A Clopidogrel biztonságossága és hatékonysága lokálisan előrehaladott és metasztatikus hasnyálmirigy-adenokarcinómában, kemoterápiával kezelve (PANCREADOGREL)

Számos tanulmányt végeztek a rákos betegek VTE kialakulásában szerepet játszó sejtmechanizmusok megértésére. A thrombotikus állapot patogenezise egy daganat jelenlétéhez kapcsolódik, és egy hiperkoaguláns állapot, nevezetesen a koagulopátia kialakulásához kapcsolódik, amely számos előnnyel jár a rákos sejteknek. Valójában mind a koagulációs kaszkád aktiválása, mind a vérlemezkék aggregációja a rákos sejtek körül megvédi magukat az immunválasztól; elősegítik keringésüket a véráramban és adhéziójukat a metasztázis lehetséges helyein. A TF/FVIIa komplex a koaguláció aktiválásában betöltött szerepe mellett a sejthez kötött proteáz aktivált receptorokat (PAR) aktiváló útvonalakat is befolyásolja, ami gyulladásos és angiogén válaszok aktiválásához vezet. Ezenkívül a TF egy oldható változata, amelyet alternatív módon spliced ​​TF (asTF) néven ismernek, az FVIIa-tól függetlenül stimulálja az angiogenezist. Ez egy olyan modellhez vezet, amelyben a szöveti faktor (TF) jelenléte, a trombin képződése és a vérlemezkék aktiválása közvetlenül részt vesz a rák progressziójában és terjedésében. A TF jelenléte és a vérlemezkék aktiválódása részt vesz a daganat progressziójában.

Egy retrospektív tanulmány klinikai információkat és plazmamintákat gyűjtött 117 hasnyálmirigy- vagy eperákos betegről, amelyek 68%-a hasnyálmirigyrák és 29%-a eperák volt. Trombózisos események 52 (44,4%) betegnél fordultak elő. Az átlagos és medián szöveti faktor minden betegnél 2,15 pg/ml, illetve 1,20 pg/ml volt (tartomány: 0,17-31,01 pg/ml). Az emelkedett szöveti faktor szint szignifikánsan összefüggött a VTE eseményekkel (P=0,04), az emelkedett szöveti faktor szint pedig rosszabb általános túléléssel (kockázati arány, HR: 1,05; P=0,01).

Ez a prokoaguláns állapot oka lehet az aktív TF és transzmembrán fehérjék (PSGL-1, Muc1, …) maga a rákos sejt vagy a rákos sejtből származó mikrorészecskék általi expressziója, amelyek a vérlemezkék aktivációjához és aggregációjához vezetnek. Miközben a TF-et hordozó ráksejt-eredetű mikrorészecskék kulcsfontosságú szerepét tanulmányozták a rákkal összefüggő trombózisban, a kutatók korábban kimutatták (Dubois C, INSERM UMR 1076 Marseille), hogy mind endogén módon, mind exogén injektált hasnyálmirigyrák sejtből származó, TF-et (PancO2) expresszáló mikrorészecskéket. , de nem a szülői daganatsejtjeik, amelyek a sérülés helyén P-szelektin-függő módon halmozódtak fel. Jelenlétük közvetlenül korrelál a thrombus méretével. Ezen adatok alapján a kutatók először azt feltételezték, hogy a véralvadásgátló és/vagy thrombocyta-aggregáció gátló gyógyszerekkel történő kezelés a koagulopátia megelőzése mellett megakadályozhatja a tumor progresszióját és az áttétek kialakulását, valamint a trombózissal összefüggő rák kialakulását.

Ezután Dubois és munkatársai összehasonlították a thrombocyta-aktiválást gátló Clopidogrel és a koaguláns kaszkád aktivációját gátló anyag, az alacsony molekulatömegű heparin (LMWH) hatását a daganat növekedésére és a rákkal összefüggő trombózisra. Az alkalmazott gyógyszerek koncentrációját úgy számítottuk ki, hogy egészséges egerekben lézerrel kiváltott sérülést követően 50%-kal csökkenti a trombusképződést. A tumornövekedés kinetikájának csökkenését figyelték meg a két gyógyszerrel kezelt egerekben a nem kezelt egerekhez képest. 20 nappal a rákos sejtek injekciója után a daganat térfogata 85%-kal, illetve 87%-kal csökkent LMHW vagy Clopidogrel alkalmazásakor. Azonban a tumornövekedés kinetikája és a daganatok térfogata 20 nappal az injekció beadása után hasonló volt a Clopidogrel-lel kezelt egerekben a rákos sejtek által expresszált patológiás TF jelenlétében vagy hiányában.

A rákos sejtből származó mikrorészecskék felelősek az aggregálódó vérlemezkék által expresszált P-szelektin és az aktivált endotélium, valamint a rákos sejtből származó mikrorészecskék felületén jelenlévő PSGL-1 közötti kölcsönhatások révén rákosodó egerekben megfigyelt trombotikus fenotípusért. A sérülés előtt, de a véráramba való bejuttatásuk után exogén jelölt ráksejt-eredetű mikrorészecskéket mutattak ki a nem kezelt vagy Clopidogrel kezelt egerek cremaster mikrokeringésében. Egy sérülést követően azonban a rákos sejtekből származó mikrorészecskék csak a nem kezelt, PancO2-LowTF vagy High TF daganatot hordozó egerekben halmozódtak fel a trombusképződés helyén. A szöveti faktor (TF) egyrészt a koagulációs kaszkád fő effektora, másrészt a szolid tumorok kialakulásában szerepet játszó fehérje. In vivo, lézerrel kiváltott sérülést követően, az endothelfal aktivációja, valamint az aktivált vérlemezkék jelenléte a P-szelektin fő forrása. A sérülés helyén jelenlévő P-szelektin mennyisége 4-szer kisebb volt a PancO2 daganatot hordozó és Clopidogrel-lel kezelt egerekben, mint a nem kezelt egereknél. Érdekes módon a PanCO2 rákos sejtekből származó mikrorészecskék aktív formában expresszálják a TF-et és a TFPI-t (Tissue Factor Inhibitor), a koagulációs kaszkád biológiai inhibitorát. Annak igazolására, hogy a rákos sejtből származó mikrorészecskék részt vehetnek a patológiás TF leállításakor megfigyelt véralvadás gátlásában, a kutatók összehasonlították a fibrinképződést a sérülés helyén PancO2-magas TF és alacsony TF-értékű rákos egerekben. Clopidogrel hiánya.

A fibrinképződés a lézerrel kiváltott sérülés helyén szignifikánsan fontosabb volt (P<0,01) egerekben a Panc02-High TF injekciót követően, mint a vad típusú egereknél. Ezeknek az egereknek a Clopidogrel-lel történő kezelése a vad típusú egereknél megfigyelthez hasonló mértékben csökkentette a fibrintermelést. Amikor a patológiás TF-et leállították, a fibrintermelés erősen csökkent mind a Panc02-sejtekkel injektált egerek csoportjához, mind a vad típusú egerek csoportjához képest. A kutatók arra a következtetésre jutottak, hogy amikor a rákos sejtek és a rákos sejtekből származó mikrorészecskék aktív TF-et expresszálnak, a növekvő trombusba való beépülésük részt vesz a trombotikus fenotípus kialakulásában. Ha a rákos sejtek által expresszált TF-et leállítják, a rákos sejt mikrorészecskéi továbbra is beépülnek a trombusképződés helyére, de csökkenti a TF aktiválódását, gátolja a fibrinképződést és a trombusképződést azáltal, hogy a TFPI-t a sérülés helyére viszi.

A megfigyelések alapján a kutatók azt feltételezték, hogy a vérlemezke-aktiváció gátlása a rákkal összefüggő trombózis és a tumornövekedés csökkentésével érdekes terápia lehet a rák és trombózis kezelésében. A hipotézis tesztelésére a kutatók kidolgozták a hasnyálmirigyrák szingenikus ortoptikus modelljét, és megerősítették, hogy amikor az egereket Clopidogrel-lel vagy Aspirinnel kezelték, az elsődleges daganat növekedése jelentősen csökkent, és a metasztázisok kialakulása korlátozott volt (Mege és mtsai.) . Az aszpirin előnyeit azonban csak akkor figyelték meg egereknél, ha közvetlenül a rák kialakulásakor kezelték őket, például a rákos sejtek injekciózásakor. Éppen ellenkezőleg, a klopidogrél hatásait a daganat méretétől és a daganat kialakulásától vagy kezdetétől függetlenül észlelték, és még akkor is, ha a rák előrehaladott stádiumban volt. A trombocita-ellenes gyógyszerek trombózisra gyakorolt ​​hatásával együtt ezek az eredmények azt mutatják, hogy a Clopidogrel ígéretes terápiás gyógyszer a trombózis korlátozására, valamint a daganatok és áttétek kialakulásának csökkentésére.

A kutatók a kísérleti modellben kimutatták, hogy a rákos sejtek által expresszált TF részt vesz a rákkal kapcsolatos trombózisban és a daganat in vivo növekedésében. A véralvadásban betöltött funkciói mellett a TF-et a citoplazmatikus farkának foszforilációja és filaminhoz való kötődése után is leírták, hogy különböző növekedési faktorok, köztük a VEGF transzkripciós aktiválását váltsák ki. Ez az intracelluláris útvonal részt vehet a daganat növekedésében, de az angiogenezisben is. Ezenkívül a TF expressziójáról beszámoltak arról is, hogy a PAR-1 és PAR-2 ​​aktiválása révén befolyásolja a rákos sejtek motilitását, túlélését és proliferációját, bár ebben a vizsgálatban a Panc02 sejtek proliferációját nem befolyásolta a TF expresszió gátlása. A rákos sejtek ADP, Thromboxane A2 és MMP-2 (Matrix Metallo Proteinase 2) szekretálásával közvetlenül aktiválhatják a vérlemezkéket, és felületükön vérlemezkékhez, például PSGL-1-hez expresszálódnak. A véráramban ez a vérlemezkék aggregációjához vezet a rákos sejtek körül, hogy megvédje azokat az immunrendszer által okozott pusztulástól, a vér nyírási stresszétől, és megkönnyítse a rákos sejtek kölcsönhatását az endotéliummal. Azonban ezen thrombocyta-agonisták közvetlen részvétele in vivo nem bizonyított. Amikor az egereket LMWH-val kezelték, a tumorfejlődésben hasonló csökkenést figyeltek meg, mint a patológiás TF leállításakor. Ezenkívül a Clopidogrel-kezelés nem befolyásolta szignifikánsan a tumor növekedését a Panc02 miRNS TF egerek csoportjában vagy az LMWH-val kezelt Panc02 egerek csoportjában. Ez erősen arra utal, hogy a vérlemezkék aktiválása részt vesz a tumor növekedésében, de arra is, hogy a vérlemezkék fő aktivátora a rákos sejtek által expresszált TF, valamint az ADP és a Thromboxan A2. Ezek a másodlagos agonisták részt vehetnek, ha a trombin által a TF-függő útvonalon keresztül generált thrombocytaaktiváció következményeként szekretálódnak. Végül, nem közvetlenül a daganat növekedésében játszhatnak fontos szerepet, hanem inkább a metasztázisok kialakulásában, amikor a rákos sejteknek jelen kell lenniük a véráramban.