Metodo del chip microfluidico rispetto al metodo di centrifugazione in gradiente di densità nella fecondazione in vitro

Lo studio confronterà l'uso di un chip microfluidico con l'uso della centrifugazione in gradiente di densità per la preparazione dello sperma.

L'ipotesi dello studio è che l'uso del chip microfluidico migliorerà il tasso cumulativo di nati vivi della fecondazione in vitro rispetto al metodo del gradiente di densità.

La sperimentazione sarà condotta presso il Centro di riproduzione assistita ed embriologia del Queen Mary Hospital e del Kwong Wah Hospital. Le pazienti infertili sottoposte a trattamento di fecondazione in vitro verranno reclutate durante la stimolazione ovarica. Verranno assegnati in modo casuale a uno dei due gruppi: il gruppo del chip microfluidico o il gruppo del gradiente di densità. Sia i pazienti che i medici saranno all'oscuro dell'assegnazione del gruppo.

I criteri di inclusione per lo studio sono donne infertili di età inferiore a 43 anni sottoposte a stimolazione ovarica per fecondazione in vitro. I criteri di esclusione includono donne sottoposte a determinati test genetici, infertilità da fattore maschile che richiede il prelievo chirurgico di sperma, l'uso di ovociti e spermatozoi di donatori, alcune condizioni uterine, precedente partecipazione allo studio e partecipazione ad altri studi randomizzati.

Le donne idonee verranno sottoposte a procedure di fecondazione in vitro standard, tra cui la stimolazione ovarica, il monitoraggio della crescita dei follicoli, l'attivazione del recupero degli ovociti e il recupero degli ovociti stessi. Il giorno del prelievo degli ovociti, le donne verranno assegnate in modo casuale al gruppo con chip microfluidico o al gruppo con gradiente di densità per la preparazione dello sperma.

I campioni di sperma verranno raccolti il ​​giorno del prelievo degli ovociti e valutati secondo le linee guida standard. Il danno al DNA spermatico sarà valutato anche utilizzando un test di elettroforesi su gel alcalino unicellulare. A seconda della randomizzazione, i campioni di sperma verranno preparati utilizzando il chip microfluidico o il metodo di centrifugazione in gradiente di densità.

Dopo la preparazione dello sperma, gli ovociti verranno fecondati mediante inseminazione convenzionale o iniezione intracitoplasmatica di sperma. La fecondazione sarà confermata dalla presenza di due pronuclei. Il trasferimento di embrioni freschi verrà eseguito 2-5 giorni dopo il prelievo degli ovuli e verrà fornito il supporto della fase luteinica. Un numero eccessivo di embrioni o blastocisti di buona qualità verranno crioconservati per un uso futuro.

Nel caso del trasferimento di embrioni congelati, gli embrioni o le blastocisti verranno sostituiti nei successivi cicli di sostituzione naturale o ormonale. La gravidanza sarà confermata da un test di gravidanza sulle urine e verrà eseguita un'ecografia transvaginale per confermare la vitalità e il numero di feti.

Verrà condotto un follow-up per recuperare i dati sulla gravidanza e sul parto. Verrà calcolato il tasso cumulativo di nati vivi e gli esiti della gravidanza, compresi il peso alla nascita e le complicanze ostetriche, verranno registrati e confrontati tra i due gruppi.

Lo studio continuerà fino all'utilizzo di tutti gli embrioni o blastocisti crioconservati o fino a quando le partecipanti non rimarranno incinte entro 6 mesi dalla randomizzazione. Le complicanze della gravidanza e le anomalie congenite saranno monitorate attraverso le cartelle cliniche o il contatto con il paziente.

In definitiva, lo studio mira a determinare se l’uso del chip microfluidico migliora il tasso cumulativo di natalità viva della fecondazione in vitro rispetto al metodo del gradiente di densità.