DIAgnostica per la tubercolosi multiresistente in Africa (DIAMA)

Lo studio proposto DIAMA (DIAgnostics for Multidrug resistant tuberculosis in Africa) mira a colmare le attuali lacune nella diagnosi e nella gestione dei pazienti con tubercolosi multiresistente ai farmaci (MDR). Basandosi su reti esistenti e collaborazioni di ricerca precedentemente finanziate dall'European & Developing Countries Clinical Trials Partnership (EDCTP), questo progetto ha coinvolto partner nell'Africa occidentale, centrale e orientale. Ha lo scopo di valutare e implementare test molecolari rapidi e accurati per diversi farmaci antitubercolari, per sostituire l'attuale dipendenza dai test fenotipici di resistenza ai farmaci, che richiedono fino a 4 mesi ed è tecnicamente così impegnativo che pochi laboratori possono eseguirlo correttamente.

Il progetto si basa sulla sorveglianza continua dei pazienti sottoposti a ritrattamento della tubercolosi per la resistenza alla rifampicina. Due partner africani (Benin e Ruanda) con laboratori molecolari avanzati stanno istituendo laboratori di riferimento per il test "Deeplex", una nuova piattaforma diagnostica di resistenza ai farmaci basata sul sequenziamento profondo multiplex che fornisce contemporaneamente informazioni sulla sequenza dei geni che conferiscono resistenza a diversi farmaci chiave contro la tubercolosi . I partner stanno reclutando tutti i pazienti con tubercolosi resistente alla rifampicina e un sottogruppo di quelli con tubercolosi sensibile alla rifampicina. In una prima fase, l'espettorato verrà spedito per il dosaggio Deepplex, per il confronto con il DST fenotipico, il metodo di riferimento per rilevare la resistenza ai farmaci di 1a e 2a linea. Inoltre, poiché Whole Genome Sequencing è il "riferimento" dei test molecolari, anche il Deepplex assay sarà validato nuovamente per questo test. In una seconda fase, saranno convalidati anche i test Cepheid 2nd line Xpert e Molbio Truenat, due test "a bassa tecnologia" nelle ultime fasi delle validazioni di laboratorio. La cartuccia di seconda linea Cepheid Xpert può essere implementata nelle macchine Xpert esistenti utilizzate per i test Xpert MTB/Rif. Questi test verranno confrontati con il dosaggio Deepplex e con il WGS

Utilizzando gli ultimi progressi nel software DataTocare sviluppato da uno dei partner del progetto, i risultati molecolari saranno comunicati in tempo reale ai programmi nazionali per la tubercolosi, in modo che i pazienti affetti da tubercolosi multiresistente ai farmaci possano iniziare rapidamente un trattamento appropriato. Il valore aggiunto di questo sistema sarà valutato come studio pilota in alcuni siti.

Infine, una volta che i pazienti hanno iniziato il trattamento MDR, saranno monitorati per il successo del trattamento mediante approcci alternativi più rapidi alle colture mensili raccomandate dall'OMS: campioni seriali di espettorato saranno sottoposti a microscopia della colorazione vitale con fluoresceina diacetato (FDA), misurazione della carica batterica utilizzando Xpert MTB /Rif nonché precursore della misurazione dell'RNA ribosomiale (pre-rRNA).

Insieme, si prevede che questi progressi miglioreranno notevolmente la prognosi attualmente infausta della MDR-TB nei sistemi sanitari in contesti poveri di risorse.