Effetti dei prodotti lattiero -caseari fermentati sui cambiamenti di defecazione attraverso il microbiota intestinale

Questo studio clinico a sede singolo, in doppio cieco, parallelo ha valutato l'impatto di un latte fermentato contenente probiotici consumati quotidianamente per 4 settimane sui modelli di defecazione e la composizione del microbioma intestinale negli adulti sani. Abbiamo reclutato partecipanti di età compresa tra 20 e 65 anni che non avevano malattie gastrointestinali e che non stavano assumendo farmaci per sintomi digestivi (ad esempio, inibitori dell'acido gastrico, antibiotici, farmaci per sterilizzazione o agenti antidiarrheal) nel mese prima dell'arruolamento. Ai partecipanti è stato vietato consumare alimenti probiotici, integratori o prodotti lattiero-caseari fermentati tranne quelli che sono stati forniti durante lo studio di 6 settimane. Ogni partecipante ha completato per la prima volta un periodo di adattamento di 2 settimane (n = 22). Successivamente, ciascun partecipante è stato assegnato in modo casuale a un gruppo di controllo o di intervento. I partecipanti hanno ricevuto due porzioni giornaliere da 200 g di un latte fermentato a probiotico o un prodotto lattiero-caseario di controllo per 4 settimane. Il prodotto di intervento conteneva 2 × 109 unità di formazione delle colonie (CFU)/ml di Lactobacillus acidophilus e Bifidobacterium lactis, insieme a due colture di avviamento di Streptococcus thermophilus e L. bulgaricus. Al gruppo di intervento è stata somministrata una dose mediana di probiotici giornalieri di 3 × 108 CFU (intervallo di confidenza al 95% [CI]: 1 × 109 a 3 × 1010 CFU) in 112 ml di latte fermentato al giorno (IC 95%: 100-187,5 ml/giorno). Un consenso scritto è stato ottenuto da ciascun partecipante prima dell'inizio di questo studio. Il protocollo di prova controllato randomizzato è stato approvato dal Comitato di revisione istituzionale congiunto della Taipei Medical University, Taiwan (N202101006 e N202110014).

Le caratteristiche di base e le registrazioni alimentari antropometriche e di misurazione del sangue sono stati raccolti al basale e dopo 4 settimane di intervento. Questi includevano peso corporeo, altezza, indice di massa corporea, profilo lipidico e livelli di marcatori della funzione epatica. I registri alimentari di tre giorni (due giorni feriali e un giorno del fine settimana) sono stati raccolti al basale e durante ciascuna delle 4 settimane di intervento per monitorare le abitudini dietetiche dei partecipanti.

La frequenza di defecazione e i sintomi di costipazione poiché i soggetti selezionati erano individui sani, la frequenza di defecazione a settimana e i punteggi della scala delle feci di Bristol sono stati valutati utilizzando un questionario somministrato ai partecipanti.

Analisi del microbiota fecale I campioni fecali sono stati raccolti al basale e dopo l'intervento. Abbiamo usato mezzi selettivi, preparati come descritto altrove, per analizzare le concentrazioni di Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., C. perfringens e organismi coliformi nei campioni fecali. Cinque partecipanti sono stati selezionati casualmente da ciascun gruppo e le loro composizioni di microbioma sono state analizzate utilizzando il sequenziamento di rRNA 16S. In breve, il DNA genomico batterico è stato isolato dai campioni di feci dei partecipanti utilizzando il mini kit di sgabelli DNA Qiaamp (Qiagen, Germania) e la regione V3-V4 dei geni batterici di rRNA 16S è stata amplificata usando primer universali (341F e 805R). Le letture accoppiate demultiplessed sono state elaborate utilizzando il software Cutadapt, v1.12 (doi: 10.14806/ej.17.1.200), e le letture filtrate sono state analizzate utilizzando il pacchetto DADA2, v1.3.5, nel software R, v3.3.3, a seguito del flusso di lavoro proposto da Callahan et al. ma senza rarefinire.