Występowanie przeciwciał SARS-Cov-2 w surowicy w próbkach krwi przed pandemią (SPARE) (SPARE)

1. Tytuł Częstość występowania przeciwciał przeciwko SARS-Cov-2 w próbkach krwi przed pandemią

2. Tło Pierwsze doniesienia o infekcjach wywołanych przez SARS-CoV-2, wirus Beta Corona, jednoniciowy RNA, zostały opublikowane w Wuhan w Chinach w grudniu 2019 r. Stamtąd infekcja szybko rozprzestrzeniła się w formę pandemiczną.

   Obraz kliniczny zakażenia jest bardzo zróżnicowany, od postaci całkowicie bezobjawowych lub słabo objawowych, z objawami nieswoistymi i grypopodobnymi, do zespołu ostrej niewydolności oddechowej, który u pacjentów wymagających hospitalizacji na OIT i inwazyjnej wentylacji mechanicznej może prowadzić do zgonu. Większy stopień ciężkości przebiegu zakażenia zależy w dużej mierze od stanu ogólnego chorych i jest maksymalny u osób w podeszłym wieku oraz u nosicieli chorób współistniejących. Niedawne badania oceniły również powiązanie grup krwi ABO jako możliwych biologicznych markerów podatności na COVID-19, sugerując, że osoby z grupą krwi 0 mają mniejsze szanse na zakażenie, podczas gdy osoby z grupą krwi A są najbardziej zagrożone, a osoby z grupą krwi grupa B ma największe powikłania w przypadku infekcji.

   We Włoszech pierwszy przypadek nie „importowany” pochodzi z lutego 2020 r. u osoby zamieszkałej w Lombardii, w prowincji Lodi. Jednak nowe dowody na osobach z pozytywnym wynikiem testu na przeciwciała w próbkach surowicy sugerują, że wirus zaczął krążyć przed oficjalną datą.

   Początkowo, w związku z nagłą eksplozją zachorowań, nadzór epidemiologiczny koncentrował się na pacjentach związanych z placówkami służby zdrowia, ponieważ byli oni kontaktami objawowymi, podejrzanymi i obarczonymi dużym ryzykiem. Niewiele jest danych dotyczących infekcji bezobjawowych lub z łagodnymi, nieswoistymi i dopracowanymi objawami, które według danych z Chin można by określić ilościowo u około 85% całkowitej liczby zakażonych. Właśnie na temat roli transmisji z człowieka na człowieka w przebiegu bezobjawowego zakażenia oraz w subklinicznych fazach choroby brakuje danych epidemiologicznych, mimo że mogłyby one okazać się bardzo ważne. W rzeczywistości dzięki dostępności testów serologicznych, które identyfikują obecność przeciwciał anty-SARS-CoV-2, okazało się, że część populacji została zakażona wirusem i rozwinęła się odpowiedź przeciwciał, a prawie 30% osób z przeciwciałami były bezobjawowe. Dlatego zrozumienie częstości występowania choroby i częstości odpowiedzi przeciwciał wydaje się być bardzo interesujące, ponieważ wydaje się, że ustalono, że osoby bezobjawowe mogą przenosić zakażenie SARS-CoV-2 przez okres, który w niektórych przypadkach okazał się dłuższy niż 14 dni.

   W celu oceny seroprewalencji zakażenia COVID-19 wśród osób bezobjawowych, a tym samym uzyskania rzeczywistego oszacowania początku krążenia wirusa we Włoszech, w niniejszym badaniu badacze zamierzają przeprowadzić specyficzne testy serologiczne (przeciwciała całkowite) w celu identyfikacji rozpowszechnienia przeciwciał SARS-2-CoV wśród zdrowych dawców krwi, którzy trafili do punktów krwiodawstwa DIMT w Wenecji w okresie pandemii (ok. 2500 dawców okresowych, którzy zgłosili się do Centrum Transfuzjologii w okresie od maja do października 2019 r.).

   Próbki należące do zdrowych ochotników (około 500), którzy zgodzili się oddać swoją krew, zostaną również ocenione w celu ustalenia puli osób kontrolnych należących do Międzyinstytucjonalnego Multidyscyplinarnego Biobanku (BioBIM) Centrum Badawczego IRCCS San Raffaele Pisana w Rzymie. Wreszcie, w celu oceny wpływu seroprewalencji u osób z chorobami przewlekłymi (około 1000), takimi jak choroby sercowo-naczyniowe, onkologiczne, oddechowe i neurodegeneracyjne, które reprezentują grupy pacjentów z pozytywnym wynikiem na COVID-19 z gorszym rokowaniem, próbki pacjentów z wymienionymi przeanalizowane zostaną choroby współistniejące, obecne już w BioBIM. Niedawno okazało się, że seroprewalencja wzrasta wraz z wiekiem i że młodsze grupy mają mniejszą podatność na infekcje. Dlatego wszystkie próbki zostaną przeanalizowane pod kątem jakiegokolwiek związku z płcią, grupą wiekową i grupą krwi.

3. Promotor Prof.ssa Fiorella Guadagni
4. Sponsor/Promotor IRCCS San Raffaele Pisana
5. Witryna IRCCS San Raffaele Pisana
6. Typ badania Wieloośrodkowe, retrospektywne, obserwacyjne, niefarmakologiczne, na próbkach biologicznych, prowadzone w IRCCS San Raffaele Pisana, Rzym, mające na celu weryfikację seroprewalencji przeciwciał SARS-COV-2 w populacji.

7. Cele 7.1 CEL GŁÓWNY: Celem badania jest określenie odsetka osób w populacji ogólnej, u których w okresie poprzedzającym rozprzestrzenianie się wirusa we Włoszech rozwinęła się odpowiedź przeciwciał na determinanty antygenowe SARS-CoV-2.

   7.2 Cel drugorzędny: Cele drugorzędne to możliwość scharakteryzowania różnic w częstości występowania pomiędzy płciami, grupami wiekowymi i grupami krwi, także w odniesieniu do bardziej niekorzystnych przebiegów u osób z innymi chorobami przewlekłymi.

8. Uczestnicy

   Protokół badania obejmie łącznie 3500 osób (3000 osób zdrowych i 1000 pacjentów z chorobami przewlekłymi) w wieku > 18 lat, obojga płci. Dwie grupy zostaną utworzone w następujący sposób:

   A- Osoby zdrowe wśród krwiodawców okresowych Centrum Transfuzji i dawców-wolontariuszy BioBIM B- Pacjenci z chorobami przewlekłymi, w tym chorobami układu krążenia, oddechowego, onkologicznymi i neurodegeneracyjnymi związanymi z BioBIM

9. Kryteria włączenia/wykluczenia 9.1 Kryteria włączenia - Obie płcie

   • Wiek >18 lat
   • Podpisana świadoma zgoda na pobranie / przechowywanie próbki w Banku Biologicznym 9.2 Kryteria wykluczenia
   • w przypadku osób zdrowych, wszystkie osoby, które wykazały jakiekolwiek objawy, nawet łagodne, w ciągu 28 dni przed dawstwem.
   • pacjentów, którzy nie podpisali świadomej zgody na przechowywanie ich próbek w Banku Biologicznym.

   9.3 Rezygnacja Nie dotyczy.

10. Projekt badania

    Badanie potrwa 9 miesięcy i obejmuje 3 następujące fazy:

    Faza 1: identyfikacja próbek Faza 2: analiza próbek Faza 3: analiza statystyczna

11. Sposoby kontaktu z potencjalnymi uczestnikami badania Nie dotyczy. Badanie zostanie przeprowadzone wyłącznie na próbkach przechowywanych w Biobanku.
12. Metody pozyskiwania, analiza statystyczna danych i przechowywanie danych surowych, zgodność z przepisami dotyczącymi prywatności Gromadzenie danych będzie prowadzone w dedykowanej i anonimowej bazie danych przez Kierownika Badacza. Dane będą przechowywane na dedykowanym i chronionym serwerze.
13. Metodologia statystyczna 13.1 Analiza statystyczna Analiza statystyczna wszystkich parametrów zostanie przeprowadzona pod nadzorem jednostki Biomarker Discovery and Advanced Technologies (BioDAT) IRCCS San Raffaele Pisana.

Analiza danych zostanie przeprowadzona z wykorzystaniem częstości i procentów dla zmiennych kategorycznych oraz średniej i odchylenia standardowego dla zmiennych ilościowych. Test t zostanie użyty do porównania średnich, a wartość p mniejsza niż 0,05 zostanie uznana za istotną statystycznie. Wszystkie analizy zostaną przeprowadzone w pakiecie statystycznym SPSS dla nauk społecznych.

13.2 Liczebność próby Badanie SPARE jest badaniem pilotażowym, którego celem jest weryfikacja adekwatności i wykonalności projektu oraz uzyskanie wstępnych danych pozwalających określić liczebność próby końcowej. Liczebność próby reprezentuje więc kolejno liczba osób, które oddały krew w okresie maj-październik 2019 (około 2500) oraz wszystkich osób (zdrowych i przewlekle chorych), które zgłosiły się do BioBIM w 2019 roku (około 1500).

14) Wymogi dotyczące oryginalności i naukowej solidności badania Badanie SPARE ma na celu ocenę seroprewalencji zakażenia COVID-19 wśród osób bezobjawowych, a tym samym uzyskanie rzeczywistego oszacowania początku krążenia wirusa we Włoszech. Dowody obecne w literaturze odnoszą się głównie do okresu faktycznej pandemii, brakuje natomiast danych dotyczących miesięcy poprzedzających jesień 2019 r. To samo dotyczy oficjalnych danych publikowanych przez Ministerstwo Zdrowia we współpracy z Narodowym Instytutem Statystycznym (ISTAT). Badanie to pozwoli nam określić rozprzestrzenianie się wirusa SARS-2-CoV w okresie na długo przed datą rozpoczęcia pandemii we Włoszech.

15) Oczekiwane wyniki

Główne oczekiwane rezultaty to:

1. Identyfikacja seroprewalencji przeciwciał anty-SARS-2-CoV w populacji przed datą oficjalnego prześledzenia początku zakażenia we Włoszech;
2. Opis wszelkich związków z płcią, wiekiem, grupą krwi, wynikami pacjentów z chorobami przewlekłymi.

16) Sprawozdanie z postępów Wnioskodawcy złożą Komisji Etyki sprawozdanie z postępów w badaniu na koniec każdego roku i na koniec badania.

17) Wykonalność

- N. próbki pacjentów, które mogą być włączone, są zgodne z projektem badania

• obecność niezbędnego sprzętu

• odpowiedni personel 18) Jednoczesne leczenie Nie dotyczy. Badanie SPARE dotyczy wyłącznie próbek biologicznych. 19) Stosunek kosztów do korzyści Badanie jest wspierane przez IRCCS San Raffaele Pisana. Włączenie próbek należących do zdrowych dawców i pacjentów do tego badania klinicznego może przynieść korzyści w zakresie dokładniejszego postępowania i pozyskiwania wskazań na rozprzestrzenianie się wirusa Sars-COV-2 w populacji bezobjawowej. Nie ma żadnych zagrożeń.

  20) Znaczenie etyczne Badanie jest przeprowadzane na próbkach pacjentów przechowywanych w Bankach Biologicznych, w związku z czym nie ma problemów natury etycznej z jego wykonaniem.

  21) Ubezpieczenie Procedury przewidziane do badania w tym ośrodku nie dotyczą bezpośrednio pacjentów, ale analizę próbek pobranych w ośrodkach, do których się zgłaszają. Badacz wyznaczony do analizy próbek jest objęty polisą ubezpieczeniową zawartą w umowie zawartej z IRCCS San Raffaele Pisana.

  22) Publikacja wyników Zgodnie z obowiązującymi przepisami dotyczącymi poufności danych wrażliwych i ochrony patentowej wyniki badania zostaną przekazane do publikacji w ciągu 6 miesięcy od dnia zamknięcia bazy.

  23) Świadoma zgoda Złożenie określonej świadomej zgody na to badanie na anonimowych próbkach z banków biologicznych lub dużych kolekcji nie ma zastosowania.

  24) Aspekty etyczne Niniejszy protokół zostanie przeprowadzony zgodnie z zasadami etycznymi wywodzącymi się z Deklaracji Helsińskiej, z poszanowaniem GCP i obowiązujących przepisów.

  25) Referencje

  1. Zhu N, Zhang D, Wang W, Li X, Yang B, Song J i in. Chiński zespół badający i badający nowy koronawirus Nowy koronawirus od pacjentów z zapaleniem płuc w Chinach, 2019 r. N angielski J Med. 2020;382(8):727-33. 10.1056/NEJMoa2001017
  2. Światowa Organizacja Zdrowia (WHO). Nowy koronawirus - Chiny. Genewa: WHO; 12 stycznia 2020 r. [Dostęp 09 października 2020]. Dostępne z: https://www.who.int/csr/don/12-january-2020-novel-coronavirus-china/en/
  3. Santos-Sánchez NF, Salas-Coronado R. Medwave. Pochodzenie, cechy strukturalne, środki zapobiegawcze, diagnostyka i potencjalne leki zapobiegające COVID-19. 2020 25 września;20(8):e8037. doi: 10.5867/medwave.2020.08.8037.
  4. Luo L, Fu M, Li Y, Hu S, Luo J, Chen Z, Yu J, Li W, Dong R, Yang Y, Tu L, Xu X. Potencjalny związek między powszechnymi chorobami współistniejącymi a ciężkością i śmiertelnością choroby koronawirusowej 2019: analiza zbiorcza. Clin Cardiol. 7 października 2020 r. doi: 10.1002/clc.23465.
  5. Zaho J, Yang Y, Huang H, Li D, Gu D., Lu X i in. Związek między grupą krwi ABO a podatnością na COVID-19. 10.1101/2020.03.11.20031096
  6. Zalba Marcos S, Luisa Antelo M, Galbete A, Etayo M, Ongay E, García-Erce JA. Zakażenie i zakrzepica związana z COVID-19: możliwa rola grupy krwi ABO. Med Clin (wyd. angielski). 26 września 2020 r. doi: 10.1016/j.medcle.2020.06.013.
  7. Livingston E, Bucher K. Choroba koronawirusowa 2019 (COVID-19) we Włoszech. JAMA. 2020;323(14):1335. 10.1001/jama.2020.4344
  8. Mizumoto K, Kagaya K, Zarębski A, Chowell G. Szacowanie bezobjawowego odsetka przypadków choroby koronawirusowej 2019 (COVID-19) na pokładzie statku wycieczkowego Diamond Princess, Jokohama, Japonia, 2020. Euro Surveill 2020;25(10):2000180.
  9. ISTAT. Primi risultati dell'indagine di sieroprevalenza sul SARS-CoV-2. Dostępna prasa https://www.istat.it/it/archivio/246156
  10. Oran DP i in. Rozpowszechnienie bezobjawowej infekcji SARS-CoV-2 – przegląd narracyjny. Ann Int Med 2020; 173:362-376. doi.org/10.7326/M20-3012.
  11. Pagani G i in. Seroprewalencja SARS-CoV-2 znacznie różni się w zależności od wieku: Wstępne wyniki badań przesiewowych populacji masowej. J zarażać. 2020 19 września; S0163-4453(20)30629-0. doi: 10.1016/j.jinf.2020.09.021.