Método de chip microfluídico versus método de centrifugação com gradiente de densidade em fertilização in vitro

O ensaio irá comparar o uso de um chip microfluídico com o uso de centrifugação em gradiente de densidade para preparação de esperma.

A hipótese do estudo é que o uso do chip microfluídico melhorará a taxa cumulativa de nascidos vivos de fertilização in vitro em comparação com o método do gradiente de densidade.

O ensaio será realizado no Centro de Reprodução Assistida e Embriologia do Hospital Queen Mary e do Hospital Kwong Wah. Pacientes inférteis submetidos a tratamento de fertilização in vitro serão recrutados durante a estimulação ovariana. Eles serão atribuídos aleatoriamente a um de dois grupos: o grupo de chips microfluídicos ou o grupo de gradiente de densidade. Tanto os pacientes quanto os médicos não terão conhecimento da alocação do grupo.

Os critérios de inclusão para o estudo são mulheres inférteis com menos de 43 anos submetidas à estimulação ovariana para fertilização in vitro. Os critérios de exclusão incluem mulheres submetidas a certos testes genéticos, infertilidade por fator masculino que requer recuperação cirúrgica de espermatozóides, uso de oócitos e espermatozóides de doadores, certas condições uterinas, participação anterior no estudo e participação em outros ensaios randomizados.

As mulheres elegíveis serão submetidas a procedimentos padrão de fertilização in vitro, incluindo estimulação ovariana, monitoramento do crescimento folicular, gatilho para recuperação de oócitos e a própria recuperação de oócitos. No dia da retirada dos oócitos, as mulheres serão designadas aleatoriamente ao grupo de chips microfluídicos ou ao grupo de gradiente de densidade para preparação de esperma.

Amostras de sêmen serão coletadas no dia da retirada do oócito e avaliadas de acordo com as diretrizes padrão. Os danos ao DNA do esperma também serão avaliados usando um ensaio de eletroforese em gel alcalino unicelular. Dependendo da randomização, as amostras de esperma serão preparadas usando o chip microfluídico ou o método de centrifugação em gradiente de densidade.

Após a preparação do esperma, os oócitos serão fertilizados por meio de inseminação convencional ou injeção intracitoplasmática de esperma. A fertilização será confirmada pela presença de dois pró-núcleos. A transferência de embriões frescos será realizada 2 a 5 dias após a retirada do óvulo, e será fornecido suporte para a fase lútea. O excesso de embriões ou blastocistos de boa qualidade será criopreservado para uso futuro.

Para transferência de embriões congelados, os embriões ou blastocistos serão substituídos em ciclos subsequentes de reposição natural ou hormonal. A gravidez será confirmada por um teste de urina para gravidez e uma ultrassonografia transvaginal será realizada para confirmar a viabilidade e o número de fetos.

O acompanhamento será realizado para recuperar dados de gravidez e parto. A taxa cumulativa de nascidos vivos será calculada e os resultados da gravidez, incluindo peso ao nascer e complicações obstétricas, serão registrados e comparados entre os dois grupos.

O estudo continuará até que todos os embriões ou blastocistos criopreservados sejam usados ​​ou até que as participantes engravidem dentro de 6 meses após a randomização. As complicações na gravidez e anomalias congênitas serão monitoradas por meio de prontuário hospitalar ou contato com o paciente.

Em última análise, o estudo visa determinar se o uso do chip microfluídico melhora a taxa cumulativa de nascidos vivos de fertilização in vitro em comparação com o método do gradiente de densidade.