Omega-3 a Lungo Termine e Indice Omega-3 >8%: Effetti sul Recupero Fisiologico (IMPROVE-8)

La ricerca proposta seguirà metodi quantitativi utilizzando un disegno randomizzato a gruppi indipendenti. I partecipanti verranno assegnati a una delle due condizioni: un gruppo placebo o un gruppo di integrazione con olio di pesce. Tutti i test si svolgeranno presso i Performance Labs dell'Università di St. Mary's.

Screening e idoneità

Alla prima visita, i partecipanti forniranno il consenso informato e compileranno un modulo PAR-Q. Lo screening di idoneità includerà la conferma che i partecipanti abbiano un indice Omega-3 ≤ 5%, valutato tramite un campione di sangue capillare da puntura del dito essiccato. I campioni vengono elaborati da OmegaQuant nel loro laboratorio di Stirling e i risultati vengono generalmente restituiti entro una settimana.

I partecipanti verranno anche esclusi se attualmente consumano ≥1 g/giorno di integratori di olio di pesce.

Randomizzazione e mascheramento

I partecipanti idonei verranno assegnati casualmente a uno dei due gruppi sperimentali utilizzando un generatore di numeri casuali (https://www.random.org). Lo studio seguirà un disegno in doppio cieco: i partecipanti non sapranno quale integratore ricevono e i ricercatori principali coinvolti nella raccolta dei dati rimarranno anch'essi in cieco. La distribuzione degli integratori e qualsiasi aggiustamento del dosaggio saranno condotti da un membro separato del team di ricerca che non è in cieco e non è coinvolto nel test dei partecipanti o nell'analisi dei dati.

Test di screening/familiarizzazione

Una volta disponibili i risultati dell'indice Omega-3, i partecipanti idonei torneranno in laboratorio per lo screening fisiologico/familiarizzazione con la batteria di test e per ricevere i loro integratori. Le procedure di screening/familiarizzazione includono:

• Un test incrementale su tapis roulant, partendo da 8 km·h⁻¹ e aumentando di 1 km·h⁻¹ ogni 3 minuti fino all'esaurimento volontario. Durante il test verranno effettuate le seguenti misurazioni:
• Campionamento del lattato nel sangue capillare (dito o lobo dell'orecchio) ogni 3 minuti.
• Analisi respiratoria continua respiro per respiro utilizzando l'analizzatore di gas online Vyntus.
• Monitoraggio della frequenza cardiaca (Polar H10) e Scala dello Sforzo Percepito (RPE; scala di Borg).

La sessione di screening introduce anche i partecipanti alla batteria di test illustrata nella Figura 3.

Fase di integrazione (Parte A)

Ai partecipanti verrà chiesto di astenersi da:

• Alcol per 48 ore prima di ogni sessione di test.
• Caffeina per 12 ore prima di ogni sessione di test.

I partecipanti consumeranno i loro integratori assegnati quotidianamente per quattro mesi. I ricercatori contatteranno i partecipanti circa ogni quattro settimane per valutare l'aderenza e distribuire ulteriori scorte di integratori.

A due mesi, un secondo campione di sangue capillare essiccato valuterà se i livelli di Omega-3 nel gruppo olio di pesce stiano aumentando come previsto. Se necessario, l'integrazione verrà adattata utilizzando il calcolatore OmegaQuant (https://omegaquant.com/omega-3-index-calculator/). Gli aggiustamenti comporteranno tipicamente variazioni di circa 0,5 g/giorno (EPA + DHA).

Per mantenere il doppio cieco, anche i dosaggi del placebo verranno alterati di ±0,5 g/giorno, garantendo che sia il ricercatore che il partecipante rimangano all'oscuro dell'assegnazione del gruppo.

Dopo quattro mesi, i partecipanti forniranno un altro campione di sangue essiccato. L'obiettivo è che il gruppo olio di pesce raggiunga un indice Omega-3 ≥ 8%. I partecipanti che non raggiungono il loro obiettivo continueranno l'integrazione per ulteriori 2-4 settimane, seguite da un altro esame del sangue, fino al raggiungimento del livello richiesto. Verrà incorporato un punto di interruzione di ulteriori 6 settimane.

Il completamento di questa fase costituisce la Parte A: la fase di integrazione. Studio sul danno muscolare indotto dall'esercizio (Parte B) Circa una settimana prima della Parte B, i partecipanti torneranno in laboratorio per completare un secondo test incrementale su tapis roulant per determinare la velocità appropriata per il protocollo di corsa in discesa.

I partecipanti si recheranno poi in laboratorio per quattro giorni consecutivi per completare le valutazioni pre e post esercizio associate al protocollo di danno muscolare indotto dall'esercizio.

Lo studio proposto richiede ai partecipanti di assumere integratori di olio di pesce per aumentare il loro indice Omega-3 e indagare se ciò produca benefici sulle prestazioni o sul recupero, oltre agli effetti sulla salute a lungo termine ben stabiliti associati a circa 3 g/giorno di EPA + DHA. L'integrazione con olio di pesce è ampiamente utilizzata sia in contesti clinici che di salute generale ed è considerata sicura a dosi fino a 5 g/giorno, come riconosciuto dall'Autorità Europea per la Sicurezza Alimentare.

I partecipanti verranno reclutati per completare la fase di integrazione e prendere parte a un protocollo di danno muscolare indotto dall'esercizio (EIMD). Verranno assegnati casualmente a uno dei due gruppi di studio (olio di pesce o placebo).

L'integratore di olio di pesce sarà fornito da OmegaQuant (https://parasolnutrition.com/product/omega-3-fish-oil/), questo integratore è disponibile in commercio.

Batteria di test:

1. Campioni di sangue venoso I campioni di sangue venoso verranno raccolti per valutare le concentrazioni a riposo di biomarcatori infiammatori e di danno muscolare, inclusi Interleuchina-6 (IL-6), Interleuchina-10 (IL-10), Fattore di Necrosi Tumorale-α (TNF-α), mioglobina, lattato deidrogenasi (LDH) e creatina chinasi (CK). I campioni verranno prelevati da flebotomisti qualificati presso l'Università di St Mary's (Toby Helder, Prof. Charles Pedlar e Dr. Jessica Hill).

   Tutti i campioni venosi verranno conservati a -80°C e successivamente analizzati utilizzando saggi immunoassorbenti legati all'enzima (ELISA). Il prelievo venoso avverrà in tutti i momenti di test richiesti.

2. Test capillare FORD/FORT

   Verranno raccolti campioni di sangue capillare dalla punta del dito (rispettivamente 50 µL e 20 µL) per valutare lo stress ossidativo utilizzando il dispositivo Clini5 (Callegari, Italia):

   • FORT: Test dei Radicali Liberi dell'Ossigeno
   • FORD: Test di Difesa dai Radicali Liberi dell'Ossigeno Questi forniscono una valutazione complessiva dello stato redox. Il dispositivo utilizza reagenti rapidi, pronti all'uso che non richiedono raffreddamento o preparazione manuale. I risultati sono disponibili entro 6 minuti.
3. Test capillare hs-CRP Verrà raccolto un campione capillare di 20 µL dalla punta del dito per misurare la proteina C-reattiva ad alta sensibilità (hs-CRP), un marcatore di infiammazione sistemica. L'analisi verrà eseguita utilizzando l'analizzatore Eurolyser Cube S (Eurolyser, Austria), con risultati disponibili entro 5 minuti.

4. Dolore muscolare percepito

   I partecipanti riporteranno il dolore muscolare utilizzando due scale validate:

   • La Scala Analogica Visiva (VAS)
   • La Scala Borg CR-10 Queste verranno somministrate in tutti i momenti rilevanti.

5. Test di forza massimale (Dinamometro Cybex)

   Forza isocinetica:

   La coppia di picco degli estensori del ginocchio verrà misurata a 60°·s⁻¹ utilizzando un dinamometro isocinetico Cybex. Questo verrà completato in tutti i momenti di test.

6. Trazione isometrica a metà coscia (IMTP) La forza di picco e il tasso di sviluppo della forza verranno valutati utilizzando un sistema di trazione isometrica a metà coscia con angoli standardizzati di ginocchio e anca. La produzione di forza verrà registrata tramite piastre di forza VALD.
7. Salto con contromovimento (CMJ) I partecipanti eseguiranno salti con contromovimento su piastre di forza VALD per valutare la funzione neuromuscolare. Completano tre salti di riscaldamento, seguiti da tre prove registrate, con le mani posizionate sui fianchi per minimizzare il contributo della parte superiore del corpo.

Protocollo di corsa in discesa I partecipanti arriveranno a digiuno durante la notte (per sessioni mattutine) o con un minimo di quattro ore di digiuno (sessioni di metà mattina, pomeriggio e sera). I partecipanti verranno familiarizzati con tutte le attrezzature utilizzate e le procedure prima che vengano effettuate le misurazioni basali di altezza, peso e composizione corporea e venga prelevato il campione di sangue venoso pre-test. I partecipanti completeranno poi un riscaldamento di cinque minuti su un tapis roulant con pendenza dell'1% a una velocità auto-selezionata. Dopo il riscaldamento, il tapis roulant verrà abbassato a una pendenza del -10% e i partecipanti correranno per 45 minuti al 70% della loro capacità aerobica massima.

- Ai partecipanti verrà richiesto di assumere i loro integratori assegnati quotidianamente per un periodo di quattro mesi. Durante questa fase, avranno brevi controlli circa ogni quattro settimane per monitorare il benessere e l'aderenza. A metà dell'integrazione (due mesi), è richiesta una breve visita per un test del sangue capillare essiccato (vedere Figura 1 per una panoramica della timeline dello studio).

Sebbene la durata complessiva dello studio si estenda per diversi mesi, la raccolta dei dati comporta solo nove visite in presenza, la maggior parte delle quali durerà meno di un'ora. Solo le sessioni principali di test di esercizio saranno di durata più lunga.

• La ricerca si svolgerà presso l'Università di St Mary's nei Performance Laboratories.
• Tutte le attrezzature di test utilizzate sono di proprietà dell'Università di St Mary's Twickenham. Tutti gli integratori saranno forniti da OmegaQuant. Tutte le procedure di test sono come delineato dalla British Association of Sport and Exercise Science.