région d'ASS que se trouvent environ neuf enfants sur dix vivant avec le VIH, où le fardeau des infections pédiatriques par le VIH est le plus élevé (1, 2). Les adolescents et les jeunes représentent une part croissante des personnes vivant avec le VIH dans le monde. En 2019, environ 1,7 million [1,1 million-2,4 millions] d'adolescents âgés de 10 à 19 ans vivaient avec le VIH dans le monde, représentant environ 5 % de toutes les personnes vivant avec le VIH, environ 1,5 million [1,0 - 2,1 millions], soit 88 % des adolescents infectés par le VIH, vivent en ASS. Rien qu'en 2019, 460 000 [260 000-680 000] jeunes âgés de 10 à 24 ans ont été nouvellement infectés par le VIH, dont 170 000 [53 000-340 000] étaient des adolescents âgés de 10 à 19 ans. Pour couronner le tout, les données les plus récentes indiquent que seulement 27 % des adolescentes et 16 % des adolescents âgés de 15 à 19 ans en Afrique orientale et australe – la région la plus touchée par le VIH – ont subi un test de dépistage du VIH au cours des 12 derniers mois et ont reçu un test de dépistage du VIH. le résultat du dernier test. Les taux de dépistage en Afrique occidentale et centrale ainsi qu’en Asie du Sud sont encore plus faibles. Si la tendance actuelle se poursuit, des centaines de milliers d’autres deviendront séropositifs dans les années à venir et, sans connaître leur statut, les adolescents ne bénéficieront pas d’un traitement vital. De plus, une large population d’enfants infectés par le VIH de manière périnatale au cours de la dernière décennie atteint l’adolescence (3). Sur les 690 000 personnes décédées de maladies liées au sida en 2019, 110 000 (soit environ 16 %) étaient des enfants de moins de 20 ans. (Tendances mondiales et régionales de l'UNICEF, juillet 2020).

Avec l’avènement et l’évolutivité de la thérapie antirétrovirale (TAR), on assiste à une diminution mondiale des décès liés au SIDA. Fin 2019, 25,4 millions de personnes bénéficiaient d’un traitement antirétroviral, ce qui représente 67 % de toutes les personnes vivant avec le VIH. Cependant, seuls 53 % des enfants vivant avec le VIH recevaient un TAR. Il est intéressant de noter qu’environ 94 % de tous les enfants bénéficiant d’un TARV viennent d’Afrique subsaharienne (4). Dans ce contexte de nouvelles infections pédiatriques par le VIH et d’une couverture croissante du TAR pédiatrique, le nombre d’enfants vivant avec le VIH va augmenter, ce qui suggère une probabilité plus élevée d’atteindre l’âge adolescent et même l’âge adulte si les schémas thérapeutiques restent pleinement efficaces pour contrôler l’infection par le VIH (3, 4). Les AVVIH constituent donc une population VIH avec des problèmes de santé croissants et avec des résultats très limités en matière de bonnes pratiques généralisables spécifiques à cette population cible, en particulier en ASS.

Comme plusieurs pays d’Afrique de l’Ouest et du Centre, le Cameroun est toujours confronté à une épidémiologie généralisée du VIH (prévalence de 2,7%) (5), avec une prévalence plus élevée chez les femmes enceintes (5,7%) et les nourrissons/enfants exposés au VIH (5,8% [958/16 638 ] positivité à la première PCR et 15% à la fin de la cascade PTME) (6). En juin 2018, la couverture nationale du TARV était de 51,5 % (281 083), incluant 12 362 enfants de moins de 15 ans (6). Concernant la réponse au TAR au Cameroun, nous avons signalé un taux global de suppression virale de 79,4 %, avec des disparités significatives selon les tranches d'âge : 81,1 % chez les adultes, 75,6 % chez les enfants et seulement 53,3 % chez les adolescents âgés de 10 à 19 ans (7). À l’instar des rapports de l’ONUSIDA, les adolescents vivant avec le VIH (ADLHIV) représentent la population la plus vulnérable et la plus mal desservie en réponse aux épidémies(1, 5). Pour une croissance plus sûre vers l’âge adulte, il est nécessaire de donner la priorité à cette population dans la recherche de stratégies de traitement innovantes garantissant son bien-être et sa contribution au développement de l’ASS.

Malgré les avantages incontestés du TAR, les stratégies de traitement actuelles présentent des limites. Il convient de noter que la nature permanente du TAR actuel s'accompagne de défis liés à l'observance pour la plupart des patients, que les toxicités attribuées au TAR et le dysfonctionnement immunitaire persistant ont des conséquences significatives sur la santé, et que la résistance aux médicaments du VIH (VIHDR) est en augmentation, principalement dans les pays d'ASS où la plupart des patients expérimentés sous TAR sont confrontés à des problèmes de santé. les patients sont en vie (8). Il existe une menace d’émergence d’une nouvelle épidémie de VIH, entraînée par la lutte antirétrovirale contre les antirétroviraux existants. Ces défis sont particulièrement vrais pour les populations pédiatriques en raison des options limitées de TAR, des formulations médicamenteuses médiocres et de l'augmentation des cas de non-observance à mesure qu'elles grandissent vers l'adolescence. Ces défis nécessitent des approches vers une guérison (fonctionnelle) ou une rémission du VIH, en particulier pour les populations les plus vulnérables (c.-à-d. ADDLHIV) (7, 9).

Les concepts qui sous-tendent le projet, y compris les idées et les modèles ou hypothèses, les stratégies de rémission ou d'éradication du VIH-1 visent à obtenir une rémission virale en l'absence de thérapie antirétrovirale (TAR). Le développement d’un remède contre le VIH-1 reste un défi en raison des réservoirs latents. Le réservoir latent (LR) du VIH-1 peut être défini comme la fraction de cellules hébergeant un ADN proviral transcriptionnellement silencieux et capables de produire des virions infectieux après activation (10). Les cellules CD4T à mémoire de repos sont l'hôte principal du LR, mais l'infection par le VIH-1 dans ces cellules est inefficace en raison de la faible expression de leurs co-récepteurs et des restrictions inhérentes à la transcription inverse (11, 12). Néanmoins, il existe des preuves que le VIH-1 peut infecter les cellules CD4T au repos directement ou via une transmission de cellule à cellule, bien que l'infection de ces cellules soit associée à une cinétique de réplication plus lente (13). Alternativement, la latence est établie lorsqu'un sous-ensemble de cellules CD4T activées et infectées revient à un phénotype de mémoire au repos, faisant taire efficacement l'expression des gènes viraux tout en maintenant l'ADN proviral à long terme (14). Le provirus est maintenu dans un état de repos dans ces cellules via des facteurs de l'hôte tels que la suppression épigénétique, l'épuisement des facteurs de transcription tels que NF-κB et l'interférence transcriptionnelle due à l'intégration dans les gènes exprimés, examinés plus en détail (15). Le rebond viral du LR après l'arrêt du TAR est rapide, conduisant à une virémie détectable quelques semaines après l'interruption du traitement (16). De plus, l’initiation du TAR au début de l’infection n’est pas suffisante pour arrêter la formation de la LR, ce qui suggère que la LR est établie et disséminée tôt (Chun et al., 1998 ; Whitney et al., 2014 ; Colby et al., 2018), même chez les enfants infectés verticalement qui ont commencé le TAR peu après la naissance (17). Le réservoir latent est stable malgré des années de TAR suppressif et est à l’origine d’un rebond de virémie suite à l’interruption du traitement. Les cellules infectées de manière latente représentent donc le principal obstacle à la guérison du VIH-1 et devraient être spécifiquement ciblées par de nouvelles stratégies de traitement et d'éradication.

Les progrès vers le développement d’un traitement fonctionnel ou stérilisant contre le VIH-1 ont été considérablement entravés par la présence du LR. Actuellement, deux personnes ont été guéries de l'infection par le VIH-1, les patients dits de Berlin et de Londres, qui, depuis qu'ils ont reçu des greffes de cellules souches allogéniques de donneurs CCR5?32/?32, ont systématiquement été testés négatifs pour le rebond viral pendant plus de 10 et 2 ans. ans, respectivement, sans TAR (18). Dans ces cas, le pool de cellules infectées a été considérablement épuisé lors du conditionnement avant la transplantation et remplacé par des cellules de donneur résistantes à l'infection par le virus à tropisme R5 en raison d'une délétion importante du co-récepteur CCR5 (19). En raison du manque relatif de donneurs de CCR5 ?32/?32 et des circonstances uniques prédéterminant ces cas, ce type de guérison n'est pas réalisable pour une utilisation généralisée ; il met cependant l'accent sur le principe de base de la guérison du VIH-1 ; faire taire ou éradiquer le VIH-1 LR (20). Au cours de la dernière décennie, la compréhension de l’endroit et de la manière dont le VIH persiste chez les personnes sous TAR s’est considérablement transformée grâce à la preuve que le virus persiste dans de multiples types de cellules et sites tissulaires, ainsi que dans des cellules infectées de longue durée, à la fois au repos et en prolifération. Ainsi, dans le cadre d’un traitement suppressif, des estimations précises du réservoir viral contribueraient à une meilleure maîtrise de la persistance virale, ce qui pourrait à son tour surmonter les obstacles existants à la guérison (21).

L’ADN total du VIH est un biomarqueur de référence qui comprend à la fois l’ADN du VIH intégré et non intégré et reflète le niveau global du réservoir viral. Il est important de noter que Buzon et al. ont rapporté une corrélation statistique entre le temps écoulé entre l'infection par le VIH et le début du traitement et le niveau total d'ADN du VIH après 10 ans de traitement continu dans une cohorte d'adultes traités pour la première fois avec une infection précoce (22). Chez les enfants, le taux d’ADN du VIH était nettement plus faible lorsque le contrôle viral était atteint avant l’âge d’un an (23). Par rapport à d’autres marqueurs, l’ADN total du VIH présente l’avantage d’être facilement quantifié par PCR standardisée et sensible en temps réel, y compris la PCR numérique en gouttelettes (ddPCR) (24).

L’activation immunitaire généralisée est une caractéristique de l’infection par le VIH-1. Dans cet état, diverses cellules immunitaires présentent une augmentation de l’expression des marqueurs d’activation, de prolifération et d’apoptose, un renouvellement cellulaire avec une régulation aberrante du cycle cellulaire, une production de cytokines pro-inflammatoires et une fibrose accrue du tissu lymphoïde (25). L'activation immunitaire est fortement associée à la progression de la maladie du VIH-1 ; par exemple, l’activation des lymphocytes T, mesurée par l’expression de CD38 et HLA-DR, est plus prédictive de la déplétion des lymphocytes T CD4+ et d’une survie plus courte que la charge virale plasmatique (26, 27). De plus, le niveau d’activation immunitaire au début de l’infection par le VIH-1, tel que mesuré par l’activation des lymphocytes T CD8+, prédit la perte des lymphocytes T CD4+ indépendamment des taux plasmatiques d’ARN du VIH-1 (28). La suppression de la réplication virale grâce à un traitement antirétroviral (TAR) efficace réduit l’activation immunitaire, mais même les schémas thérapeutiques efficaces sont incapables de réduire les niveaux d’activation immunitaire chez les individus infectés par le VIH aux niveaux observés chez les individus en bonne santé (25). Les enfants infectés par le VIH, même s’ils sont traités avec succès par TAR, seront confrontés toute leur vie à une activation immunitaire élevée. Ainsi, l’évaluation de l’impact potentiel de l’activation immunitaire chronique et de l’inflammation sur le développement du système immunitaire et sur l’évolution de la maladie chez les enfants infectés par le VIH revêt une importance particulière. Des études récentes ont montré que l'activation immunitaire (HLA-DR, CD38) et les marqueurs d'épuisement (Tim-3, PD-1, Lag-3) sont fortement associés à la taille du réservoir chez les adultes traités par TAR. Le réservoir de TAR précoce pourrait également minimiser le niveau d'activation immunitaire et les maladies « vieillissantes » non liées au SIDA associées à une activation immunitaire persistante.

Il existe peu de preuves permettant de caractériser les réservoirs du VIH dans la région de l’Afrique de l’Ouest et du Centre, un contexte géographique présentant une plus grande variabilité dans les souches circulantes du VIH-1 et du VIH-2 (29, 30). Par exemple, le Cameroun, épicentre zoonotique du VIH-1, est l'hôte d'un paysage très diversifié de VIH piloté par le recombinant CRF02_AG, comprenant la plupart des (sous-) sous-types du groupe M, une vaste gamme d'URF et de CRF, et le groupe N, Virus O, P et VIH-2 (31-33). Ainsi, la génération de données de base sur le profil génotypique et quantitatif du réservoir viral dans plusieurs clades du VIH dans un contexte comme le Cameroun éclairerait la conception de stratégies optimales de guérison du VIH. Compte tenu de la vulnérabilité susmentionnée des adolescents atteints d’une infection verticale et des connaissances limitées sur les réservoirs viraux et l’activation immunitaire/réaction inflammatoire dans cette population, les preuves générées à partir de cette cible seront très complémentaires aux efforts mondiaux actuels. De telles preuves, générées dans un contexte de charge élevée de co-infections (34, 35), pourraient décrire des mécanismes différentiels de persistance du VIH, très éloignés de ceux rapportés dans d’autres régions du monde.

Travaux préliminaires :

Dans le cadre de l'étude EDCTP READY en cours, nous avons constitué une cohorte de 292 adolescents verticalement infectés (10-19 ans) recevant un TAR au Cameroun. Dans cette cohorte, nous avons rapporté un taux de 40 % de charge virale indétectable (<40 copies/mL) après une durée médiane de 8 ans de TAR, un taux d'échec immunologique d'environ 20 % (CD4<250 cellules/mm3) et un taux clinique inférieur à 10 %. échec (c'est-à-dire Stades III/IV de l’OMS) (36). Cette population offre une opportunité unique de comprendre la taille et la nature du réservoir, la variabilité du profil de la réponse immunitaire/des cytokines et l'effet du sous-type viral, des antécédents de traitement (schéma et durée du TAR), des disparités entre les sexes et du niveau d'observance sur le contrôle du réservoir viral.

BUT:

Le but de cette étude est de caractériser les réservoirs du VIH et leur variabilité selon les profils virologiques et immunologiques des adolescents infectés verticalement recevant un traitement antirétroviral au Cameroun, et par conséquent, améliorer la compréhension des réservoirs viraux et fournir des données précises et fiables pour la recherche sur la guérison du VIH.

Objectifs spécifiques:

Dans cette étude, nous allons : 1- Déterminer la variabilité génétique du VIH-1 et la résistance aux médicaments dans les réservoirs cellulaires ; 2- Caractériser l'activation/inflammation immunitaire chez les adolescents infectés verticalement par le VIH-1 ; 3- Évaluer la taille du réservoir du VIH ; 4- Évaluer l'effet du traitement antirétroviral et de la réponse immunitaire sur le profil du réservoir viral.

Matériels et méthodes Conception de l'étude Nous prévoyons de mener une étude observationnelle et comparative auprès d'adolescents vivant avec le VIH et recevant un TAR au Cameroun. Les participants seront sélectionnés et inscrits parmi une cohorte existante de près de 300 adolescents verticalement infectés recrutés pour l'étude EDCTP-READY.

L’objectif principal de l’étude EDCTP-READY était d’évaluer la réponse au traitement, la résistance aux médicaments et la variabilité du VIH-1 chez les adolescents sous traitement antirétroviral de première et deuxième intention au Cameroun (7). Dans cette étude, nous avons recruté 296 adolescents séropositifs et comparé le profil génotypique du VIH-1 dans l'ARN circulant. Sur 30 % (89/296) APHI ayant connu un échec virologique (VL>1000 copies/mL).

Méthode d'échantillonnage :

Des échantillons de sang seront prélevés auprès des participants à l'étude EDCTP-READY selon les critères d'éligibilité.

Critère d'éligibilité:

Critère d'intégration : Seront inscrits dans l'étude, les adolescents séropositifs âgés de 10 à 19 ans, infectés verticalement, sont sous TAR depuis au moins 12 mois, qui fournissent leur consentement écrit et dont le tuteur légal fournit un consentement écrit par procuration.

Critères de non-inclusion : Ne sera pas pris en compte pour l'inscription, adolescent séropositif ayant des antécédents incomplets de TAR, co-infections VHB/VHC et paludisme.

Critère d'exclusion : Sera considéré comme exclu de l'étude, tout participant qui décide librement de se retirer après avoir donné son consentement ou incapable de donner un échantillon de sang.

Taille de l'échantillon : La taille minimale de l'échantillon (N) de l'étude est de 90 participants, calculée sur la base de la formule suivante : N=p (1-p) (Zα2/α2) ; N = 0,02(1-0,02) (1,962/0,052) = 30 par bras (bras-A : CV<40 copies/mL ; bras-B : CV 40-999 copies/mL ; bras-C : charge virale ≥1000 copies/mL). P est la prévalence des adolescents vivant avec le VIH au Cameroun avec P=2% [3] ; α étant le risque est en accord avec α = 5 % ; Zα étant le petit écart avec Zα = 1,96.

NB : Un groupe de 30 adolescents séronégatifs servira de contrôle pour le profilage immunologique.

Tous les participants se verront attribuer un nouveau numéro d'identification et les données seront centralisées dans un ordinateur protégé par mot de passe au Centre international de référence Chantal Biya (CIRCB) pour la recherche sur la prévention et la gestion du VIH/SIDA.

Procédures et variables de l'étude Procédures et délais La présente étude nécessite 18 mois pour être complétée : 3 mois (mois 1-3) pour l'approbation administrative et éthique, 12 mois (mois 4 à 15) pour l'inscription des participants, l'échantillonnage et les analyses de laboratoire, 3 mois (mois 16 à 18) pour le traitement des données et le reporting, voir le diagramme de Gantt pour plus de détails.

Sur la base des critères d'inclusion, les formulaires de rapport de cas d'adolescents séropositifs seront sélectionnés dans l'étude EDCTP-READY et leur tuteur légal sera contacté. L'assentiment et le consentement éclairé par procuration seront obtenus respectivement des adolescents et du tuteur légal. Les données sociodémographiques, cliniques et les antécédents de TAR seront à nouveau évalués pour la période d'inscription à l'étude EDCTP-READY. Ensuite, 90 adolescents séropositifs ou plus [30 par bras (bras A : CV<40 copies/mL ; bras-B : CV 40-999 copies/mL ; bras-C : charge virale ≥1 000 copies/mL)] seront inscrits. . Un groupe de 30 adolescents séronégatifs sera inscrit pour servir de contrôle pour le profilage immunologique. Le sang intraveineux (5 ml x 2) sera collecté par un phlébotomiste qualifié pour des analyses de laboratoire, y compris l'isolement des PBMC, l'isolement du plasma et de la couche leucocytaire, le nombre de CD4/CD8, la charge virale plasmatique (PVL), l'activation immunitaire/l'évaluation des marqueurs inflammatoires, l'ARN du VIH et Génotypage ADN-VIH, quantification des réservoirs viraux.

Les participants séronégatifs seront recrutés au CIRCB, cette institution est un Centre de référence pour la prise en charge des personnes infectées par le VIH depuis 2006, et à ce titre est un centre de référence reconnu pour le dépistage du VIH. Sur la base de cet avantage, le CIRCB organise chaque année des tests de dépistage gratuits du VIH/HBV/VHC pour plusieurs institutions et communautés. Par conséquent, une campagne de tests gratuits similaire sera organisée dans une école secondaire voisine et la présente étude sera présentée à ceux qui remplissent les critères d'inclusion. . Les participants potentiels seront invités au CIRCB avec leur tuteur légal pour l'inscription.

Les échantillons seront collectés une seule fois lors de l'inscription ainsi que toutes les données sociodémographiques et cliniques pertinentes. Les échantillons seront transportés au CIRCB le même jour pour l'isolement des PBMC, l'isolement de l'ADN, du plasma et de la couche leucocytaire, le nombre de CD4/CD8 et l'évaluation des marqueurs d'activation/inflammatoire par cytométrie en flux. Le plasma sera collecté et stocké à -80 °C pour la charge virale plasmatique (PVL), le génotypage, l'activation immunitaire/l'évaluation des marqueurs inflammatoires à l'aide de tests ELISA (ou cytométrie en flux). L'ADN-VIH sera ensuite extrait des PBMC et stocké à -80 °C ; L'ADN-VIH sera expédié tous les trois mois au département de médecine expérimentale, Université de Rome Tor Vergata, Rome, Italie, pour la quantification du réservoir viral du VIH (voir lettre de collaboration en annexe).

Procédures de laboratoire Numération des CD4/CD8 : les mesures des CD4/CD8 seront déterminées à l'aide d'un appareil de cytométrie en flux comme décrit précédemment (37).

Charge virale plasmatique : la charge virale plasmatique sera déterminée à l'aide du système en temps réel m 2000rt Abbott comme décrit précédemment (38).

Extraction de l'ARN VIH : l'ARN sera extrait des échantillons de plasma à l'aide du mini kit d'ARN viral Qiamp (Qiagen) comme décrit par le fabricant.

Extraction de l'ADN pro-viral de la couche leucocytaire : L'ADN pro-viral sera extrait à l'aide du kit d'extraction de sang et de tissus DNeasy (Qiagen) tel que décrit par le fabricant.

Isolement des PBMC : les PBMC seront isolées par centrifugation sur gradient de densité à l'aide de Ficoll en utilisant un protocole interne.

Extraction de l'ADN-VIH des PBMC : l'ADN-VIH sera extrait à l'aide du mini kit QIAmp DNA (Qiagen) comme décrit par le fabricant.

Amplification et séquençage des gènes du VIH-1 : le séquençage Sanger pour les tests de résistance aux médicaments du VIH-1 sera effectué pour les adolescents en échec virologique selon un protocole interne, comme décrit précédemment par notre groupe de recherche (39). Les séquences d'ADN de la transcriptase inverse seront analysées pour détecter les mutations de résistance aux médicaments à l'aide de l'algorithme d'interprétation de la résistance génotypique de la base de données de l'Université de Stanford (www.stanford.edu).

Analyse phylogénétique : les arbres phylogénétiques Neighbour Joining seront créés à l'aide du logiciel MEGA (modèle Kimura à 2 paramètres, 200 réplications bootstrap) et FigTree (40, 41).

Profilage immunitaire : les cytokines d'activation immunitaire/inflammatoires (IL-1, IL2, IL4, IL6, IL10, IL12 et TNF-alpha) seront évaluées à l'aide de kits ELISA commerciaux et de cytométrie en flux.

Quantification des réservoirs viraux du VIH : les réservoirs viraux seront quantifiés par PCR numérique en gouttelettes (ddPCR) comme décrit précédemment. Il est à noter que cette quantification sera réalisée dans le département de médecine expérimentale, Université de Rome Tor Vergata, Rome, Italie, comme indiqué dans la lettre de collaboration trouvée en annexe de cette proposition. Un accord de transfert de matériel et de partage de données sera signé entre le CIRCB et UTV avant l'expédition de l'échantillon à UTV. Il s'agit d'un protocole interne pour le sous-type VIH-1 B et sera ajusté pour les sous-types VIH-1 non-B attendus des échantillons camerounais.

Analyse des données Les données collectées au cours de l'étude seront analysées à l'aide du logiciel SPSS. Les facteurs associés seront évalués à l'aide d'une régression logistique multivariée, avec une approche d'estimation de l'effet impartial de différents paramètres. Les données seront rapportées comme médianes. Des tests non paramétriques seront utilisés pour les données non normalement distribuées, des comparaisons des médianes entre différents groupes (succès virologique vs échec virologique) seront effectuées par le test U-Mann-Whitney. Des corrélations seront établies avec le test de Spearman et les valeurs p inférieures à 0,05 seront considérées comme statistiquement significatives.

Considérations éthiques Cette étude sera menée conformément à la déclaration d'Helsinki sur les principes éthiques pour la recherche médicale impliquant des sujets humains. L'autorisation éthique sera obtenue auprès du Comité national d'éthique du Cameroun pour la recherche sur la santé humaine. après un avis éclairé sur l'étude, une procuration écrite sera obtenue du tuteur légal, et un consentement écrit sera également obtenu de l'adolescent séropositif participant, sans aucune coercition. La confidentialité sera assurée grâce à l'utilisation d'identifiants uniques et d'une base de données protégée par mot de passe et ne sera accessible qu'au personnel autorisé. Les participants seront libres de quitter délibérément l'étude à tout moment, sans aucun effet sur leur surveillance de routine à la clinique d'étude. La phlébotomie sera non invasive (ponction veineuse) et sera réalisée par une infirmière qualifiée.

Assurance qualité:

Notre équipe d'étude comprendra un responsable de l'assurance qualité qui sera responsable de toutes les SOP pour le protocole d'étude et gérera les tests de compétence et la validation des données pendant toute la durée de l'étude.

Gestion des risques potentiels : Les risques pour les patients sont minimes puisque la seule procédure à laquelle le volontaire est soumis est une ponction veineuse par un phlébotomiste ou un médecin. La ponction veineuse peut être légèrement douloureuse, mais elle est pratiquement sans risque de complication. Les risques potentiels pour les sujets, dont aucun n'est susceptible de se produire, peuvent inclure une douleur momentanée, des ecchymoses sur le site ou une infection possible (mais extrêmement improbable). Si de telles complications surviennent, le participant recevra un traitement médical d'urgence.