Fattori che influenzano la resa e la vitalità delle cellule rigenerative di derivazione adiposa

Metodo: Abbiamo analizzato 46 pazienti, di entrambi i sessi, che hanno compilato un questionario sulla loro età e abitudini (attività sportiva e fumo). Successivamente sono stati divisi in due gruppi. Il gruppo 1 era composto da pazienti con BMI normale compreso tra 18,5 e 24,9 (n=27) e il gruppo 2 comprendeva pazienti in sovrappeso con indice BMI compreso tra 25 e 29,9 (n=19). Non c'erano pazienti sottopeso o obesi. A tutti i 46 pazienti è stato estratto l'ADRCS per uso terapeutico, ma con indicazioni diverse. La miscela di 180 mL di soluzione salina, 1 mL di epinefrina (1:10.000) e 20 mL di lidocaina al 2% viene iniettata nello strato sottocutaneo della parete addominale per consentire la tumescenza e diminuire la perdita di sangue. La procedura di liposuzione manuale è stata eseguita attraverso due o tre piccole incisioni utilizzando un raccoglitore (Tulip® medical products, San Diego, USA). Tutti sono stati sottoposti a liposuzione dall'autore e nello stesso modo (tecnica tumescente, stessa cannula) per ottenere 120-200 ml di grasso. Il sito di raccolta viene quindi coperto con una medicazione a pressione per 10 giorni per ridurre il gonfiore e l'ematoma. Per raccogliere il campione è stato utilizzato il sistema chiuso PureGraft® 250mL (PureGraft®, Solana Beach, California, USA). Il campione viene trasferito entro 15 minuti al laboratorio della BelPrime Clinic dove il sistema Celution® 800/CRS (Cytori Therapeutics, Inc. San Diego, California, USA) viene applicato per elaborare il lipoaspirato al fine di ottenere ADRC. Il sistema Celution® 800/CRS è un dispositivo medico automatizzato chiuso che aiuta a separare sangue e grasso. Il sistema digerirà quindi il grasso utilizzando il reagente enzimatico proprietario Celase 835/CRS (Cytori Therapeutics, Inc. San Diego, California, USA) per rilasciare la frazione vascolare stromale (SVF). SVF viene successivamente concentrato mediante una breve centrifugazione e quindi cicli di lavaggio automatizzati per ottenere la frazione ADRC. Questo processo da 90 a 120 minuti fornisce circa 5 ml di pellet. Alcune gocce del pellet ottenuto sono state immediatamente utilizzate per il conteggio delle cellule (ChemoMetec A/S DK-3450, Allerod, Danimarca).

Risultati/Complicazioni: Numero di ADRCS ottenuti, vitalità cellulare, ADRCS vitali per grammo di grasso processato, ADRCS per dose attiva e volume totale per la terapia cellulare sono stati analizzati statisticamente in correlazione con BMI, attività sportiva, sesso, età e abitudine al fumo dei pazienti e la quantità di grasso trasformato.