Eficácia da Reza Band para o Tratamento do Refluxo Laringofaríngeo

Propomos um estudo de coorte prospectivo. Sessenta pacientes ≥ 18 anos de idade que se apresentam em nosso ambulatório de laringologia com RLF, com RFS ≥ 7 e RSI ≥ 13, sem anticoagulantes, capazes de tolerar uma endoscopia e consentir em participar deste estudo de pesquisa serão incluídos. O estudo será composto por duas coortes. A coorte um receberá cuidados padrão (n = 30) e a coorte dois receberá cuidados padrão mais a Reza Band (a ser usada conforme recomendado pelo fabricante; n = 30). Os pacientes serão designados para qualquer uma das coortes, com base em suas preferências.

Duas amostras de biópsia laríngea (cricóide posterior) (uma para pepsina ELISA e outra para qPCR para citocinas inflamatórias IL-1β, -6 e -8) e uma amostra de saliva da garganta (para pepsina ELISA) serão obtidas pré e pós-tratamento ( 12 semanas) em um ambiente de clínica ambulatorial. O RSI, um questionário de gravidade dos sintomas relatados pelo paciente, será administrado na clínica antes e depois do tratamento. (36) Os pacientes serão instruídos a tossir e limpar a garganta para fornecer uma amostra de saliva antes da endoscopia. O RFS (37) será obtido pelos médicos do estudo durante a endoscopia no consultório antes da biópsia. Amostras de biópsia e saliva não identificadas serão transportadas para o laboratório de pesquisa em gelo e armazenadas a -80 antes das análises por ELISA e qPCR.

Pepsina ELISA Uma biópsia por indivíduo será homogeneizada em tampão de lise de ureia e a concentração de proteína total determinada conforme descrito anteriormente (28). As amostras de saliva serão limpas por breve centrifugação. Ensaio imunossorvente ligado a enzima sanduíche indireto não competitivo descrito anteriormente (35) será realizado para detectar pepsina em homogeneizado de biópsia e saliva.

O RNA qPCR será extraído de uma segunda biópsia, DNAsed e transcrição reversa como descrito (38). A reação em cadeia da polimerase em tempo real será realizada em um sistema de PCR em tempo real Viaa7 usando Taqman Gene Expression Assays visando IL -1β, -6 e -8 e o gene doméstico HPRT1 (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA).

Este estudo piloto abrirá caminho para ensaios clínicos de uma terapia muito necessária para o refluxo das vias aéreas. Se a hipótese for verdadeira e o Reza Band resolver a pepsina e as citocinas inflamatórias e melhorar significativamente os sinais endoscópicos (RFS) e os sintomas (RSI) do RLF, esses dados também apoiarão um ensaio clínico para avaliar a utilidade do Reza Band na prevenção do refluxo - sequelas inflamatórias e neoplásicas da laringe atribuídas. Até onde sabemos, este é o primeiro estudo que usará a pepsina como medida de desfecho primário; acredita-se que seja um biomarcador sensível e específico para refluxo e aspiração.

Amostras de biópsia e saliva não identificadas serão transportadas para o laboratório de pesquisa em gelo e armazenadas a -80 graus C antes das análises por ELISA e qPCR. As amostras de tecido e saliva serão rotuladas com o número de identificação do estudo do paciente e a data da coleta.