Poziomy neurotrofin w moczu jako potencjalne biomarkery nadreaktywności pęcherza: badanie kliniczno-kontrolne (urinary)

Zgodę komisji etyki z dnia 22.02.2024 r. i numer 2024-03/01 uzyskano od komisji etyki wydziału medycyny Uniwersytetu Erzincan Binali Yıldırım na badanie.

W okresie od lutego 2024 r. do lipca 2024 r. do badania prospektywnie włączono pacjentów w wieku od 18 do 75 lat, przyjętych do poradni urologicznej ze wstępnym rozpoznaniem OAB i zdiagnozowanym OAB. Pacjentów poproszono o wypełnienie 3-dniowego dzienniczka mikcji. OAB rozpoznano na podstawie skargi pacjenta dotyczącej parcia naglącego, z lub bez naglącego nietrzymania moczu jako głównego objawu, zgodnie z kryteriami określonymi przez Międzynarodowe Towarzystwo ds. Kontynencji. Badanie przeprowadzono zgodnie z założeniami Deklaracji Helsińskiej z 2008 roku.

Rejestrowano dane demograficzne, w tym wiek, płeć i BMI. Za pomocą wyników kwestionariusza OAB-V8 (0-40) oraz wyników w skali ciężkości pilności Indevus (IUSS) rejestrowano również liczbę epizodów parcia naglącego, częstomoczu i nokturii. Kwestionariusz OAB-V8 to formularz składający się z 8 pytań, przy czym każde pytanie jest oceniane w przedziale od 0 do 5, a łączny wynik wynosi 40 punktów. Całkowity wynik powyżej 8 uznaje się za istotny [7]. Skala ciężkości pilności Indevus (IUSS) sklasyfikowana jako 0–4, odpowiednio: brak pilności, sporadyczna pilność, która zawsze była tolerowana, pilność, którą można było tolerować przez 5 minut, pilność, której nie można było tolerować, i pilność, której zwykle towarzyszyło nietrzymanie moczu [6, 8]. Podczas wizyt ambulatoryjnych rejestrowano grupę krwi, stężenie kreatytyny w próbkach krwi obwodowej i moczu. Poziomy BDNF i NGF mierzono w próbkach moczu pobranych przy przyjęciu pacjentów do przychodni. Przed zastosowaniem leczenia zbadano próbki moczu. Od wszystkich uczestników uzyskano świadomą zgodę przed pobraniem moczu.

Z badania wyłączono pacjentów z infekcją dróg moczowych, zapaleniem ogólnoustrojowym, zaburzeniami badań czynności nerek, pacjentami po przebytych operacjach urologicznych, pacjentami z nowotworem urologicznym w wywiadzie, pacjentami z kamicą pęcherza moczowego, łagodnym rozrostem prostaty i zwężeniem cewki moczowej. Jako grupę kontrolną włączono pacjentów, którzy zostali przyjęci do poradni z innych powodów i którzy nie mieli objawów OAB i mieli prawidłową czynność oddawania moczu. Rejestrowano także próbki moczu tych pacjentów.

Próbki moczu pobrano zarówno od osób z OAB, jak i od osób kontrolnych. Mocz zbierano do sterylnych słoików na próbki, przenoszono do sterylnych probówek i zamrażano w temperaturze 80,8°C. Próbki następnie rozmrożono i wirowano przy względnej sile odśrodkowej 200° przez 5 minut. Supernatant podzielono na porcje i przechowywano w temperaturze 80,8°C aż do dalszego przetwarzania. Jednocześnie pobierano 3 ml próbkę moczu w celu pomiaru poziomu kreatyniny (Cr) w moczu. Próbki moczu wykorzystano do oznaczenia poziomu ludzkiego neurotroficznego czynnika pochodzenia mózgowego (BDNF) i ludzkiego czynnika wzrostu nerwów (NGF). Zestawy wykorzystano do badania poziomu BDNF (Shanghai Coon Koon Biotech Co., Ltd China. Nr kat.: CK-bio-10643) i NGF (Shanghai Coon Koon Biotech Co., Ltd. Chiny. Nr kat.: CK-bio-12600) w oparciu o technologię podwójnego przeciwciała, test immunoenzymatyczny (ELISA). Analityczny (liniowy) zakres wykrywalności BDNF wynosił 1-24 ng/ml. Minimalna granica wykrywalności BDNF wynosiła 0,1 ng/ml. Analityczny (liniowy) zakres wykrywalności NGF wynosił 10-160 pg/ml. Minimalna granica wykrywalności dla NGF wynosiła 1,0 pg/ml.

Dane zarejestrowane na początku badania porównano pomiędzy grupami.