Efeito da Farmacogenética no Nível e Resposta Plasmática do Imatinibe

Introdução:

A leucemia mieloide crônica (LMC) é uma doença mieloproliferativa com incidência de um a dois casos por 100.000 adultos. É responsável por aproximadamente 15% dos casos recém-diagnosticados de leucemia em adultos.

A introdução do imatinibe, o inibidor da tirosina quinase (TKI), no início do século 21 é considerada um avanço no tratamento da LMC. Na grande maioria dos pacientes, o tratamento com imatinibe induz respostas citogenéticas e mesmo moleculares com níveis de transcrição BCR-ABL1 muito baixos ou indetectáveis. Esses pacientes permanecem livres de progressão para crise blástica. No entanto, o imatinibe não cura a doença porque é incapaz de erradicar as células-tronco leucêmicas, o que, portanto, fornece um reservatório potencial para recaídas.

Apesar de sua eficácia e perfil farmacocinético favorável, existe uma grande variabilidade interindividual nas concentrações plasmáticas de imatinibe, o que pode levar à falha do tratamento e à progressão da doença.

Polimorfismos em genes relacionados à absorção, distribuição, metabolismo e excreção do imatinibe podem afetar a biodisponibilidade e, consequentemente, a resposta ao medicamento.

Objetivo do estudo:

O estudo visa investigar o possível efeito de polimorfismos genéticos em certas enzimas metabolizadoras [CYP3A5 * 3 (rs 776746), CYP2C8 * 3 (rs 11572080 e rs 10509681)] e transportadores de membrana [ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) e SLC22A1 1222 A > G (rs 628031)] no nível plasmático e na resposta molecular (MMR) do imatinibe em pacientes com LMC.

Esses polimorfismos foram selecionados com base em sua relevância para a farmacocinética do imatinibe e em sua frequência em caucasianos.

O estudo também visa fornecer aos pacientes com LMC uma opção de tratamento personalizada, provavelmente melhorando a resposta e reduzindo os efeitos colaterais.

Pacientes e métodos:

Pacientes:

O estudo incluirá pacientes com diagnóstico hematológico, citogenético e molecular documentado de LMC em fase crônica, que estão em tratamento contínuo com dose oral de 400 mg de imatinibe por dia por pelo menos 12 meses no Departamento de Oncologia Médica, South Egypt Cancer Institute (SECI), Assist. Egito.

Os critérios de exclusão são: duração da terapia com imatinibe inferior a 12 meses, baixa adesão ao tratamento e identificação de mutação(ões) genética(s) no domínio quinase de BCR-ABL1.

Os pacientes serão divididos em 2 grupos de acordo com sua resposta molecular ao imatinibe como segue:

Grupo I: Pacientes com LMC com MMR Grupo II: Pacientes com LMC sem MMR Os pacientes dos dois grupos serão comparados quanto ao nível plasmático de imatinibe e os polimorfismos genéticos selecionados.

Métodos:

Amostra de sangue:

Três amostras de sangue (3 ml para cada) serão coletadas em tubos contendo EDTA por punção venosa para medição do nível plasmático de imatinibe, medição do nível de transcrição do BCR-ABL1 e para genotipagem.

Medição do nível mínimo de Imatinibe:

Amostras de sangue serão coletadas após 24 horas da dose anterior (vale) e após pelo menos 5 dias de uso regular do medicamento para garantir que o estado de equilíbrio seja alcançado. Dentro de 1 hora após a coleta, as amostras de sangue serão centrifugadas a 3.000 rpm por 10 minutos em temperatura ambiente e serão armazenadas a -20°C até a análise.

O nível plasmático de imatinibe será medido por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção ultravioleta (HPLC-UV) de acordo com o método descrito por Barratt et al.

Medição do nível de transcrição BCR-ABL1:

O RNA total será extraído dos leucócitos do sangue periférico pelos kits de extração de RNA disponíveis. O nível de transcrição do BCR-ABL1 será quantificado por meio da análise da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real para avaliar a resposta molecular ao imatinibe após 12 meses de tratamento com imatinibe.

Genotipagem:

O DNA será extraído dos leucócitos pelos kits de extração de DNA disponíveis e será armazenado a -80°C até a genotipagem.

A genotipagem será realizada para CYP3A5*3 (rs 776746), CYP2C8*3 (rs 11572080 e rs 10509681), ABCB1 2677 G>T/A (rs 2032582) e SLC22A1 1222 A > G (rs 628031) pela PCR