Efficacia della banda Reza per il trattamento del reflusso laringofaringeo

Proponiamo uno studio prospettico di coorte. Saranno inclusi sessanta pazienti di età ≥ 18 anni che si presentano al nostro ambulatorio di laringologia con LPR, con un RFS ≥ 7 e un RSI ≥ 13, non in terapia anticoagulante, in grado di tollerare un'endoscopia e il consenso a partecipare a questo studio di ricerca. Lo studio sarà composto da due coorti. La coorte uno riceverà cure standard (n = 30) e la coorte due riceverà cure standard più la fascia Reza (da indossare come raccomandato dal produttore; n = 30). I pazienti verranno assegnati a una delle coorti, in base alle loro preferenze.

Due campioni bioptici della laringe (cricoide posteriore) (uno per pepsina ELISA e l'altro per qPCR per IL -1β, -6 e -8 citochine infiammatorie) e un campione di saliva faringea (per pepsina ELISA) saranno prelevati prima e dopo il trattamento ( 12 settimane) in un ambiente clinico ambulatoriale. L'RSI, un questionario sulla gravità dei sintomi riferiti dal paziente, verrà somministrato in clinica prima e dopo il trattamento. (36) I pazienti verranno istruiti a tossire e schiarirsi la gola per fornire un campione di saliva prima dell'endoscopia. L'RFS (37) sarà ottenuto dai medici dello studio durante l'endoscopia ambulatoriale prima della biopsia. I campioni di biopsia e saliva non identificati saranno trasportati al laboratorio di ricerca su ghiaccio e conservati a -80 prima delle analisi mediante ELISA e qPCR.

Pepsin ELISA Una biopsia per soggetto sarà omogeneizzata in tampone di lisi dell'urea e la concentrazione proteica totale determinata come precedentemente descritto (28). I campioni di saliva saranno eliminati mediante breve centrifugazione. Verrà eseguito il test di immunoassorbimento enzimatico a sandwich indiretto non competitivo descritto in precedenza (35) per rilevare la pepsina nell'omogenato bioptico e nella saliva.

L'RNA qPCR sarà estratto da una seconda biopsia, DNAsed e retrotrascritto come descritto (38). La reazione a catena della polimerasi in tempo reale sarà eseguita in un sistema Viaa7 Real Time PCR utilizzando saggi di espressione genica Taqman mirati a IL -1β, -6 e -8 e al gene housekeeping HPRT1 (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA).

Questo studio pilota aprirà la strada agli studi clinici di una terapia tanto necessaria per il reflusso delle vie aeree. Se l'ipotesi si dimostra vera e la banda Reza risolve la pepsina e le citochine infiammatorie e migliora significativamente i segni endoscopici (RFS) e i sintomi (RSI) della LPR, questi dati supporteranno anche uno studio clinico per valutare l'utilità della banda Reza nella prevenzione del reflusso postumi di malattie infiammatorie e neoplastiche della laringe. A nostra conoscenza, questo è il primo studio che utilizzerà la pepsina come misura di esito primario; si ritiene che sia un biomarcatore sensibile e specifico per il reflusso e l'aspirazione.

I campioni di biopsia e saliva non identificati saranno trasportati al laboratorio di ricerca su ghiaccio e conservati a -80 gradi C prima delle analisi mediante ELISA e qPCR. I campioni di tessuto e saliva saranno etichettati con il numero ID dello studio del paziente e la data di raccolta.