Ipertermia maligna nella Repubblica Ceca: descrizione del più grande gruppo slavo di pazienti indagati per il rischio di ipertermia maligna (MHCZECH)

Abbiamo valutato ogni rinvio al centro MH dal 2002 in poi. I risultati dell'IVCT, i dati clinici, la storia personale e familiare e i dati genetici molecolari, sono stati registrati in una cartella clinica elettronica. I potenziali pazienti MHS, probandi, sono stati studiati secondo le raccomandazioni del gruppo europeo di ipertermia maligna (EMHG) utilizzando lo screening delle varianti di sequenza IVCT e/o RYR1 e CACNA1S. Ogni probando è un rappresentante di una famiglia non imparentata. Poiché le linee guida diagnostiche stavano cambiando nel tempo, così è stato il nostro algoritmo diagnostico con lo sviluppo di nuove conoscenze e metodi.

Originariamente prima del 2015, per ogni probando o il parente più prossimo nel caso in cui il caso indice non potesse essere testato, MH deve essere confermato/escluso da IVCT. Solo con un risultato positivo IVCT positivo (MHS, MHEh, MHEc), è stata originata la diagnosi genetica.

iNel 2015 è stata emessa una nuova linea guida EMHG per la diagnosi di MH che ha spostato in modo significativo la diagnosi del DNA di MH in prima linea e abbiamo iniziato a utilizzare i test genetici come primo passo diagnostico. Non trovare la variante diagnostica non esclude la suscettibilità all'MH e l'IVCT deve seguire per la diagnosi finale. IVCT ha fornito secondo le migliori pratiche e le linee guida EMGH.

Finora, la diagnosi genetica di MH nella Repubblica Ceca è avvenuta in più fasi, a partire dal punteggio standard di 33 varianti diagnostiche causali più comuni del gene RYR1 utilizzando l'amplificazione della sonda dipendente dalla ligazione multipla (MLPA) (SALSA MLPA probemix P281- A3/P282-A3 RYR1, MRC Olanda). In caso di risultato negativo, è seguita l'analisi della sequenza diretta delle sezioni del gene RYR1 e CACNA1S, dove si verificano le restanti varianti diagnostiche causali. Dal 2021 l'MLPA e il sequenziamento diretto delle regioni dei punti caldi di RYR1 e CACNA1S sono stati regolarmente sostituiti dal sequenziamento di nuova generazione (NGS) a livello di un pannello di geni associati a malattie neuromuscolari (inclusi RYR1, CACNA1S e STAC3).