Długoterminowe przyjmowanie kwasów omega-3 i wskaźnik omega-3 >8%: wpływ na regenerację fizjologiczną (IMPROVE-8)

Proponowane badanie będzie stosować metody ilościowe z wykorzystaniem randomizowanego projektu grup niezależnych. Uczestnicy zostaną przydzieleni do jednego z dwóch warunków: grupy placebo lub grupy suplementacji olejem rybim. Wszystkie testy będą odbywać się w Laboratoriach Wydajności Uniwersytetu St. Mary's.

Badanie przesiewowe i kwalifikowalność

Podczas wizyty wstępnej uczestnicy wyrażą świadomą zgodę i wypełnią formularz PAR-Q. Badanie przesiewowe kwalifikowalności obejmie potwierdzenie, że uczestnicy mają wskaźnik Omega-3 ≤ 5%, oceniany na podstawie próbki suchej plamki krwi pobranej z nakłucia palca. Próbki są przetwarzane przez OmegaQuant w ich laboratorium w Stirling, a wyniki są zazwyczaj zwracane w ciągu jednego tygodnia.

Uczestnicy zostaną również wykluczeni, jeśli obecnie spożywają ≥1 g/dzień suplementów oleju rybiego.

Randomizacja i zaślepienie

Kwalifikujący się uczestnicy zostaną losowo przydzieleni do jednej z dwóch grup eksperymentalnych za pomocą generatora liczb losowych (https://www.random.org). Badanie będzie prowadzone w podwójnie ślepej próbie: uczestnicy nie będą wiedzieć, który suplement otrzymują, a główni badacze zaangażowani w zbieranie danych również pozostaną zaślepieni. Dystrybucja suplementów i ewentualne korekty dawek będą przeprowadzane przez oddzielnego członka zespołu badawczego, który nie jest zaślepiony i nie uczestniczy w testowaniu uczestników ani analizie danych.

Testy przesiewowe/zapoznanie

Gdy wyniki wskaźnika Omega-3 będą dostępne, kwalifikujący się uczestnicy powrócą do laboratorium na fizjologiczne badanie przesiewowe/zapoznanie z baterią testów oraz otrzymanie suplementów. Procedury badania przesiewowego/zapoznania obejmują:

• Test progresywny na bieżni, rozpoczynający się od 8 km·h⁻¹ i zwiększający o 1 km·h⁻¹ co 3 minuty aż do dobrowolnego wyczerpania. Podczas testu zostaną wykonane poniższe pomiary:
• Pobieranie próbek mleczanu z krwi włośniczkowej (z palca lub płatka ucha) co 3 minuty.
• Ciągłą analizę oddech po oddechu za pomocą analizatora gazów online Vyntus.
• Monitorowanie tętna (Polar H10) i subiektywnej oceny wysiłku (RPE; skala Borga).

Sesja przesiewowa również wprowadza uczestników w baterię testów zilustrowaną na Rysunku 3.

Faza suplementacji (Część A)

Uczestnicy zostaną poproszeni o powstrzymanie się od:

• Alkoholu przez 48 godzin przed każdą sesją testową.
• Kofeiny przez 12 godzin przed każdą sesją testową.

Uczestnicy będą codziennie przyjmować przydzielone suplementy przez cztery miesiące. Badacze będą kontaktować się z uczestnikami mniej więcej co cztery tygodnie, aby ocenić przestrzeganie zaleceń i dostarczyć dodatkowe zapasy suplementów.

Po dwóch miesiącach powtórna próbka suchej plamki krwi oceni, czy poziomy Omega-3 w grupie oleju rybiego rosną zgodnie z oczekiwaniami. W razie potrzeby suplementacja zostanie dostosowana za pomocą kalkulatora OmegaQuant (https://omegaquant.com/omega-3-index-calculator/). Dostosowania będą zazwyczaj obejmować zmiany o około 0,5 g/dzień (EPA + DHA).

Aby zachować podwójne zaślepienie, dawki placebo również będą zmieniane o ±0,5 g/dzień, zapewniając, że zarówno badacz, jak i uczestnik pozostaną nieświadomi przydziału do grupy.

Po czterech miesiącach uczestnicy dostarczą kolejną suchą próbkę krwi. Celem jest osiągnięcie przez grupę oleju rybiego wskaźnika Omega-3 ≥ 8%. Uczestnicy, którzy nie osiągną swojego celu, będą kontynuować suplementację przez dodatkowe 2-4 tygodnie, po czym wykonają kolejne badanie krwi, aż do osiągnięcia wymaganego poziomu. Zostanie uwzględniony punkt odcięcia po dodatkowych 6 tygodniach.

Zakończenie tej fazy stanowi Część A: fazę suplementacji. Próba uszkodzenia mięśni wywołanego wysiłkiem (Część B) Około tydzień przed Częścią B uczestnicy powrócą do laboratorium, aby wykonać drugi test progresywny na bieżni w celu określenia odpowiedniej prędkości dla protokołu biegu z góry.

Uczestnicy będą następnie uczestniczyć w laboratorium przez cztery kolejne dni, aby wykonać oceny przed i po wysiłku związane z protokołem uszkodzenia mięśni wywołanego wysiłkiem.

Proponowane badanie wymaga od uczestników przyjmowania suplementacji olejem rybim w celu zwiększenia ich wskaźnika Omega-3 i zbadania, czy przynosi to korzyści w zakresie wydolności lub regeneracji, poza dobrze udokumentowanymi długoterminowymi efektami zdrowotnymi związanymi z przyjmowaniem około 3 g/dzień EPA + DHA. Suplementacja olejem rybim jest szeroko stosowana zarówno w kontekście klinicznym, jak i ogólnego zdrowia i jest uznawana za bezpieczną w dawkach do 5 g/dzień, zgodnie z uznaniem Europejskiego Urzędu ds. Bezpieczeństwa Żywności.

Uczestnicy zostaną zrekrutowani do ukończenia fazy suplementacji i udziału w protokole uszkodzenia mięśni wywołanego wysiłkiem (EIMD). Zostaną losowo przydzieleni do jednej z dwóch grup badawczych (olej rybi lub placebo).

Suplementacja olejem rybim będzie dostarczana przez OmegaQuant (https://parasolnutrition.com/product/omega-3-fish-oil/), ten suplement jest dostępny komercyjnie

Bateria testów:

1. Próbki krwi żylnej Próbki krwi żylnej będą pobierane w celu oceny stężeń spoczynkowych biomarkerów zapalnych i uszkodzenia mięśni, w tym interleukiny-6 (IL-6), interleukiny-10 (IL-10), czynnika martwicy nowotworów-α (TNF-α), mioglobiny, dehydrogenazy mleczanowej (LDH) i kinazy kreatynowej (CK). Próbki będą pobierane przez wykwalifikowanych flebotomistów na Uniwersytecie St Mary's (Toby Helder, prof. Charles Pedlar i dr Jessica Hill).

   Wszystkie próbki żylne będą przechowywane w temperaturze -80°C, a później analizowane za pomocą testów immunoenzymatycznych (ELISA). Pobieranie próbek żylnych będzie odbywać się we wszystkich wymaganych punktach czasowych testowania.

2. Testy krwi włośniczkowej FORD/FORT

   Próbki krwi włośniczkowej z opuszki palca (odpowiednio 50 µL i 20 µL) będą pobierane w celu oceny stresu oksydacyjnego za pomocą urządzenia Clini5 (Callegari, Włochy):

   • FORT: Test Wolnych Rodników Tlenowych
   • FORD: Test Obrony przed Wolnymi Rodnikami Tlenowymi Dostarczają one ogólnej oceny statusu redoks. Urządzenie wykorzystuje szybkie, gotowe odczynniki, które nie wymagają chłodzenia ani ręcznego przygotowania. Wyniki są dostępne w ciągu 6 minut.
3. Test krwi włośniczkowej hs-CRP Próbka krwi włośniczkowej z opuszki palca (20 µL) będzie pobierana w celu pomiaru wysokoczułego białka C-reaktywnego (hs-CRP), markera ogólnoustrojowego stanu zapalnego. Analiza będzie przeprowadzana za pomocą analizatora Eurolyser Cube S (Eurolyser, Austria), a wyniki będą dostępne w ciągu 5 minut.

4. Subiektywne odczucie bólu mięśni

   Uczestnicy będą zgłaszać ból mięśni za pomocą dwóch zwalidowanych skal:

   • Wizualna skala analogowa (VAS)
   • Skala Borga CR-10 Będą one stosowane we wszystkich odpowiednich punktach czasowych.

5. Test maksymalnej siły (dynamometr Cybex)

   Siła izokinetyczna:

   Szczytowy moment obrotowy prostowników kolana będzie mierzony przy 60°·s⁻¹ za pomocą dynamometru izokinetycznego Cybex. Będzie to wykonane we wszystkich punktach czasowych testowania.

6. Izometryczny ciąg z połowy uda (IMTP) Szczytowa siła i szybkość rozwoju siły będą oceniane za pomocą stanowiska do izometrycznego ciągu z połowy uda ze zstandardyzowanymi kątami kolan i bioder. Produkcja siły będzie rejestrowana za pomocą płyt siłowych VALD.
7. Skok z przeciwwymachem (CMJ) Uczestnicy będą wykonywać skoki z przeciwwymachem na płytach siłowych VALD w celu oceny funkcji nerwowo-mięśniowej. Wykonają trzy skoki rozgrzewkowe, a następnie trzy rejestrowane próby, z rękami umieszczonymi na biodrach, aby zminimalizować udział górnej części ciała.

Protokół biegu z góry Uczestnicy przybędą na czczo, albo przez noc (dla sesji porannych), albo z minimum czterogodzinnym postem (sesje przedpołudniowe, popołudniowe i wieczorne). Uczestnicy zostaną zapoznani ze wszystkim używanym sprzętem i procedurami, zanim zostaną wykonane pomiary wyjściowe wzrostu, wagi i składu ciała oraz pobrana przedtestowa próbka krwi żylnej. Następnie uczestnicy wykonają pięciominutową rozgrzewkę na bieżni z nachyleniem 1% przy samodzielnie wybranej prędkości. Po rozgrzewce bieżnia zostanie obniżona do nachylenia -10%, a uczestnicy będą biegać przez 45 minut przy 70% swojej maksymalnej wydolności tlenowej.

- Uczestnicy będą musieli codziennie przyjmować przydzielone suplementy przez okres czterech miesięcy. Podczas tej fazy będą mieli krótkie kontrole mniej więcej co cztery tygodnie, aby monitorować samopoczucie i przestrzeganie zaleceń. W połowie suplementacji (dwa miesiące) wymagana jest krótka wizyta w celu wykonania testu suchej plamki krwi (zobacz Rysunek 1 dla przeglądu harmonogramu badania).

Chociaż całkowity czas trwania badania obejmuje kilka miesięcy, zbieranie danych obejmuje tylko dziewięć wizyt osobistych, z których większość będzie trwać krócej niż godzinę. Tylko główne sesje testów wysiłkowych będą dłuższe.

• Badanie będzie odbywać się na Uniwersytecie St Mary's w Laboratoriach Wydajności.
• Cały używany sprzęt testowy jest własnością Uniwersytetu St Mary's Twickenham. Wszystkie suplementy będą dostarczane przez OmegaQuant. Wszystkie procedury testowe są zgodne z wytycznymi Brytyjskiego Stowarzyszenia Nauki o Sporcie i Ćwiczeniach.